杨干瘤溃疡病原菌生物学测试及林间防病药品筛选

孙玉梅

摘要：为控制病害提供数据支持，做了病原菌生物学测试及林间防病药品的筛选。结果，pH值2.5～8.5间茵体都能存活生长，pH值5.5茵体生长最旺盛；摄氏温度25℃恒温条件下茵体生长旺盛，5～35℃都能生长，40℃不生长。林间防病药品筛选70%甲基托布津和2：2：100波尔多液2种药品治愈病瘤伤口效果较好。

关键词：杨干瘤溃疡；病原菌生物学；林间防病药品

杨干瘤溃疡是近几年在辽宁省朝阳地区出现较多对林木损害严重的杨树树干病害。经检测鉴定，认为病原菌是鞠国柱教授提出的东北球腔菌（Mycosphaerella mandshurica），无性孢子时代属于半知菌类的杨棒盘孢（Coryneum populinum Bresad.）。病瘤溃疡是杨树灰斑病疫苗的黑脖子病灶部位在林间的表现症状。笔者做了不同pH值、不同温度对病菌生长影响测试和林间防病药品筛选的探讨。

1试验材料

1.1病菌材料采集

2013年5月，在辽宁省朝阳县廿家子林场5年生杨树树干上取瘤状病灶，取样部位在病瘤与健康部位的交界处。用解剖刀将树皮和木质浅层割下带回室内，在70%酒精中浸泡1min，再放人1/4漂白粉溶液中浸泡3min，取出用蒸馏水洗3遍，放入4℃的冰箱中备用。

1.2农药品种

①50%多菌灵WP呵湿粉），江苏蓝丰生物化工股份有限公司；②70%甲基托布津WP，江苏龙灯化学有限公司；③2：2：100波尔多液WP，美国仙农有限公司，④20%腐必清乳油，辽宁省微生物研究所（辽宁朝阳）。

2试验方法

2.1 pH值对病菌生长影响试验

将病菌接种到pH值2.5～9.5的PDA（马铃薯葡萄糖琼脂）试管斜面培养基上观察生长状况。操作分3步：（1）将试验病菌材切碎，用纱布过滤，使病菌入无菌水中形成菌液，放在PDA平板培养基上，在25℃恒温箱中悬滴培养。（2）用HCL（盐酸）和NaOH（氢氧化钠）将PDA培养基原料在pH计的监测下调释成2.5、3.5、4.5、5.5、6.5、7.5、8.5、9.5的8种pH值培养基料，然后各自装入22cm试管中形成200mm²斜面培养基。（3）将平板培养基上的病菌切成直径5mm²菌块分别接入各pH值试管斜面培养基上。每pH值5个重复，在25℃恒温下悬滴培养150 h观察菌落生长状况。

2.2温度对病菌生长影响试验

将直径5mm2个菌块接种在PDA试管斜面200mm²培养基上，置于5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃的恒温箱中悬滴培养150 h观察菌落生长状况。每温度处理3个重复。

2.3林间防治药品筛选

2.3.1标准地概况。2014年5月在辽宁省朝阳县尚志乡7林班12小班4龄杨树林，随机选择120株杨干瘤溃疡树做试验，另选30株病树做对照组。该林分面积10hm²，宏观远望林相整齐，树势旺盛。但是林内树干瘤状溃疡株率占95%，瘤体树皮外翻开裂，每个病瘤上面开裂伤口1～10个不等，病瘤溃疡液大量的流淌。

2.3.2施药方法。用板刷沾药涂于病瘤开裂伤口处，连涂3次，间隔7天1次。4种供试药品施用浓度分别为：50%多菌灵5倍液、70%甲基托布津5倍液、2：2：100波尔多液原剂、20%腐必清乳油5倍液。每种药品各涂病树30株。

2.3.3药效调查和资料统计分析方法。第3次涂药结束30天以后调查防治瘤体开裂伤口癔合数量。每药品防病效果按10株为1个单元组，3次重复做数据整理统计分析，多重比较用q检验方法。

3结果分析

3.1 pH值对病原菌生长影响分析

用PDA试管斜面培养基在25℃恒温下悬滴培养150h观察各pH值菌落生长状况各不相同，见表1。从表1可见，菌落在pH值2.5～8.5之间都可存活生长，最适宜为pH值5.5。当pH值为2.5和8.5时菌落平面只增加3mm²，当pH值9.5时菌株频于死亡。说明该菌耐酸性好于耐碱性，弱碱能影响菌的生长，强碱可抑制菌的生命。

3.2温度对病菌生长影响分析

用PDA试管斜面培养基悬滴培养150 h，5℃、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%8个温度处理菌落生长状况各不相同，结果见表2，病菌在25℃恒温下生长旺盛。5℃生长量很小。40%不生长，颜色焦暗。

3.3林间防治药品筛选

4种药品防治杨干瘤溃疡都有不同程度的治癔伤口和抑制溃疡的作用，愈合的病瘤全部停止流淌溃疡液。各药品处理单株伤口平均愈合率见表3。

因为对照组病瘤伤口数量不减反增，计算伤口校对平均癔合率已经无意义，因此直接用表3做百分数反正弦换算，见表4。

用表4数据做方差分析，见表5。F检验结果表明，F=5.41>F_0.053，8）=4.07，差异显著。

用q检验方法做各药品间多重比较，见表6。通过q检验70%甲基托布津与2：2：100波尔多液之间差异不显著1.980.05（3.8）=4.04，甲基托布津与多菌灵或腐必清之间比较差异极显著。

4结论

通过病原菌生物学测试和林间防病农药品种的筛选，明确了3项结果：

（1）杨干瘤溃疡病原菌生长最宜pH值是5.5，pH值2.5～8.5之间菌体可存活或生长，pH值9.5菌体不生长，频于死亡。

（2）病菌在25℃恒温条件下生长旺盛。5～35%均可生长。温度低不如温度高生长快。当恒温40%时菌体不生长。

（3）4种农药防治杨干瘤溃疡都有治癔伤口抑制溃疡作用。其中，70%甲基托布津和2：2：100波尔多液2种药品防治杨干瘤溃疡效果较好，可在生产中应用。