当归片对白血病患者血清叶酸、VB12及EPO的影响

罗伟，冀林华，崔森，马晓静，冯婷婷，殷玉娟

(青海大学附属医院 血液科，青海 西宁 810001)

当归片对白血病患者血清叶酸、VB12及EPO的影响

罗伟Δ，冀林华，崔森，马晓静，冯婷婷，殷玉娟

(青海大学附属医院 血液科，青海 西宁 810001)

目的 探讨当归片对白血病患者血清叶酸、维生素B12(VB12)、促红细胞生成素(erythropoietin，EPO)及脾脏特异性免疫的影响及其意义。方法 选取青海大学附属医院已确诊为白血病的患者42例，采用随机数字表法将患者随机分为实验组和对照组，对照组21例，予临床常规方法治疗，实验组21例，在临床常规治疗基础上加用当归片4片/次，每天3次口服。4周为1个疗程，共治疗2个疗程。治疗结束后比较2组患者的血清叶酸、VB12及EPO水平、脾脏特异性免疫。结果 与对照组相比，治疗后实验组血清VB12、EPO水平较低，叶酸水平较高(P<0.05)。实验组VB12和EPO、叶酸和VB12以及叶酸和EPO之间呈正相关(r=0.889，r=0.847，0.844；均P=0.000)。与对照组相比，实验组淋巴细胞增殖、人白细胞(位点)DR抗原[human leukocyte antigen(locus)，HLA-DR]比例较高，caspase-3细胞阳性指数较低(P<0.05)。结论 当归片能有效调节白血病患者血清VB12、EPO、叶酸水平，提高脾脏特异性免疫功能。

白血病；当归片；叶酸；维生素B12；促红细胞生成素

白血病(ICD-10:C91～C95)系造血系统的一种恶性疾病，是一种预后较差，病死率较高的恶性肿瘤[1]。流行病学统计发现，白血病约占癌症总发病率的5%，在我国白血病发病率约为2.76/10万，以急性白血病多见[2]，死亡率为4.1/10万，其中男性发病率约为女性1.3倍，且儿童期好发，在14岁以下儿童组恶性肿瘤发病的1/3[3]。临床治疗以化疗、分子靶向治疗等抗白血病治疗为主，但化疗会给患者带来胃肠功能受损以及凝血功能抑制等副作用，降低了患者生存质量。当归多糖是提取自伞形科植物当归根的有效成分[4]，其制剂为当归片，研究发现其对机体免疫系统、造血系统具明显作用以及对抗肿瘤、抗放射性损伤的具有良好疗效[5]，临床已有将当归片应用于肝癌、乳腺癌等恶性肿瘤治疗的报道，但当归片应用于治疗白血病的文献并不多见。叶酸和VB12是造血的重要原料，而红细胞生成素(erythropoietin，EPO)浓度水平能够直接反映造血功能[6]。因此，本研究通过探讨当归片对白血病患者血清叶酸、VB12、EPO水平以脾脏特异性免疫的影响，为白血病患者的治疗提供新的思路和方法。

1 资料与方法

1.1 一般资料 病例选择2012年10月～2014年1月于青海大学附属医院以白血病为诊断而收入院的患者42例，采用随机数字表法随机分为实验组和对照组。实验组21例，男性13例，女性8例，年龄15～50岁，平均(32.2±6.8)岁；病程1～3月，平均(1.67±0.45)个月；其中急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia，ALL)7例，急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia，AML) 4例，慢性淋巴细胞性白血病(chronic lymphocytic leukemia，CLL)6例，慢性髓细胞性白血病(chronic myelocytic leukemia，CML)4例。对照组21例，男性12例，女性9例，年龄14～48岁，平均(31.7±6.5)岁；病程1～3月，平均(1.62±0.43)个月；其中ALL6例，AML4例，CLL7例，CML4例。2组研究对象年龄、性别、病程和病理分型等一般情况比较差异无统计学意义，基线可比。本研究获得本院伦理委员会批准。

纳入及排除标准：根据中国慢性髓性白血病诊断与治疗指南(2013年版)[7]中的诊断标准而拟定以下纳入标准：①符合白血病的诊断标准；②患者首次入院并诊断为白血病；③无其他导致凝血功能障碍疾病者；④患者年龄均在10～55岁，病程在1～3个月；⑤X线、超声等检查无心、肝、肾等器质性病变者；⑥患者对当归片无过敏者；⑦患者或其家属同意并自愿参与本实验。排除标准：①不愿参与本研究或不符合纳入标准者；②既往患有精神神经障碍疾病者；③患有乙肝、艾滋病等具有传染性较强疾病者；④合并有严重肝、肾功能不全疾病患者；⑤患有心肌梗死、心力衰竭、肺心病、呼吸衰竭等重大原发疾病者；⑥年龄低于10岁或超过55岁者；⑦患有精神类疾病不能配合研究者。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法：所有ALL和CLL患者均采取常规(长春新碱+泼尼松)方案化疗：注射用硫酸长春新碱(上海医药集团有限公司华联制药厂，国药准字H33020421)隔7天静注1次，每次2 mg，醋酸泼尼松片(天津力生制药股份有限公司，国药准字H12020123)1 mg/kg，每天1次口服。所有AML和CML患者均采取常规(柔红霉素+阿糖胞苷)方案化疗：注射用盐酸柔红霉素(深圳万乐药业有限公司，国药准字H44024361)45 mg/m2隔3天静推1次，注射用盐酸阿糖胞苷(浙江海正药业股份有限公司，国药准字H20054695)150 mg/m2隔7天静脉滴注1次。所有患者均接受抗感染、成分输血等对症治疗。实验组患者在与对照组相同的常规治疗基础上加用当归片(武汉太福制药有限公司，国药准字Z42021841)，4片/次，每天3次口服，以4周为1个疗程，共治疗2个疗程。治疗结束后随访观察1年，记录2组患者生存率以及死亡率。

1.2.2 观察指标：血清指标采集：所有研究对象均于治疗前、治疗8周后，采集空腹肘静脉血4 mL，置于真空采血管中，于室温下用水平离心机以3000 r/min转速离心20 min，分离血清，行放射免疫法测定血清中叶酸、VB12及EPO浓度水平(试剂及DXI-800全自动化学发光免疫分析仪由Beckman公司提供)。

脾脏特异性免疫功能检测方法：2组患者在治疗前后抽取空腹肘静脉血10 mL，2000 r/min离心5 min后，取上清，严格按照试剂盒说明书采用Selectra E全自动生化分析仪(上海玉研科学仪器有限公司)检测淋巴细胞(A值)、人白细胞(位点)DR抗原[human leukocyte antigen(locus)，HLA-DR]及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(cysteine-containing aspartate-specific proteases，caspase-3)细胞阳性指数，试剂盒由武汉博士德生物技术有限公司提供。

2 结果

2.1 2组患者血清叶酸水平比较 与治疗前相比，2组患者叶酸水平升高(P<0.05)，与对照组相比，实验组治疗后叶酸水平较高(P<0.05)。见表1。

表1 2组患者血清叶酸水平比较±s)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.2 2组患者血清VB12水平比较 与治疗前相比，2组患者VB12水平降低(P<0.05)，与对照组相比，实验组治疗后VB12水平较低(P<0.05)。见表2。

表2 2组患者血清VB12水平比较

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.3 2组患者血清EPO水平比较 结果显示，与治疗前相比，2组患者EPO水平降低(P<0.05)，与对照组相比，实验组治疗后EPO水平较低(P<0.05)。见表3。

表3 2组患者血清EPO水平比较

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.4 实验组血清叶酸、VB12及EPO之间的相关性 实验组VB12和EPO、叶酸和VB12以及叶酸和EPO之间呈正相关(r=0.889，r=0.847，0.844；均P=0.000)。

2.5 2组患者治疗前后脾脏特异性免疫功能情况比较 治疗后实验组患者淋巴细胞增殖高于治疗前，2组HLA-DR比例均高于治疗前(P<0.05)、caspase-3细胞阳性指数均低于治疗后(P<0.05)，与对照组相比，实验组淋巴细胞增殖、HLA-DR比例较高，caspase-3细胞阳性指数较低(P<0.05)。见表4。

表4 2组患者脾脏特异性免疫功能变化比较±s)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

3 讨论

白血病的发病多与病毒感染和免疫功能异常等生物因素、X线电离辐射等物理因素、多年接触苯等化学因素、遗传因素等相关[8]，且随着当今环境污染加重，尤其是室内外环境污染的加重，白血病的发病率亦呈逐年上升趋势。当归多糖是提取自伞形科植物当归根的有效成分，其制剂为当归片。祖国医学认为，当归具有补血、活血、调经止痛等功效，用于治疗月经不调、闭经、腹痛、崩漏、血虚头痛、眩晕等症，是临床较为常用的中药之一[9]。国内者研究发现当归多糖具有激活补体活性，可去除自由基、调节免疫力，在抗肿瘤方面也显示显著疗效[10]，，临床上可应用于治疗心血管疾病、贫血、肾病综合症、痛经、更年期综合征等疾病。

本研究结果显示，治疗前2组患者血清中叶酸、VB12、EPO水平差异无统计学意义。治疗后，2组患者血清VB12、EPO水平均较治疗前降低，叶酸水平较治疗前升高(P<0.05)，提示2种治疗方法均可降低患者血清VB12、EPO水平，升高叶酸水平。实验组患者血清VB12、EPO水平较对照组降低明显(P<0.05)，提示当归片能够明显降低患者血清VB12、EPO水平。VB12和叶酸是人体主要的造血原料。叶酸是DNA合成过程中的重要辅酶，研究指出，当机体缺乏叶酸和维生素B12时，可以引起DNA合成障碍，出现了核发育迟缓、染色质结构异常，使细胞大而幼稚畸形，出现巨幼红细胞性贫血[11]。在本研究中，治疗前2组患者血清叶酸水平均较低，而治疗结束后则有所升高，其原因可能是在白血病发病期间，由于白血病细胞的过度增殖，导致大量DNA合成，大量叶酸被利用从而导致患者血清叶酸水平降低，而经过治疗后，白血病细胞被大量清除，机体叶酸水平能够逐步恢复至接近正常水平。研究发现，叶酸、铁蛋白可作为白血病的一种病情监测指标，动态监测AL病程中血清叶酸、铁蛋白水平变化，有助于间接了解白血病的生物学行为特性及病情进展情况，初步预测化疗的效果，进行病情评估及预后判断，早期发现复发，指导化疗方案及时调整；具有较好的实用价值[12]。维生素B12是人体组织代谢过程中必需的维生素，是人和其它哺乳动物维持生长和促进红细胞生长的重要因子，具有广泛的生理作用，参与体内甲基转换及叶酸代谢，促进神经髓鞘中脂蛋白的形成，保持中枢神经和外周髓鞘神经纤维的功能完整[13]。VB12不仅具有促进红细胞发育和成熟的作用，还具有提高叶酸利用率、维护神经髓鞘代谢与功能的作用。在本研究中，2组患者治疗前血清VB12水平均较高，其原因可能与白血病患者单核巨噬细胞活力增强释放或细胞破坏过多而产生。EPO是一种红细胞生长刺激因子，主要由肾脏产生，能够直接反映机体造血功能。低氧和贫血是导致血清EPO增高的主要原因，本研究中2组患者治疗前血清EPO明显高于正常值，其原因可能是疾病活动阶段，白血病患者骨髓内白血病细胞急剧增殖，正常红系造血功能受到抑制，导致患者贫血和缺氧，从而引起血清EPO升高，而当实验组患者应用当归片治疗后，白细胞增殖受到抑制，从而缺氧得到相应缓解，血清EPO水平随之降低。结果中得到白血病患者血清VB12和EPO之间呈正相关，国内已有学者报道，白血病患者血清VB12和EPO之间具有一定相关性[14-15]，与本研究结果达到一致性。

本研究结果显示，当归片具有调节脾脏特异性免疫功能的作用。研究指出[16]，白血病患者体内脾脏淋巴细胞大量凋亡，本研究结果发现，当归片能有效减少淋巴细胞的凋亡，增加淋巴细胞的增殖，提高免疫水平。结果中显示当归片治疗后淋巴细胞增殖明显优于对照组(P<0.05)。HLA-DR是抑制免疫细胞间相互作用从而控制免疫应答强度的作用，因此在一定程度上通过调节HLA-DR的表达水平能够达到调节免疫平衡的目的。有动物实验研究指出[17]，当归片能促进60Co 受照射小鼠 ConA诱导的胸腺T淋巴细胞增殖的恢复，而且还能升高小鼠外周血白细胞和血小板计数，并得出当归片能显著促进放射损伤小鼠的红细胞免疫粘附功能和造血功能，这一结论也可能是白血病患者脾脏特异性免疫功能升高的原因之一。

本研究通过对42例白血病患者的血清中叶酸、VB12、EPO水平、脾脏特异性免疫功能的变化，证实当归片对白血病患者的治疗具有一定的意义。在未来的研究中，本课题组将对当归片对白血病患者治疗的药理作用进行深入研究，为本实验所得出的结果做出进一步的论证和分析。

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(编校：王俨俨)

Effect of angelica tablets on serum folate, VB12 and erythropoietin in patients with leukaemia

LUO WeiΔ, JI Lin-hua, CUI Sen, MA Xiao-jing, FENG Ting-ting, YIN Yu-juan

(Department of Hematology, Affiliated Hospital of Qinghai University, Xining 810001,China)

ObjectiveTo investigate the effect of angelica tablets on serum folate, VB12, erythropoietin (EPO) levels and the specific immune function of spleen in patients with leukaemia.Methods42 patients with leukemia in the Affiliated Hospital of Qinghai University were randomly divided into experimental group and control group with random digital table. 21 cases in control group

routine treatment method, 21 cases in experimental group received angelica tablets of 4 tablets per times, three times per day, orally. All patients were treated for two courses with one course of two weeks. The serum folate, VB12, EPO levels and the specific immune function of spleen were compared between two groups pre-and post-treatment.ResultsCompared with control group, the serum VB12 and EPO levels post-treatment were lower and folate level was higher (P<0.05). There were positive correlation between serum levels of VB12 and EPO, between folate and VB12, between folate and EPO (r=0.889，r=0.847，0.844；allP=0.000). Compare with control group, the lymphocyte proliferation and HL A-DR ratio were higher and the positive cells index of caspase-3 was lower in experimental group (P<0.05).ConclusionAngelica tablets could regulate serum levels of VB12, EPO and folic acid levels and improve the specific immune function of spleen effectively in patients with leukemia.

leukemia; angelica tablets; folate; VB12; erythropoietin

罗伟，通信作者，男，硕士，副主任医师，研究方向：内科学血液病、慢性高原病，E-mail：2042152632@qq.com。

R552

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1005-1678(2016)01-0056-04