核基质结合区结合蛋白质1在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系

胥 颖，董丹丹，李 科，李芳华

(四川省医学科学院·四川省人民医院病理科，四川 成都 610072)

核基质结合区结合蛋白质1在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系

胥 颖，董丹丹，李 科，李芳华

(四川省医学科学院·四川省人民医院病理科，四川 成都 610072)

目的 检测胃癌组织中核基质结合区结合蛋白质1(special AT-rich sequence-binding protein 1，SATB-1)与临床病理特征的相关性。方法 应用免疫组织化学Envision法检测97例胃癌患者和20例癌旁组织中SATB1蛋白的表达，应用Spearman法分析其与临床病例特征的相关性。结果 胃癌组织中SATB1蛋白表达阳性率为60%，高于癌旁组织10%，差异有统计学意义(P< 0.05)。SATB1蛋白在胃癌中的阳性表达率与淋巴结转移，肿瘤浸润深度和临床TNM分期密切相关(P< 0.05)，与年龄、性别、肿块大小无显著相关性(P> 0.05)。结论 SATB1在胃癌组织中的高表达预示胃癌恶性程度高，临床分期晚，可能存在淋巴结转移，预后不良，因此检测SATB1表达可作为临床筛选胃癌高危转移者、制定治疗方案和判断预后的一个新指标。

胃癌；核基质结合区结合蛋白质1；免疫组织化学

胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，发病率和病死率均很高，在我国其病死率居各类癌症病死率的第一位，在世界范围内，胃癌的病死率居各类恶性肿瘤的第二位。多数胃癌确诊时已属于晚期，发生侵袭和转移是造成死亡的主要原因[1]。探讨胃癌的发展和转移机制，寻找可能的预测指标，对监测胃癌病程进展，转移潜能及预后估计具有重要的价值。本研究采用免疫组织化学检测胃癌及毗邻癌旁胃粘膜组织中核基质结合区结合蛋白1(special AT-rich sequence-binding protein 1，SATB1)，并分析其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集四川省人民医院病理科2015年1月至6月间手术切除并病理诊断明确为胃腺癌的97例患者，其中男78例，女19例，年龄31～81岁，中位年龄63岁；中高分化44例，低分化53例；肿瘤未侵及浆膜者20例，侵及浆膜或浆膜外者77例；淋巴结转移72例，无淋巴结转移25例。根据美国肿瘤-淋巴结-转移(tumor node metastasis，TNM)分期标准，Ⅰ期+Ⅱ期22例，Ⅲ期+Ⅳ期75例。术前均未行放射治疗或化学治疗。另选取距离肿瘤5 cm以上正常胃黏膜组织20例作为对照。

1.2 试剂 SATB1(产品编号：BIO66710兔抗人多克隆抗体)购自英国beacomBio公司，Envision法免疫组织化学试剂盒及DAB显色试剂盒均购自DAKO公司。

1.3 免疫组织化学染色 取经10%甲醛固定，石蜡包埋的存档蜡块，4 μm连续切片，56 ℃烤片2 h后经二甲苯连续脱蜡3次，每次10 min，100%，90%，85%乙醇脱二甲苯各5 min，水洗后进行Envision免疫组织化学染色。具体步骤如下：①水洗，pH6.0柠檬酸盐修复液高压修复3 min；②水洗，3%H2O2阻断内源性过氧化物酶10 min；③水洗，Harris苏木素复染10 s；④PBS缓冲液洗片，滴加SATB1(工作浓度1∶3000)一抗置于4 ℃冰箱孵育过夜；⑤次日用PBS缓冲液洗片，滴加DAKO公司Envision(K5007)二抗，37 ℃孵育30 min；⑥PBS缓冲液洗片，DAB显色，光镜下控制显色时间，入水终止反应；⑦常规脱水，封片。染色步骤严格按照要求进行，用PBS代替一抗作为阴性对照，用已知阳性切片作为阳性对照。

1.4 判定标准 SATB1主要定位于细胞核，出现棕黄色颗粒为阳性表达，SATB1判读采用二级计分法。按阳性细胞的比例计分：阳性细胞0～5%为0分，5%～10%为1分，10%～50%为2分，>50%为3分。按染色强度计分：无色为0分，淡黄色为弱染色计1分，黄色或深黄色为中度染色计2分，黄褐色或棕褐色为强染色计3分。将上述两项得分结果相乘：<3分为阴性(-)，≥3分为阳性(+)。均在不了解临床资料的情况下阅片。

1.5 统计学方法 采用SPSS 22.0统计软件包进行数据分析。计数资料比较采用卡方检验，相关性用Spearman相关分析，P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 SATB1在胃癌及癌旁组织中的表达 免疫组化检测显示，SATB1阳性表达均位于细胞核，呈棕黄色颗粒。SATB1在胃癌组织的阳性表达率为60%(59/97)，癌旁正常组织中呈极弱阳性或阴性，阳性表达率仅为10%(2/20)，差异有统计学意义(P< 0.05)，见图1、图2。

图1 SATB1在胃腺癌中的表达(Envision法) a：阳性(×100)； b：阳性(×40)；c：阴性(×100)

图2 SATB1在癌旁正常胃黏膜组织中阴性表达，Envision法(×100)

2.2 胃癌SATB1的表达与临床病理参数特征的关系 SATB1表达与患者的年龄、性别、肿瘤直径、分化程度等无相关性(P> 0.05)。浸及浆膜或浆膜外组和未及浆膜组的阳性表达率分别为66.2%和40%，差异有统计学意义(χ2=4.585，P=0.032)；有淋巴结转移组和未发生淋巴结转移的阳性表达率分别为68%和40%，差异有统计学意义(χ2=6.130，P=0.013)；TNM分期Ⅲ+Ⅳ期和Ⅰ+Ⅱ期的阳性表达率分别为66.7%和40%(χ2=4.736，，P=0.030)。SATB1在胃癌中的阳性表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、病理TNM分期密切相关(P< 0.05)，见表1。

表1 97例胃癌SATB1表达与临床病理特征的关系

3 讨论

SATB1 是一种组织特异性表达的核基质结合区结合蛋白，在胸腺细胞中显著表达。SATB1位于3号染色体3p23区，全长763个氨基酸，包含2个CUT序列，可以通过形成类似盘状同源区域的二聚体，以非常高的亲和力与核基质区相结合，进而调节DNA结合能力和胞核内亚结构的定位，并招募染色质重建因子，通过影响染色质高级结构从而实现对目标基因表达的时空特异性调控，从而进一步调节细胞分化，凋亡，肿瘤生长与转移。

Han等在2008年首次报道了SATB1与肿瘤的关系，他们检测到24种乳腺上皮细胞，仅在侵袭性的乳腺细胞中检测到了SATB1 mRNA和蛋白的表达。研究发现，SATB1能对涉及肿瘤发生的1000多种基因的表达进行调控，包括控制黏附性，细胞周期，细胞外基质，信号通路，细胞间连接和凋亡的基因等，因而被称为“基因组织者”。SATB1能上调肿瘤生长基因的表达，同时下调抑癌基因[2]。在接下来的几年中，已经有报道SATB1在各种实体肿瘤中过表达与预后及临床病理参数之间的关系，比如结肠癌的研究中，发现SATB1的高表达与结直肠癌的TNM分期，肿瘤浸润深度，淋巴结转移和预后不良等因素密切相关。这些发现都提示SATB1在结肠癌的发生发展起重要作用[3～5]，此外还有报道称在肝癌[6]，子宫内膜癌[7]，卵巢癌[8]，前列腺癌等的异常高表达与这些肿瘤浸润转移密切相关。

本实验研究采用免疫组化检测了97例胃癌组织中SATB1的表达，结果发现59例胃癌SATB1阳性(60%)，而在20例癌旁正常胃黏膜组织中SATB1阳性率仅为10%。胃癌组织中SATB1的高表达与肿瘤病理分期以及浸润深度，淋巴结转移呈密切相关，提示SATB1在胃癌晚期发生浸润及转移的过程中起到了重要作用，胃癌SATB1的表达与肿瘤的发生，发展进程，预后密切相关，提示SATB1可能会成为预测早期胃癌的恶性程度和潜在转移倾向的新指标，用于患者肿瘤的治疗方案和预后评估提供依据，具有十分重要的临床意义。

[1] 刘科. 核基质结合蛋白SATB1对胃癌生物学行为的影响及其机制研究[D].华中科技大学，2010.

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[5] 高超，朱艳卿，刘颖，等. SATB1基因在结直肠癌中的表达及其临床意义[J]. 肿瘤防治研究，2013，40(2)：159-163.

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[8] 赵晓兰，王平. SATB1、BRMS1在书卵巢浆液性腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系[J]. 四川大学学报(医学版)，2011，42(1)1：82-85，105.

SATB1 expression in gastric cancer and relationship between the expression and clinicopathologic characteristics

XU Ying，DONG Dan-dan，LI Ke，LI Fang-hua

(Department of Pathology，Sichuan Academy of Medical Science & Sichuan Provincial People’s Hospital，Chengdu 610072，China)

Objective To investigate the expression of nuclear matrix combining area binding protein 1(SATB -1)in gastric cancer tissues and the relationship between the expression and clinicopathologic characteristics.Methods The expression of SATB-1 in 97 samples of gastric cancer tissue and 20 samples of tissue adjacent to carcinoma were measured by using Envision method of immunohistochemistry.Spearman analysis was used to explore the relationship between the expression and clinicopathologic characteristics.Results The positive rate of SATB1 protein expression in the cancer tissue was 60% that was higher than that of tissue adjacent to carcinoma (10%)(P< 0.05).The positive rate of SATB1 expression in gastric cancer was significantly associated with lymph node metastasis，tumor infiltration depth and clinical TNM stage (P< 0.05)，but not associated with age，gender and tumor size (P> 0.05).Conclusion The high expression of SATB1 in gastric cancer tissue indicates the high gastric malignant degree and late clinical stage with a potential lymph node metastasis and poor prognosis.Therefore，detection of SATB1 expression can be used as a novel marker for screening the risk of gastric cancer metastasis，making the treatment plan and predicting the prognosis.

Gastric cancer； SATB1；Immunohistochemistry

R361

A

1672-6170(2016)02-0060-03

2015-11-06；

2016-01-06)