STAGO STA-R全自动血凝仪性能验证

马 威

STAGO STA-R全自动血凝仪性能验证

马 威

目的 验证STAGO STA-R全自动血凝仪（简称STA-R血凝仪）的系统性能，确定该检测系统是否稳定、准确、可靠。方法 参照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）相关文件，选择凝血酶原时间（PT），活化部分凝血酶时间(APTT)，纤维蛋白原(FIB)，凝血酶时间(TT)对STAGO STA-R检测系统的不精密度、正确度、携带污染率、线性范围、参考区间等性能指标进行验证。结果 批内和批间不精密度（CV）小于4%；各检测项目正确度相对偏倚（SE%）小于1%；携带污染率小于5.9%；纤维蛋白原（Fib）检测线性良好，相关系数为0.9976；可报告范围（0.6～10.7）g/L；以上该检测系统结果均至少有95%数据分布在现行生物参考区间内。结论 STAGO STA-R凝血仪性能优良，可以为临床疾病的诊断、治疗和预后观察提供准确可靠的检验结果。

STAGO STA-R全自动血凝仪；性能；验证

为满足临床日益发展的需求，沈阳市儿童医院检验科最近购置第二台STAGO STA-R全自动血凝仪（鉴与以前同型号血凝仪相区别，以下简称2 STA-R），该仪器是专门用于临床血液凝固状态分析及抗凝剂监测的设备，对血浆标本采用凝固法、发色底物法及发光免疫法进行测定。根据美国临床实验室改进修正法案（CLIA′88）对临床实验室质量管理和实验室认可的要求，实验室必须对所使用的检测系统进行性能验证[1]。参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）的要求并结合本室具体情况，对该分析系统进行了不精密度、正确度、携带污染率、线性范围、参考区间等性能指标进行了验证。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 法国Stago公司生产的STA-R全自动血凝仪及配套试剂：特殊清洗液，批号111549；清洗液，批号201034；PT试剂，批号110261；氯化钙试剂，批号111526；APTT试剂，批号110733；FIB试剂，批号111085；FIB稀释液，批号110791；TT试剂，批号109728。

PT，APTT，FIB质控品为BIO-RAD公司生产的凝血正常、异常两个水平质控品：批号分别为78271、78273。

1.2 标本 标本采自本院就诊的患者及健康体检者，用3.2%枸橼酸钠（109 mmol/L）真空抗凝管，按1︰9的比例采集全血1.8 mL，3000 r/min离心10 min分离血浆标本。

1.3 方法

1.3.1 质量控制 为保证实验质量，测试前对仪器进行净化：通针，清洗冲洗槽，清洗标本抽屉，试剂抽屉及测试平台等相关维护保养。用相应校准品对FIB进行校准；用BIO-RAD公司血凝质控品对PT、APTT、TT和FIB进行室内质控。

1.3.2 不精密度验证 按照EP 15-A 2[2]文件要求，使用BIO-RAD凝血正常、异常两个水平质控血浆，连续测定20次，计算批内不精密度的均值（）、标准差（s）、变异系数（cv);取正常、异常两个水平质控血浆，每天分别测定两次，间隔时间大于2 h，连续检测10 d，共收集20个数据，计算批间不精密度的均值（）、标准差（s）、变异系数（CV)。结果应符合下列要求。见表1。

表1 厂家声明的批内和批间不精密度

1.3.3 正确度验证 由于血液实验室第一台STA-R(以下简称1 STA-R)通过了卫生部的室间质评活动--相对偏倚（SE%）在卫生部室间质评规定范围（15%）的1/2内为可接受，其检测结果的准确性可以进行传递，因此以1 STA-R为基准仪器，将血液室的2 STA-R为比对仪器与之进行比对。比对20个标本，同一样本在两检测系统之间的检测时间之差不超过4小时。本实验室规定允许差值为小于≤1/2 CLIA′88最大允许总误差。规定的允许误差：PT 7.5%、APTT 7.5%、FIB 10%。

1.3.4 线性范围验证 验证项目：由于PT、APTT、TT的检测结果为仪器直接读取的凝固时间，因此不适合做线性分析；FIB的检测根据检测时间换算出浓度，因此只验证FIB的线性。实验方法：选取一份接近预期上限的高值全血样本（H），一份接近预期下限的低值全血样本（L），将H和L样品按：5 L、4 L+1 H、3 L+2 H、2 L+3 H、1 L+4 H、5 H关系各自配制混合，形成系列评价样品。每个样品重复测定2次，计算均值。将实测值与理论值作比较（偏离应小于10%），计算y=ax+b，验证线性范围。要求：a值在（1±0.05）范围内，相关系数r≥0.975。

表3 批间不精密度实验结果（n=20）

1.3.5 携带污染率验证 取高浓度血液样本，混合均匀后连续测定3次，测定值分别为H 1、H 2、H 3；再取低浓度血液样本，连续测定3次，测定值分别为L 1、L 2、L 3。按公式计算携带污染率（%）=（L 1-L 3）/(H 3-H 1)×100%，其中L 1和L 3分别为低值样本在第一次和第三次测定结果。

1.3.6 生物参考区间验证 选择年龄、性别等均匀分布，符合建立生物参考区间的健康体检者血浆标本20份分别检测各项目，计算结果落在正常生物参考区间的例数。计算x、s、比率［R（%）]及95%分位数；R(%)＝参考个体落在引用区间的个数／参考个体总数×100%，R(%)≥90%判为验证结果适用[3-4]。

1.4 统计学方法 本文将所分析的相关数据录入SPSS 17.0统计学分析软件进行数据分析与处理，计量资料采用“s”表示，组间比较采用t检验；计数资料用例数（n）表示，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不精密度实验 PT、APTT、FIB批内及批间不精密度结果见表2、表3。在正常及异常两水平，批内及批间CV值均低于厂家规定的标准，可继续进行测定。

2.2 正确度实验 各项目检测结果(x2)与1 STA-R(x1)相比，SE%均小于3%，符合要求。见表4。

表2 批内不精密度实验结果（n=20）

表4 正确度实验结果（n=20）

2.3 线性范围实验 FIB呈良好线性相关性。见表5、图1。

表5 FIB线性检测结果

图1 实测值与理论值比较图

2.4 携带污染率实验 PT、APTT和FIB携带污染率分别为5.88%、0.48%、0.10%，均小于厂家规定的≤10%的标准。见表6。

表6 携带污染率实验结果

2.5 生物参考区间实验 各项目验证结果R（%)值均大于90%，统计的参考区间均在引用的参考区间范围内。见表7。

表7 参考区间实验结果（n=20）

3 讨论

随着本院规模不断扩大，一台全自动血凝仪远远不能满足门急诊要求，因此本科室新购置了法国Stago公司生产的STA-R型全自动血凝仪。此型号仪器检测速度达每小时400个，具有自动稀释、自动再检、自动连锁筛选和全自动浓度稀释分析功能，可同时提供止凝血试验的直接结果与计算参数结果。在投入临床应用前应进行性能验证，以确保结果的及时可信性。由于磁珠凝固法不使用光源系统，就方法学而言不受标本中干扰物质（如黄疸、乳糜、溶血）及试剂本身浓度的干扰，抗干扰能力较强，因此本报告未进行抗干扰验证［5］。

本研究中，精密度高、重复性好，在精密度验证试验血凝三项的CV批内和CV批间均在厂家标称范围内，显示精密度良好，符合要求；正确度实验，以通过卫生部室间质评的1 STAGO STA-R检测结果为基准仪器，本检测系统与基准仪器相对偏倚在1/2 CLIA′88要求的允许范围内的标本≥80%，验证通过；携带污染率小：各项携带污染率均小于10%，符合仪器的性能要求；FIB的线性实验结果表明，a值在（1±0.05）范围内，r＞0.975，各检测系统具有良好的线性；该检测系统结果均至少有95%数据分布在现行生物参考区间内，验证合格。

综上所述，2 STAGO STA-R全自动凝血仪性能优良，可以保证该检验系统为临床疾病的诊断、治疗和预后观察提供准确可靠的检验结果。

[1] 丛玉隆，邓新立．实验室ISO 15189 认可对学科建设的几点启［J］．中华检验医学杂志，2007，30(2):128-131．

[2] Clinical and Laboratory Standards Institute.EP 15-A 2 User verification of performance for precision and trueness;approved guideline-second edition[S].Wayne，PA,UAS:CLSI,2005.

[3] NCCLS.C 28-A 2 How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory:approved guideline[S].Wayne,PA,USA:NCCLS,2000.

[4] 毕波，吕元．定量检测系统的方法学性能验证实验结果的评价［J］．中华检验医学杂志，2007，30(12):1332-1335．

[5] 郝建华，吕斌斌，高旭红，等．Stago Compact型血液凝固分析仪的抗干扰功能[J]．国外医学：临床生物化学与检验学分册，2002，23(3):185-186.

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.5.099

辽宁 110000 沈阳市儿童医院检验科 （马威）