鸡传染性鼻炎鉴别诊断技术研究进展

张婷婷/哈药集团生物疫苗有限公司



鸡传染性鼻炎鉴别诊断技术研究进展

张婷婷/哈药集团生物疫苗有限公司

副鸡禽杆菌为禽杆菌属，革兰氏阴性（G-）小球杆菌，具有多形性，需养或厌氧条件下均能生长。根据学者Page的分型方案，分为A型（标准菌株为0083菌株）、B型（标准菌株为0222）、C型（标准菌株为Modesto菌株）三个血清型。本文旨在通过讨论Hpg的临床症状及其鉴别诊断方法，为现场及实验室Hpg鉴定提供理论依据。

一、流行病学

Hpg可引起鸡传染性鼻炎（Infectious Coryza， IC），临床症状明显，以流鼻汁、眼结膜炎和面部肿胀为主要特征，本病呈世界性流行。鸡是Hpg的主要宿主，各年鸡只龄均易感，4周龄以上易感性增强；病程一般为4～18 d，发病率在20%～50%，死亡率约为5%～20%。

产蛋鸡群在发病后约5～6 d，产蛋高峰期的鸡群产蛋量平均下降25%左右，发病初期鸡只很少死亡，但后期状态转好时鸡群死淘率增加。

Hpg的三种血清型（A型、B型和C型），在我国均有分离报道，以A型居多，A型发病率约为10.3%～25%；B型和C型发病率较低。

传播方式是呼吸道和消化道传播，其中呼吸道传播引起的危害较为严重，特别是对当前规模化或集约化养殖模式，同时该病的暴发具有明显的气候性，多在高温高湿的季节。

二、临床症状

病鸡脸肿胀或显示水肿，眼结膜炎、眼睑肿胀、出现眼睛流泪，流鼻液，先为浆液性，后为脓性，其中混有泡沫，呼吸困难、出现呼噜声和奇怪的咳嗽声，同时出现拉白、黄、绿色的稀粪。仔鸡生长不良；成年母鸡产蛋减少，产蛋率及采食量下降，软壳蛋增加；公鸡肉髯常见肿大。

三、细菌的分离和初步鉴定

对疑似发病鸡进行无菌操作，取框下窦内渗出物（鼻窦深部、气管或气囊粘液均可），常规鉴定方法有以下四种。

（一）微卫星现象

划线接种血琼脂平板，葡萄球菌交叉划线，置5% CO237℃培养24 h，观察培养后的平板是否存在卫星现象，进而判断是否为目标菌。

（二）V因子

研究表明Hpg的生长需要V因子，因此可将疑似菌同时接种含有一定浓度NAD的鸡血清鸡肉汤平板和普通培养基，若为目标菌，则仅在含有NAD的平板上生长，在普通培养基上不生长。

（三）理化性质

对分离菌的纯培养物进行生化鉴定，如果生化鉴定结果与Hpg的生化特性（能发酵麦芽糖、蔗糖、葡萄糖产酸，但不发酵乳糖；吲哚试验阳性，过氧化氢酶试验阴性）相吻合，便可作出诊断。

（四）动物回归试验

将纯培养物眶下窦内接种6周龄左右健康鸡，若在7 d内出现典型鼻炎症状，即可初步鉴定为Hpg。

四、实验室诊断方法

（一）血清学方法

血清学诊断方法主要包括：琼脂扩散试验（AGP）、血清平板凝集试验（SPA）、血凝抑制试验（HI）、荧光抗体技术、ELISA和Dot-ELISA等方法。其中常用的方法为AGP和SPA，既可用菌株作抗原去检测血清型抗体，也可以用血清对分离菌株进行分型；HI用于检测疫苗免疫后抗体水平，根据抗体水平评价疫苗免疫效果，目前主要使用的特异性抗原只有A型和C型；ELISA方法，其敏感性和特异性都优于以上几种方法。2009年，岂晓鑫建立检测A型副鸡禽杆菌的夹心ELISA方法，结果表明该方法具有较好的特异性和敏感性，操作简单快捷；2001年张培君等应用建立的检测副鸡禽杆菌阻断ELISA方法，检验2 191份血清，A型抗体阳性检出率为27.4%，C型抗体阳性检出率为11.5%。

（二）分子生物学方法

分子生物学诊断方法应用最为广泛的为PCR诊断。该方法对检测采集的临床病料要求相对要低一些。试验结果表明，PCR对可疑病料的检出率是细菌分离鉴定的2～3倍。应用PCR方法诊断鸡传染性鼻炎，被国际公认为金标准。但对于血清分型还需要PAGE法进行。2008年邓显文等根据副鸡禽杆菌的16S rDNA基因序列设计一对特异性引物建立了PCR方法，目的片段为282 bp，该方法可以检测到10 pg的副鸡禽杆菌DNA模板。2001年宋敏训等根据aroA基因设计了1对引物，建立了PCR方法，该PCR能检测出10个菌细胞，比常规PCR方法敏感性高。

五、临床诊断方法

（一）与传染性支气管炎鉴别诊断

传染性支气管炎病雏鸡发病重，呼吸症状明显，流鼻液，无头部肿胀。呈肾型传染性支气管炎，症状为肾肿大苍白，肾小管、输尿管有多量尿酸盐沉积，药物治疗无明显效果，病死率高，患病成年鸡呼吸症状不明显，产蛋量急剧下降，软壳蛋、沙皮蛋较多，蛋清稀薄如水，浓蛋白层消失。蛋白稀薄如水，畸形蛋量增加。

（二）与传染性喉气管炎鉴别诊断

传染性喉气管炎多见于成年鸡，症状为出血性炎症，呼吸困难，咯血（血性粘液），气管黏膜出血性坏死，久病鸡喉气管黏膜带一层干酪样假膜，无头部肿胀，磺胺类药物和抗生素治疗无效。

（三）与支原体病鉴别诊断

支原体发病慢，呼吸道症状明显且时间较长，一般数周或数月，肿脸的鸡在鸡群中传播较慢，并且精神和采食变化不大，气囊发炎、混浊、增厚，囊腔内附有豆腐渣样分泌物，而传染性鼻炎气囊无此病变。

（四）与维生素A缺乏症鉴别诊断

维生素A缺乏症病鸡趾爪卷缩，眼睛流出奶样分泌物，喙和小腿黄色变淡。剖检症状为可见鼻腔、口腔、食道以致嗉囊的黏膜表面有大量白色小结节，严重时结节融合成一层灰白色的伪膜覆盖于黏膜表面。

六、治疗

1.添加敏感药物。可按每100 kg饮水中添加复方支原净（主要成分是泰妙菌素、替米考星）10 g（首次倍量），连续饮用4～5 d；饲料中添加0.02%的电解多维，连续使用10 d。

2.开展卫生消毒。应及时清除鸡粪、垫料，每天用聚维酮碘、百毒杀按1∶300的比例对鸡舍地面、墙壁、道路和活动场所进行消毒一次，保持鸡舍内外通风、干燥、卫生。

3.加强饲养管理。改喂优质的鸡饲料，调整饲养密度最佳为9～12只，改善通风条件，做好防鼠工作，保持环境安静，严禁非工作人员出入。

七、免疫工作

鸡传染性鼻炎最佳首免时间为5～42日龄，二免间隔70 d可进行。如饲养周期在60周以上，可以考虑在产蛋高峰期后（50～55周龄）进行第三次免疫，如果处在强制换羽的鸡群时，应在强制换羽前2周完成第三次免疫。免疫剂量：首免0.5 ml/只，二免0.5～1.0 ml/只（白羽、快大型黄羽种鸡以及鼻炎发病严重场二免建议1.0 ml/只）。免疫过程中，操作人员应不断轻微摇晃疫苗瓶，以保证每只鸡获得混合均匀的抗原含量。

八、小结

目前认为，Hpg感染鸡群发病的因素与3种毒力抗原相关。第一种是能引起动物发展中毒症状的脂多糖。第二种是引起家禽心包积液的多糖。第三种是与IC主要症状鼻炎相关的荚膜。研究发现分离出的脂多糖与IC引起的蛋鸡产蛋率下降可能有关，这也是引起家禽中毒症状的表现；分离出的多糖物质据推测与IC引起的病理变化心包积液有关；有文献报道透明质（具有荚膜抗原）与IC感染引起的鼻腔、鼻窦炎症有关联。这就意味着它的病原学意义有相当高的研究价值。

参考文献（略）