腺性膀胱炎大鼠模型建立的实验研究

蔡蔚　谢海平　龙蠡　谢晓　杨华伟

[摘要] 目的 探究雌性大鼠腺性膀胱炎模型制备方法。 方法 选取雌性大鼠50只，其中42只建立腺型膀胱炎动物模型，随机分为大肠埃希菌灌注组（34只）、生理盐水灌注组（8只），另外8只不做任何处理，作为空白对照组。同等条件饲养下，50 d后处死各组大鼠，切取膀胱标本进行病理学检查。 结果 3组大鼠在体重变化及死亡率的比较上，差异无统计学意义（P>0.05）；大肠埃希菌组33例大鼠感染腺性膀胱炎，感染率97.0%，与空白组和生理盐水组相比差异有统计学意义（P<0.05）；大肠埃希菌组大鼠膀胱标本常规病理切片、透射电镜均证实为腺性膀胱炎。 结论 大鼠膀胱灌注大肠埃希菌可导致腺性膀胱炎，其病理表现与人类腺性膀胱炎具有相似性，可据此制作腺性膀胱炎动物模型。

[关键词] 腺性膀胱炎；动物模型；大鼠

[中图分类号] R277.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2016）02（b）-0027-03

[Abstract] Objective To explore the establishment method of female rat models of cystitis glandularis. Methods 50 female rats were selected， and 42 of them were selected for the establishment of rat models of cystitis glandularis. The rats were randomly divided into three groups， Escherichia coli perfusion group （34 rats）， the normal saline group （8 rats）， and the other 8 rats were treated as blank control group. Under the same conditions of feeding， the rats were sacrificed at 50 days， and the bladder specimens were taken for pathological examination. Results There was no statistically significant difference in the changes of body weight and mortality between the three groups （P>0.05）. The 33 rats in the Escherichia coli perfusion group were infected with cystitis glandularis， the infection rate was 97.0%， compared with the blank control group and the normal saline group， the difference was statistically significant （P<0.05）. The Escherichia coli group were confirmed with cystitis glandularis by the conventional pathological examination and transmission electron microscope of the bladder specimens. Conclusion Instillation of Escherichia coli in the bladder in rats can cause cystitis glandularis， and the pathological manifestations are similar to those of the cystitis glandularis in people， in accordance with this， the animal models of cystitis glandularis can be made.

[Key words] Cystitis glandularis； Animal model； Rat

腺性膀胱炎是一种在膀胱粘膜和粘膜下层发生粘液腺增生的疾病，已成为泌尿外科常见疾病之一[1-2]。因其临床表现不典型，易被误诊，甚至漏诊。在腺性膀胱炎的病因及生物学行为仍未完全明确的情况下，通过创建动物模型研究腺性膀胱炎的发病机制具有可行性。因此，该研究选择50雌性大鼠进行腺性膀胱炎大鼠的造模研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

成年雌性健康SD大鼠50只，由湖南中医药大学医学院实验动物学部提供许可证，分笼饲养，自由饮水；完全随机分为3组：空白对照组（8只）、生理盐水灌注组（8只）和大肠埃希菌灌注组（34只）。各组大鼠实验开始时体重差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

1.2 实验过程

大肠埃希菌灌注组大鼠：膀胱灌注DH5α大肠杆菌溶液（108-9CFU/100UL） 由湖南中医药大学第一附属医院检验科提供），间隔1 d灌注1次，共20次；生理盐水灌注组：膀胱灌注生理盐水，间隔1 d灌注1次，共20次；空白对照组：不予灌注，相同条件，自由饲养。50 d后处死各组大鼠，切取膀胱标本分别置于100倍、200倍、400倍显微镜下观察膀胱黏膜固有层是否有炎性细胞浸润、腺体样结构、囊腔和Brunn巢结构[3-4]。取膀胱标本于FEI Tecnai G2 Spirit透射电镜观察是否有炎性细胞浸润，黏膜层及肌层是否有异常表现。

1.3 统计方法

数据采用SPSS 17.0软件统计分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，并采用F检验，计数资料采用百分比较（%）表示，采用χ2检验，以 P <0.05 为差异有统计学意义。

2 实验结果

2.1 造模结束时大鼠体重与死亡率比较

实验结束时，各组大鼠体重差异无统计学意义（P>0.05）；各组大鼠死亡率亦差异无统计学意义（P>0.05），见表2、表3。

2.2 常规病理切片

①空白组老鼠膀胱黏膜上皮正常；②生理盐水组老鼠膀胱黏膜上皮层变薄，基底层空泡样变；③大肠埃希菌灌注组老鼠膀胱黏膜固有层有炎性细胞浸润、部分基底层有空泡样变。

2.3 透射电镜结果

大肠埃希菌灌注组可见黏膜层有炎性细胞浸润，部分黏膜缺失，黏膜出现分层，间质可见Bruun巢，移行上皮退行性变。空白组及生理盐水组均未见异常表现。

2.4 各组间大鼠存在腺性膀胱炎感染的比例

大肠埃希菌灌注组感染腺性膀胱炎的比例多于空白组、生理盐水组，差异有统计学意义（P<0.05）；空白组与生理盐水组之间无明显区别，差异无统计学意义（P>0.05）。见表4。

3 讨论

腺性膀胱炎患者多数有膀胱内感染，尤其是大肠埃希菌等革兰阴性菌感染与腺性膀胱炎关系更为密切，膀胱移行细胞长期受到炎症刺激后黏膜固有层增生并被结缔组织包绕、分割，形成Brunn巢[5]，巢中心的细胞可变形退化为囊腔，随着病情的发展，腔内的柱状上皮细胞形成腺体样结构[6-7]。

通过该实验建立腺性膀胱炎大鼠模型，结果显示大肠埃希菌组32例大鼠全部感染腺性膀胱炎，感染率100%，在病理检查及透射电镜下，大肠埃希菌灌注组活的大鼠膀胱黏膜均不同程度出现炎性细胞浸润、腺体样结构、囊腔和Brunn巢结构，生理盐水组及对照组均未观察到，组间差异比较有统计学意义（P<0.05），说明生理盐水不是腺性膀胱炎的感染因素，从而证明膀胱内灌注大肠埃希菌能够导致腺性膀胱炎，这与国内学者易憧等[8]的研究结果相一致。目前腺性膀胱炎的病因及生物学行为尚未完全明确，该研究为腺性膀胱炎的膀胱灌注治疗提供了实验参考。

该模型的成功构建为腺性膀胱炎的病因预防起到指导性作用，模型操作过程中进行膀胱灌注时，进入尿道路径短，只需1～1.5 cm，大鼠抗拒性不强，造模成功率97.0%。通过此次实验，为批量制作人类腺性膀胱炎病理特点类似的动物模型提供了一种简单、可行性极高的实验方法。

[参考文献]

[1] 赵玉迪.腺性膀胱炎的诊断与治疗[J].中国实用医药，2015，10（3）：167-168.

[2] 任小刚，江少波，邬贤德，等.腺性膀胱炎治疗进展[J].中国中西结合外科杂志，2014，2（1）：100-101.

[3] 易憬，熊飞，苏良平，等.SD大鼠腺性膀胱炎动物模型的建立[J].临床外科杂志，2008，16（8）：553-554.

[4] 杨勇.如何正确认识腺性膀胱炎[J].中华泌尿外科杂志，2013，34（3）：165-166.

[5] 刘哲，杨东红，王斌.腺性膀胱炎组织病理学特点的探讨[J].湖南中医药大学学报，2009，29（10）：62-65.

[6] 朱建强，王永传，卢洪凯，等.腺性膀胱炎的再认识[J].医学综述，2013，19（3）：493-496.

[7] 逄城，马洪顺，刘光明. 腺性膀胱炎的诊断与治疗[J].山东医药，2014， 54（12）： 77-79.

[8] 易憬， 熊飞， 苏良平，等. SD大鼠腺性膀胱炎动物模型的建立[J].临床外科杂志， 2008， 16（8）：553-554.

（收稿日期：2015-11-09）