张朝辉/四川省甘孜藏族自治州动物疫病预防控制中心
猪瘟免疫失败的案例分析及防控
张朝辉/四川省甘孜藏族自治州动物疫病预防控制中心
2015年3月15日,四川某规模化猪场(400头种猪)10~20日龄哺乳仔猪出现腹泻、体温41℃~41.5℃,急性死亡,高死亡率。哺乳仔猪断奶后转到保育舍,陆续出现扎堆、被毛粗乱、精神萎靡、眼结膜模糊、采食下降、渐进性消瘦、体温持续40.5℃~41℃,耳尖、臀部、腹部皮下出血,发病率达到92.5%以上,死亡率36%,使用很多药物治疗,效果均不显著。母猪、公猪采食、饮水正常,未出现临床症状。
该场已经养猪6年了,自繁自养,外售仔猪和肥猪。由于2013年养猪利润低,猪场亏损,为降低养殖成本,2014年猪场开始采购价格低廉的疫苗产品。技术人员更换频繁,免疫方案多个,免疫记录混乱。发病时,母猪免疫价格低廉的猪瘟细胞苗,母猪跟胎免疫,只在断奶时免疫1次,1头份/头(2 mL/头份)。仔猪首次免疫在断奶时,每次也是1头份/头(2 mL/头份),加强免疫在50~56日龄,每次1头份/头(2 mL/头份),肥猪不再免疫。当时猪场发病已经7天,开始是10日龄哺乳仔猪发病,1周后传染给保育仔猪,发病急,病程短,死亡率高,药物控制效果不佳。
哺乳仔猪腹泻,呈黄色,有气泡,略粘稠,有光泽,腹股沟淋巴结肿大,呈紫黑色,体温41℃~41.5℃,持续不退,精神萎靡,嗜睡,食欲下降或废绝,迅速消瘦,死亡率约50%。保育仔猪精神沉郁,喜扎堆,结膜炎,眼屎粘稠,被毛粗乱,体温41.0℃~41.5℃,食欲减退或废绝,耳尖、臀部和腹部皮腹有出血点或出血斑,背部毛根出血,腹股沟淋巴结肿大,紫黑色,包皮积尿,死淘率高达40%。
剖检8头病猪,剖检可见腹股沟淋巴结肿大、切面大理石样出血性坏死(见图1),心肌出血(见图2),脾脏肿大,边缘梗死(见图3),肺脏出血(见图4),肾脏先天性畸形(见图5),表面点状出血(见图6),有6头病猪喉头、膀胱黏膜有出血点(见图7、8),肠壁变薄,肠黏膜出血(见图9),胃黏出血(见图10),回盲瓣处未见纽扣样溃疡。
图2 心肌出血
图3 脾脏肿大,梗死
图4 肺脏出血
无菌采3头病猪的淋巴结、脾脏和心脏等组织冰冻保存,实验室送检。实验室检测分别取2克样品,剪碎,加入10 mL磷酸缓冲液(PBS),组织匀浆机匀浆后,反复冻融3次,采用北京天之泰的RT-PCR诊断试剂盒分别检测猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒和猪伪狂犬病毒。同时,采妊娠60日龄和断奶的母猪血清各10份,仔猪2周、4周、6周、8周、12周和16周的血清各8份,应用美国IDEXX公司的猪瘟抗体检测试剂盒检测猪群猪瘟抗体水平。
1.病原检测结果。试验结果(见图11)表明,送检的病料中,猪瘟病毒为阳性,扩增条带大小为133bp左右。猪蓝耳病病毒(扩增条带大小230 bp)和伪狂犬病毒(扩增条带大小324 bp)均为阴性。表明,该病是猪瘟感染。
图5 肾脏先天性畸形
图6 肾表面点状出血
图7 喉头黏膜出血
图8 膀胱黏膜出血
图9 肠黏膜出血
图10 胃黏膜出血
图11 病原检测结果
2.血清学检测结果。根据美国IDEXX公司猪瘟抗体检测试剂盒说明书,判定标准为:猪瘟病毒抗体阻断率≥40%为阳性;阻断率<30%为阴性,之间为可疑。猪抗体检测结果和离散度(见图12,图13)发现猪瘟抗体阳性率>40的仅为38%,保护率>50的仅为18%,离散度为50%,表明猪瘟抗体的保护率较低,免疫失败。
图12 血清抗体阳性率检测结果
综上所述,根据流行病学调查、临床症状、病理剖检及实验室诊断,该病确诊为猪瘟病毒感染。
根据实践经验,对发生猪瘟的猪场采取如下措施:
图13 猪瘟抗体离散度和平均值
1.隔离淘汰。首先将人员分工。病猪舍专人饲养,饲养人员住在猪舍宿舍内,严禁串舍。然后将病猪舍内的猪只进行分栏,将发病的猪只单独饲养,无饲养价值的猪只直接淘汰。这样做减少病原扩散和传播,降低环境的病毒载量。
2.紧急接种。选择优质的ST猪瘟细胞苗,抗原含量15 000 RID,所有猪只全部普免一次,每头猪接种2头份。紧急接种的时候,全场存栏猪全部接种,包含新生1日龄的仔猪,首先免疫没有临床症状的母猪、公猪和肥猪,然后免疫出现临床症状的哺乳仔猪和保育猪,2周后全部加强免疫1次。
3.调整免疫程序。针对猪场免疫程序混乱的情况,重新制定猪瘟的免疫程序。后备猪在100日龄和130日龄各免疫1次,2头份/头/次。经产母猪和公猪,每个季度普免1次,2头份/头/次。仔猪首次免疫在4~5周龄,第2次免疫在8周龄,第3次免疫在12周龄,每次1头份/头。疫苗选择优质的ST高效细胞苗。
1.生物安全。消毒是降低甚至消灭环境中病原载量的必要措施。通过对猪场入口和出口的车辆、人员及器具消毒,切断猪瘟病原传入的窗口。猪场道路,猪舍及猪只每周定期消毒2次。带猪消毒的时候切记避免使用刺激性强的消毒剂,建议使用长效消毒剂,如MSD公司的安灭杀,消毒浓度1∶200,每周消毒一次。
2.疫苗选择。猪瘟疫苗的选择非常关键。选择抗原含量高,品质稳定,有耐热保护剂的ST猪瘟高效细胞苗或优质的猪瘟脾淋苗。一般每头份抗原含量要求在15 000 RID以上。猪瘟疫苗很容易污染BVDV或霉形体。疫苗一定要做这两个病原的检测,确保其质量可靠。
3.疫苗保存。猪瘟疫苗的保存条件很容易忽视。猪瘟疫苗是冻干活疫苗,如果没有耐热保护剂,一定要放到冰箱冷冻保存,如果有耐热保护剂,可以冷藏保存。同时,冰箱要安装外置电子温度计,每天记录冰箱温度,在断电的情况下,尽量减少开冰箱次数。
4.免疫程序。猪瘟的免疫程序,不同的养殖场制定不同的方案。如果种猪跟胎免疫,要求种猪断奶和妊娠60 d各免疫1次,每次2头份/头。如果种猪做普免,必须每个季度普免1次。这样仔猪的母源抗体比较整齐,仔猪的首免日龄可以确定在4周龄前后,第2次免疫在8周龄,第3次免疫在12周龄。很多猪场不做第3次免疫,但临床抗体检测发现只免疫两次,猪瘟抗体阳转率低,加强一次后猪瘟抗体阳转率可以达到97%以上,且抗体保护时间长。
5.慎重引种。猪场引进后备种猪是病原传入的一个重要途径,很多猪场发生猪瘟都与引种或引精液相关。为了避免这种病原的传播方式,首先选择猪瘟抗原阴性的场引种或引精液。而且,引进的后备种猪要单独隔离、饲养,观察2个月。观察期间免疫猪瘟、蓝耳、伪狂犬和口蹄疫疫苗,每种疫苗免疫2次。猪瘟第二次免疫后1个月,每头后备种猪必须采血检测猪瘟抗体,凡是2次免疫猪瘟抗体仍是阴性的后备种猪,存在先天性猪瘟疫苗免疫耐受,必须转为育肥,禁止继续做种猪使用。
6.免疫记录。每次免疫完成,都要清楚填写免疫记录卡。免疫记录卡包含疫苗名称、厂家、生产批次、生产日期、注射剂量、免疫时间、操作人、监督人。这样利于免疫效果检测后的跟踪。
7.抗体监测。猪瘟抗体监测是评估猪瘟免疫效果的一种有效措施。猪瘟抗体监测建议使用IDEXX公司的猪瘟抗体检测试剂盒。同时,检测不同胎龄的种猪和不同日龄的商品猪。一般监测仔猪猪瘟首免前1周,首免后3周,二免后3周和三免后3周的猪群猪瘟抗体水平。猪瘟抗体检测不仅能反馈疫苗的效果,而且能反馈技术员的执行情况。
总之,猪瘟预防控制的成败决定养殖场的生死存亡。每个养殖场都要制定并严格执行猪瘟的防疫方案。
参考文献(略)