一例黄羽肉鸡沙门氏菌病的诊断与治疗

张　海孙建涛（.福建省龙岩市永定区农业人才协会；.广州市华南农大生物药品有限公司）



一例黄羽肉鸡沙门氏菌病的诊断与治疗

张海1孙建涛2
（1.福建省龙岩市永定区农业人才协会；2.广州市华南农大生物药品有限公司）

摘要笔者近日接到龙岩地区一饲养黄羽肉鸡发病后持续控制不下来的发病案例，通过临床表现、剖检变化、实验室检查（细菌分离培养、病毒分离鉴定、生化试验、药敏试验）等综合诊断确认为沙门氏菌病，根据药敏试验结果采取在全群饮水中添加硫酸安普霉素可溶性粉，同时添加葡萄糖和口服补液盐，连续饮用4 d，并紧急注射头孢噻呋钠的治疗方案后疫情得到较好控制，减少了饲养户的经济损失。

关键词黄羽肉鸡沙门氏菌病诊断药敏试验

伴随家禽养殖规模不断扩大、集约化程度越来越高的发展模式，家禽饲养的空间密度不断在人为地加大，这样环境中存在的大量条件性致病菌的危害就会越来越大，这些病菌的致病危害已经成为当前养殖业不可忽视的重要部分。这些致病菌中尤以沙门氏菌为最，原因是沙门氏菌既可通过垂直传播感染，也可通过污染的饲料、器具、饮水等进行水平传播，其带来的危害越来越严重[1-2]。笔者在临床中遇到1例由沙门氏菌引发的黄羽肉鸡60日龄感染病例，现报道如下。

2015年4月11日，福建省龙岩地区一养殖户在林中饲养的8 000羽三黄鸡发生以食欲急剧衰退、精神萎靡、严重腹泻、消瘦和零星死亡为主要症状的疾病，至4月15日已死亡80余羽。该群肉鸡1～3日龄用阿莫西林等开口药饮水；5日龄免疫接种新支二联弱毒苗和新支流灭活油乳苗；10日龄传染性法氏囊病疫苗饮水；12日龄免疫H5（6+7）灭活油乳苗；25日龄免疫H5（5+7）灭活油乳苗和新流二联灭活油乳苗；60日龄免疫H5（6+7）灭活油乳苗。鸡群开始发病时采用硫酸新霉素+强力霉素进行治疗，无明显效果。至就诊时，鸡群发病时长约4 d，死亡80余羽。养殖户在使用常见的几种抗生素后不见效果。

1　临床症状

患鸡发病日龄60 d，精神沉郁，采食量减退，消瘦，胸骨弯曲，行动迟缓，瘫痪，双翅下垂，缩头闭目，羽毛松乱，严重腹泻，起初排黄白色糊状粪便，继而排水样稀粪，肛门周围被粪便污染，呈绿色糊状污秽，后期多因衰竭而死亡[3]。

2　剖检变化

剖检病死鸡30羽，病死鸡心冠有出血斑点、表面有大量白色结节，肝脏肿大、褪色，质脆易碎，偶见菜花样大坏死灶区，少数病例肝脏破裂，腹腔积有血块，脾脏肿大、表面有坏死结节呈斑驳状，肌胃表面有白色结节，肾脏出血、瘀血，肠道黏膜出血溃疡，有的肠黏膜脱落。

3　实验室检查

3.1细菌分离培养无菌条件下采集患鸡肝脏，用接种环蘸取肝脏内液后划线于SS琼脂培养基表面，置37℃温箱培养24 h，观察发现培养基表面出现无色半透明，中心黑色或几乎全部黑色的菌苔，这种特性与沙门氏菌的培养特性基本一致。然后再挑取单个菌落进一步纯化培养，取纯化培养菌进行革兰氏染色，挑取少许菌落在玻片上用生理盐水稀释，将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液染1 min，水洗；滴加革兰氏碘液作用1 min，水洗；滴加脱色酒精，约30 s，水洗；滴加沙黄复染液，复染1 min，水洗，干后镜检，革兰氏阳性菌呈紫色；革兰氏阴性菌呈红色。

3.2生化特性试验用无菌接种环钩取纯化后的单个菌落接种到微量发酵管内，将管倒置后放37℃温箱中观察2 d[4]。

3.3药敏试验选择12种临床常见抗菌药物药敏纸片，采用药敏纸片扩散法在LB琼脂平板上操作，37℃培养24 h观察结果。判定标准为：药物抑菌圈直径＞20 mm为高敏，15～20 mm为中敏，10～15 mm为低敏，＜10 mm为不敏感[4]。

3.4病毒分离鉴定取发病鸡肝脏、脾脏、胰腺进行研磨，加PBS液稀释后制成悬液，反复冻融3次；7 000 r/min，离心15 min；加入1万u过滤好的抗生素，置4℃作用1.5 h；7 000 r/min，离心15 min；每胚0.2 mL，接种10～11日龄SPF鸡胚。收获胚液进行HA检测，对HA阳性样品进行特异性检测；HA阴性者，将胚液继续接种鸡胚盲传，至少盲传至F3代。接种后鸡胚继续放在温箱中孵育，每隔24 h观察一次鸡胚情况[4]。

4　结　果

4.1细菌分离在SS琼脂平板上分离所得的细菌菌落较纯，可见菌落光滑、细小，在自然光下呈蓝灰色或灰白色闪光，整齐均一。革兰氏染色后镜检呈阴性、细长杆菌，无芽孢，有聚集，偶见两个或多个连在一起。

4.2生化试验分离菌能发酵葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、木糖、果糖以及甘露醇等物质并产酸，符合鸡沙门氏菌的生化特性。

4.3药敏试验结果见表1。

表1　药敏试验结果

4.4病毒分离HA阴性，也未出现死胚及其他异常现象，病料接种鸡胚后144 h，鸡胚仍全部存活，这样便可排除病毒感染。

5　治　疗

从药敏试验结果来看，该菌对头孢类高度敏感，对氨基糖苷类药物和多粘菌素B中度敏感，对头孢曲松、四环素、诺氟沙星、左氟沙星、阿米卡星、复方新诺明、青霉素G、复方新诺明等不敏感或耐药。因此建议该养殖户马上采取如下措施：全群饮水中添加硫酸安普霉素可溶性粉，同时添加葡萄糖和口服补液盐，连续饮用4 d，并紧急注射头孢噻呋钠；用药后第3 d，鸡群采食量明显上升，死亡逐渐停止，全群精神状态逐渐恢复正常，疫情得到控制。

6　讨　论

1）肉鸡沙门氏菌病的发生，多与养殖环境差有关，南方黄羽鸡多数都在林间饲养，受场地卫生条件和气候变化影响比较大，同时还与饲料、饮水不洁有关，因此要预防该病，必须加强鸡场的饲养管理和环境卫生工作，保持饲料和饮水的清洁卫生[1]。沙门氏菌病要做好如下防控：（1）种源净化：沙门氏菌病是垂直传播性疾病，做好种禽的防疫工作尤为重要。种禽的健康直接关乎肉鸡的健康，因此要做好源头的防控工作。（2）流通环节：禽苗在运输过程中也要注意器具、车辆的消毒卫生，严防细菌滋生蔓延。（3）养殖环节：1日龄开口药的预防工作也要做好，选用合适的抗生素进行预防，如头孢类抗生素等的饮水、注射等；环境场地的卫生消毒工作；定期的预防性用药，掌握好疾病发生规律，定期选择性投药。

2）合理用药，当前沙门氏菌病的治疗由于其在临床上用药的不合理性造成菌株耐药性的不断增加，现有的广谱抗生素和抗革兰氏阴性菌等抗生素的效果越来越差。该病例在发病过程中，曾使用强力霉素、氟苯尼考、氧氟沙星和阿米卡星等多种临床常用药物，但治疗效果均不理想。因此选择药物要合理，要选择疗效确切、毒副作用小、使用途径方便及价格低廉并且配伍禁忌少的药物，同时要注意联合用药，选择协同作用强的药物组合。要密切观察用药后群体的反应情况，做好记录等。

参考文献：

[1]陆承平.兽医微生物学[M].3版.北京:中国农业出版社，2001：214-223.

[2]李健强，李六金.兽医微生物学实验实习指导[M].西安:陕西科学技术出版社，1999：156-171.

[3]张永利，万献尧.细菌耐药性研究进展[J].中国医师杂志，2004（12）：1721-1722.

[4]汪毅.鸡大肠埃希菌分离鉴定与药敏试验[J].上海畜牧兽医通讯，2001（4）：18-19.

文献标识码：B

文章编号：1003-4331（2016）01-0045-02