胃癌组织中MIF与miR-451的表达及其临床意义

王庆玉

(盘锦市中心医院 血管外科，辽宁 盘锦124000)



胃癌组织中MIF与miR-451的表达及其临床意义

王庆玉

(盘锦市中心医院 血管外科，辽宁 盘锦124000)

摘要：目的研究胃癌组织中MIF与miR-451的表达及临床意义。方法选取60例胃癌患者的肿瘤组织(观察组)及其癌旁组织标本(对照组)，采用RT-PCR方法检测胃癌组织和癌旁组织中MIF和miR-451的表达水平，并分析其与临床病理的关系。结果RT-PCR结果显示，胃癌患者的肿瘤组织标本中MIF表达水平显著高于对照组患者，差异具有统计学意义(P<0.05)；miR-451表达水平显著低于对照组患者，差异具有统计学意义(P<0.05)。比较胃癌中MIF与miR-451的表达与临床病理因素关系可知，MIF与miR-451的表达与患者的性别、年龄及远处转移无关(P>0.05)，而与肿瘤分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05)。经Spearman等级相关分析发现胃癌组MIF与miR-451表达具有显著负相关性(r=-0.697,P=0.012)。结论胃癌组织中MIF的表达显著升高，而miR-451的表达显著下降，且具有明显的相关性，可以作为重要的辅助指标对临床胃癌的诊断、治疗和预后判断进行指导。

关键词：胃癌；MIF；miR-451；表达

(ChinJLabDiagn,2016,20:0375)

胃癌是最常见的癌症之一，也是导致癌症死亡的第二大疾病，由于早期患者的临床症状不明显，且缺乏特异性的检查指标，多数患者确诊时已经处于晚期，术后胃癌复发率高达60%[1，2]。研究表明，巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migrationinhibitory factor，MIF)与炎症和免疫反应有着密切的关系，在细胞的生长和分化中起着十分重要的作用[3]。miRNA可以对细胞的增殖、凋亡以及分化等多种重要的生物学过程进行调控，并且在多种肿瘤组织中异常表达[4]。本研究检测了胃癌及相应癌旁组织中MIF和miR-451的表达情况及相关性，探讨其在胃癌的诊断、治疗、预后判断中的作用，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选择2013年8月至2015年6月我院收治的60例胃癌患者的肿瘤组织石蜡标本。术前，所有患者均未接受放疗、化疗治疗，术后均经过组织病理检查证实，均未同时患有其他系统恶性肿瘤。其中男性38例，女性22例；年龄36-78岁，平均(55.4±12.6)岁。另外选取上述胃癌患者的癌旁组织作为对照组，癌旁组织病理标本位置距离肿瘤边缘在5 cm以上，经HE染色确诊为非癌组织。

1.2方法

1.2.1试剂Trizol试剂、SuperScript.Ⅲ First-Strand Synthesis System，均由美国Invitrogen公司生产；Revert Aidrm First Strand cDNA Synthesis Kit(由美国MBI公司生产)；SybrGreen PCR Master Mix(2X)(由美国ABI公司生产)；引物由上海生工生物工程公司合成。

1.2.2检测方法采用RT-PCR方法检测，MIF以β-actin 为内参，miR-451以U6为内参，实验步骤具体如下：①收集标本，石蜡切片，HE染色后阅片；②二甲苯脱蜡，梯度乙醇(100%、90%、80%、70%、50%)去除残留的二甲苯；③严格按照试剂盒的步骤提取脱蜡后组织中的总RNA；④分别按照miRNA及MIF反转录试剂说明书合成cDNA第一链，合成的cDNA置于-20℃保存；⑤分别按照miRNA及MIF PCR试剂说明书将合成的cDNA进行RT-PCR检测；采用2-ΔΔCt方法表示miR-451及MIF的相对表达量。

1.3统计学方法

2结果

2.1观察组及对照组MIF与miR-451表达情况

RT-PCR结果显示，胃癌患者的肿瘤组织标本中MIF表达水平显著高于对照组患者，差异具有统计学意义(P<0.05)；miR-451表达水平显著低于对照组患者，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1　观察组及对照组MIF与miR-451表达情况

2.2胃癌组织中MIF和miR-451的表达与临床病理的关系

比较胃癌中MIF和miR-451的表达与临床病理因素关系可知，MIF和miR-451的表达与患者的性别、年龄及远处转移无关(P>0.05)，而与肿瘤分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05),见表2。

表2　胃癌组织中MIF与miR-451的表达与临床病理的关系

2.3胃癌组织中MIF与miR-451表达的关系

胃癌组织中MIF的相对表达为(1.516±0.142)，miR-451的相对表达为(0.297±0.104)，经Spearman等级相关分析发现胃癌组MIF与miR-451表达具有显著负相关性(r=-0.697,P=0.012)。

3讨论

MIF是于20世纪60年代被发现的，是一种来源于T淋巴细胞的细胞因子，可以抑制巨噬细胞向血管外的游走。Meyer-Siegler等[4]在对前列腺癌的研究中发现，在存在远处转移的前列腺癌组织中，MIF的表达明显升高。近年来，大量的国内外研究显示[5-7]，在肝癌、大肠癌、胃癌、卵巢癌、乳腺癌以及膀胱癌等多种恶性肿瘤中，MIF均有过度表达。MicroRNA (miRNA)是一类长约20-25个核苷酸的非编码的单链RNA分子，可以通过与靶mRNA互补配对，促进目标mRNA的降解，或是使得蛋白翻译受到抑制，在细胞增殖、分化、凋亡、基因调控、免疫应答以及肿瘤的发生、发展中具有重要的作用[8]，也与血液系统、心血管、神经发育等过程有着十分密切的联系[9]。目前，围绕胃癌mRNA研究较多的还有miR-21、miR-27a以及miR-146a等[10]。

本研究采用RT-PCR方法检测了胃癌标本以及癌旁组织标本中MIF与miR-451的表达水平，结果表明，胃癌的病理标本中MIF表达水平均显著高于对照组(P<0.05)；miR-451表达水平均显著低于对照组(P<0.05)。通过比较胃癌中MIF与miR-451 的表达与其临床病理关系可知，MIF与miR-451的表达与患者的肿瘤分化程度、TNM分期、浸润深度以及淋巴结转移均密切相关(P<0.05)。马宁[11]用RT-PCR方法研究了30例胃癌组织中MIF与miR-451的表达，结果发现，肿瘤组织中的MIF的表达明显升高，而miR-451的表达明显降低，两者的表达均与胃癌的组织类型、TNM 分期、浸润深度及有无淋巴结转移相关，这与本研究的结果较一致。

本研究经Spearman等级相关分析发现，胃癌组MIF与miR-451表达具有显著负相关性(P<0.05)。MIF是一种独特的、可以促进恶性肿瘤发生发展的细胞因子，在肿瘤发展中可能起着双重的作用，既可以通过自分泌途径对炎症细胞的杀瘤活性进行调节，又可以通过旁分泌途径促进肿瘤细胞的增殖和转移[12]。肿瘤的血管新生过程需要多种促血管生长因子的调控，比如白细胞介素(IL)、组织生长因子等。MIF可以控制促血管生长因子的分泌，参与到恶性肿瘤的血管生成的过程中[13]。miR-451可能具有抑癌基因样作用，而MIF可能是miR-451的作用靶点之一。研究表明，胃癌细胞中外源过表达miR-451可以使得MIF蛋白的表达下调，表明miR-451的表达下调部分可能是由于MIF的表达上调所导致的[14-15]。

总之，MIF和miR-451与胃癌的发生、发展过程有着十分密切的关系。虽然在胃癌发展过程中MIF和miR-451表达的具体分子机制以及其作用尚未完全阐明，但结果表明，其异常的表达与肿瘤细胞的增殖、分化、浸润以及转移相关，可以为胃癌的诊断、治疗以及预后预测提供重要的参考价值。

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Expression and clinical significance of miR-451 and MIF in gastric cancer

WANGQing-yu.

(Departmentofvascularsurgery，CentralHospitalofPanjinCity,Panjin124000，China)

Abstract:ObjectiveTo study the expression and clinical significance of miR-451 and MIF in gastric cancer tissues.Methods60 cases of gastric cancer patients with tumor tissue (observation group) and its adjacent tissue specimens (control group) was selected.The RT-PCR method was used to detect the expression level of miR-451 and MIF in gastric cancer tissues and adjacent tissues.Its relationship with clinical pathology was observed.ResultsRT-PCR results showed that the expression level of MIF in tumor tissues was significantly higher than that in control group (P<0.05).The expression level of miR-451 was significantly lower than that in control group (P<0.05).Compared the expression of miR-451 and MIF in gastric cancer,the expression of and MIF was associated with miR-451(P>0.05).Which was associated with tumor differentiation,TNM stage,invasion depth and lymph node metastasis (<0.05 P).Spearman rank correlation analysis showed that the expression of miR-451 and MIF in gastric cancer group had significantly negative correlation(r=-0.697,P=0.012).ConclusionThe expression of MIF in gastric cancer tissues is significantly increased,while the expression of miR-451 was significantly decreased,and it had significant correlation,which can be used as an important assistant index for diagnosis,treatment and prognosis of gastric cancer.

Key words:gastric cancer;MIF;miR-451;expression

(收稿日期：2015-10-11)

文献标识码：A

中图分类号：R375.2

文章编号：1007-4287(2016)03-0375-03