联苯乙酸原料纯化条件研究*

李　君，李俊雅，赵唯贤

(1.湘潭医卫职业技术学院，湖南 湘潭 411102；2.河南医学高等专科学校， 郑州 451191)



基础医学

联苯乙酸原料纯化条件研究*

李君1，李俊雅1，赵唯贤2

(1.湘潭医卫职业技术学院，湖南 湘潭 411102；2.河南医学高等专科学校， 郑州 451191)

[摘要]目的探讨联苯乙酸精制纯化条件。方法 以四种溶剂冰醋酸、无水乙醇、冰醋酸-水、无水乙醇-水和重结晶时不同温度为影响因素，以RP-HPLC法测定产品纯度。结果以醋酸-水按45%：55%(V:V)的比例为纯化条件，联苯乙酸纯品纯度达95.2%。结论本研究结果为联苯乙酸实现工业化生产提供技术参考。

[关键词]联苯乙酸；纯化；RP-HPLC

联苯乙酸(4-Biphenylacetic acid)为非甾体抗炎药，是芬布芬(fenbufen)的活性代谢物，具有较强的镇痛消炎作用,临床上广泛用于变形性关节炎、肩周炎、腱鞘炎、网球肘、腱周炎、肌肉痛、软组织损伤、外伤性肿胀疼痛等的镇痛消炎[1]。据报道[2]，以苯硼酸与对溴苯乙酸乙酯经三苯基磷钯催化偶联，再经皂化得到产品。该方法反应步骤短，但得到的联苯乙酸粗品经精制后，其纯度仍较低。为提高联苯乙酸的纯度，本文以无水乙醇和水的混合溶液作为溶剂，采用重结晶的方法，摸索合适的精制纯化条件，所得联苯乙酸纯度达到了药用标准，现报告如下。

1实验仪器与方法

1.1仪器LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津)，RE-52A 旋转薄膜蒸发仪、电子天平、98-1-B型电子调温电热套、大功率电动搅拌器、数字显示显微熔点测定仪、智能集热式磁力搅拌器，三口圆底烧瓶、球形冷凝管，以上仪器均购于上海沪循科学仪器有限公司。

1.2试剂联苯、冰乙酸、甲醛，乙醇、溴乙烷、醋酐、氢氧化钠均为分析纯，购自武汉博士德生物工程有限公司。

1.3纯化方法

1.3.1四种溶剂及配制以溶剂冰醋酸、无水乙醇、冰醋酸-水、无水乙醇-水等四种溶剂为指标，以吸收率高者为所选溶剂。

1.3.2溶剂体积比对纯化的影响以吸收率高者为所选体积配比、浓度。

1.3.3重结晶以产物纯度高者为所反应温度。

1.4联苯乙酸精致纯化方法以反应的溶剂、溶剂的体积及结晶的温度综合确定。

1.5RP-HPLC色谱条件用高效液相色谱法测定所得产物的纯度。

2实验方法与结果

2.1联苯乙酸原料的合成自制联苯乙酸原料的合成路线，见图1。

图1　自制联苯乙酸原料的合成路线

2.2联苯乙酸原料精制纯化的方法考察

2.2.1溶剂的选择选择了四种溶剂，分别为醋酸、无水乙醇、醋酸-水、无水乙醇-水。称量2.0 g联苯乙酸粗品放入底烧瓶中，加入20 mL溶剂，加热回流1.0 h。趁热过滤，冷却至室温(20 ℃)，产品在105～110 ℃下烘干至恒重。称量产品重量并测熔点。通过平行实验对四种溶剂进行比较分析，以联苯乙酸纯品的收率和熔点为指标，从中选取一种确定最佳的溶剂。结果见表1。

表1　不同溶剂对纯化的影响

2.2.2醋酸与水的不同体积配比对联苯乙酸纯化的影响称量2.0 g联苯乙酸粗品放入底烧瓶中，加入不同体积配比20 mL醋酸-水为溶剂，加热回流1.0 h。采用(2.2.1)精制纯化方法，以联苯乙酸纯品的收率和熔点为指标确定最佳的体积配比。结果见表2。

表2　不同浓度对纯化的影响

2.2.3重结晶温度对联苯乙酸纯化的影响称量2.0 g联苯乙酸粗品放入底烧瓶中，加入不同体积配比20 mL醋酸-水为溶剂，加热回流1.0 h。采用(2.2.1)精制纯化方法，以联苯乙酸纯品的收率和熔点为指标确定最佳的体积配比。结果见表3。

表3　不同温度对纯化的影响

2.3联苯乙酸精制纯化的方法取联苯乙酸粗品2.0 g，加入至20 mL醋酸-水的45%∶55%(V∶V)溶剂中，于常规回流冷凝装置上加热至65 ℃，回流1.0 h，趁热过滤后转入烧杯中冷却至室温，于105～110 ℃下干燥至恒重[3]。

2.4RP-HPLC测定纯化后联苯乙酸的含量

2.4.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂；以甲醇- 0.1%冰醋酸(65∶35)为流动相；检测波长254 nm，理论板数按联苯乙酸峰计算应不低于5 000，联苯乙酸与邻苯基苯甲酸分离度应不小于3。

2.4.2测定方法精密称取本品适量，加流动相配制成每1 mL约含4 μg的溶液作为供试溶液；精密称取联苯乙酸对照品适量，加流动相配制成每1 mL约含4 μg的溶液作为对照溶液；注入液相色谱仪，记录色谱峰，计算两个主峰之间的分离度，应不小于3。精密量取对照溶液和供试溶液各20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，即得[4]。测得联苯乙酸的纯度为95.2%。见图2-3。

图2　联苯乙酸标准对照品

图3　 联苯乙酸样品

3讨论

根据我国现行GMP标准和规定，GMP的适用范围是药品制剂生产的全过程，原料药生产中影响成品质量的关键工序：精制、干燥和包装。联苯乙酸为较常用的原料药，其精制和纯化工序显得尤为重要。

联苯乙酸为白色或微黄色结晶性粉末，无臭、无味。在氢氧化钠试液中易溶，在醋酸乙酯和冰醋酸中略溶，在甲醇或乙醇中微溶，在水中不溶。熔点为163～166 ℃。根据联苯乙酸的理化性质，确定了联苯乙酸的纯化方法，使其达到药用的标准，为下一步工业化大生产提供技术参考。

参考文献：

[1]Kohler C,Tolman E,Wooding W,et al.A review of the effects of fenbufen and a metabolite, biphenylacetic acid on platelet biochemistry and function[J].Arzneimittefurschung, 1980, 30(4A):702-707．

[2]伍晓春.非甾体抗炎药联苯乙酸的简便合成法[J].华西药学杂志,2005,20(4):320-321.

[3]矫灵艳,黄玉东,曹海琳,等.4,6一二氨基间苯二酚在盐酸溶液中的重结晶法精制[J].高校化学工程学报,2006,20(2):217-221.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京:化学工业出版社,2010.

[责任编校：柯莉]

Study of the Condition for 4-Biphenylacetic Acid Punification

LI Jun, LI Jun-ya, ZHAO Wei-xian

(Xiangtan Vocational and Technical College, Xiangtan Hunan; Henan Medical College, Zhengzhou Henan 451191)

[Abstract]Objective To establish the condition for 4-Biphenylacetic acid purification. Methods

The effects of four kinds of solvents were acetic acid, ethanol, acetic acid water, ethanol and water. The temperature of phenylacetic acid was purified by the recrystallization of poetic couplet effect. Results The effects of four kinds of solvents were acetic acid, ethanol, acetic acid water, ethanol and water 45%∶55%(V∶V), the temperature of phenylacetic acid was purified 95.2% by the recrystallization of poetic coupletely effect. ConclusionThis method provides technical reference for the industrialization production of the acetic acid.

[Key words]4-Biphenylacetic acid; purification; RP-HPLC

[中图分类号]R 914.4

[文献标识码]A

[文章编号]1008-9276(2016)01-0001-03

*基金项目：湖南省教育厅科研项目，编号：14C1113。

作者简介：李君(1983-)，男，河南省南阳市人，硕士，讲师，从事药品质量标准研究工作。

收稿日期：2015-06-10