高脂膳食联合链脲佐菌建立2型糖尿病大鼠模型研究

陈红涛，覃小菊，吕　冬，张楚楚，董彩梅



高脂膳食联合链脲佐菌建立2型糖尿病大鼠模型研究

陈红涛，覃小菊，吕冬，张楚楚，董彩梅

摘要：[目的]探索建立一种稳定简单的2型糖尿病大鼠模型。[方法]将40只无特定病原体级雄性大鼠采用随机数字表法随机分为造模组(30只)和对照组(10只)，造模组高脂饲料喂养后腹腔注射链脲佐菌(STZ)，对照组注射等体积缓冲液，监测两组空腹血糖、体重、饮水量、尿量等。[结果]造模组血糖和饮水量明显高于对照组(P<0.01)，成功造模25只，造模成功率83.33%。[结论]高脂膳食联合STZ腹腔注射诱导建立大鼠2型糖尿病模型操作简单、成功率较高，是一种较理想的造模方法。

关键词：2型糖尿病；动物模型；高脂膳食；链脲佐菌；大鼠；血糖

Study on establishment of type 2 diabetic rat model using high fat diet combined with streptozotocin

Chen Hongtao，Qin Xiaoju,Lü Dong，et al

[Shaoyang Medical College (Department of Nursing),Hunan 422000 China]

AbstractObjective:To probe into a stable and simple model of type 2 diabetic rats.Methods:A total of 40 male rats without specific pathogen level were randomly divided into modeling group(30 rats) and control group (10 rats)by using a random number table method,the rats in modeling group were intraperitoneal injected with streptozotocin (STZ) after high-fat diet,while the rats in control group were injected with equal volume of buffer，monitoring the two groups of fasting blood glucose，weight，water intake，urine volume.Results:The blood glucose and water intake of the model group were significantly higher than that in control group(P<0.01)，the number of success establishment of model was 25，and its success rate was 83.33%.Conclusion:High fat diet combined with intraperitoneal injection of STZ to establish the model of type 2 diabetes rats was simple and had higher success rate,which was an ideal method of making model.

Key wordstype 2 diabetes；animal model；high fat diet； streptozotocin；rats；blood glucose

动物实验是生命科学的重要研究方法，其作为临床实验的过渡，从组织病理生理学的高度为临床护理技术的革新及安全应用提供了理论参考依据[1]。适当可行的动物实验非常必要，可有效指导护理理论与临床实践[2]。国际糖尿病联盟(IDF)统计显示，截止2014年全球共有3.87亿例糖尿病病人，其中2 型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)占85%～95%[3]。我国2010年调查数据显示，20岁以上人群中糖尿病总体患病率达到了9.7%，病人总数已超过9 200万例以上[4]。建立合适的动物模型是研究糖尿病发病机制和临床防治的基础。为了开展糖尿病足溃疡创面护理的动物实验研究，本研究采用高脂喂养后腹腔注射链脲佐菌(STZ)的方法建立了稳定的2型糖尿病大鼠模型。现报道如下。

1材料与方法

1.1实验动物及材料无特定病原体级雄性大鼠40只，由我校动物实训中心提供，体质量(200±15)g。高脂饲料(配方：蛋黄2.5%，蔗糖20.0%，猪油10.0%，基础饲料67.5%)喂养，自由摄食、进水，室温18 ℃～22 ℃。

1.2制备糖尿病大鼠模型将40只大鼠编号，采用随机数字表法随机分为造模组(30只)和对照组(10只)。造模组高脂饲料喂养2个月，禁食16 h后，腹腔注射链脲佐菌(STZ)(0.1 M加pH 4.2的枸橼酸钠-枸橼酸缓冲液配制成10 mg/mL溶液)35 mg/kg[5]；对照组普通饲料喂养2个月，腹腔注射等体积的枸缘酸钠-枸橼酸缓冲液。1周后，造模组大鼠有多饮、多尿、体质量减轻，空腹血糖≥16.7 mmol/L的大鼠入选为模型[6]。

1.3评价指标2组均于腹腔注射后第3天、第7天、第14天、第21天、第28天分别记录大鼠体重、平均饮水量，观察垫料湿度粗测记录尿量，并取尾静脉空腹血进行血糖测定。

2结果

2.1一般状况观察发现，造模组大鼠逐渐出现活动减少、反应迟钝、皮毛发黄，第3天出现多饮、多食、多尿等症状；对照组大鼠体态活泼，皮毛干净、有光泽，生长正常。

2.22型糖尿病大鼠模型的制作结果根据入选标准，成功造模25只糖尿病大鼠，造模成功率83.33%。两组大鼠血糖、体重、饮水量变化见表1、表2。

表1　两组大鼠腹腔注射后不同时间血糖水平比较±s)　mmol/L

表2　两组大鼠腹腔注射前后体重、饮水量比较±s)

3讨论

糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病，主要由胰岛素抵抗和胰岛素分泌受损引起的糖、 脂肪和蛋白质代谢紊乱。2型糖尿病的特征初期为胰岛素作用抵抗，胰岛β细胞渐进性功能障碍，进而发展为胰岛素分泌缺陷为主，伴或不伴胰岛素作用抵抗[7]。有研究指出，膳食引起的肥胖是当前糖尿病流行的主要决定因素之一[8]。而STZ是亚硝基脲类似物，可通过葡萄糖转运蛋白2进入胰岛β细胞，干扰葡萄糖的转运，从而诱导DNA的烷基化，导致胰岛β细胞坏死[9]。因此，本研究选用高脂膳食联合STZ腹腔注射诱导建立大鼠2型糖尿病模型，可以模拟胰岛素作用抵抗，出现血糖升高、体重减轻等临床症状，同时成本较低，是一种较理想的造模方法。

随着护理专科的发展，动物实验已为各护理专科科研的发展发挥了积极的作用。近10余年来动物实验护理研究论文数量呈现逐年增加的趋势，且部分研究成果已在临床取得了较好的应用效果[1]。但护理科研中，实验动物的选择与应用目前仍处于初始阶段，还应积极进行创造性思维，逐步探索结合护理专业特点的合适可行的动物实验。本研究属于糖尿病足溃疡创面护理动物实验研究的前期研究，为糖尿病足溃疡大鼠模型的制备奠定了研究基础，也是动物实验在护理研究中的一次有益尝试。但2型糖尿病病因复杂，涉及遗传因素与环境因素及其相互作用， 目前尚无一种公认的理想造模方法。不过随着科学技术及科研水平的不断发展，2型糖尿病动物模型的制作必将取得更深层次的突破。

参考文献：

[1]周影,赵佛容.动物实验在护理科研中的应用现状[J].中华现代护理杂志,2008,21(14):2333-2334.

[2]李漓,刘雪琴.浅谈护理科研中实验动物的选择与应用[J].解放军护理杂志,2003,20(3):34-35.

[3]International Diabetes Federation.IDF diabetes atlas[S].6th edition,2014 update.Belgium:International Diabetes Federation,2014:1-2.

[4]Yang WY,Lu JM,Weng JP,etal.Prevalence of diabetes among men and women in China[J].N Endl J Med,2010,362(12)：1090．

[5]Nikooie R,Rajabi H,Gharakhanlu R,etal.PPAR’ s and diosgenin a chemico biological insight in NIDDM[J].Chemico-Biological Interactions,2013,206(2):403-410.

[6]张玉领,孙长颢.Ⅱ型糖尿病动物模型的研究进展[J].现代预防医学,2012,39(8):2015-2016.

[7]杨书榕,崔立.不同剂量STZ与高脂饲料联合诱导糖尿病小鼠模型[J].上海交通大学学报(农业科学版),2014,32(6):79.

[8]Almind K,Kahn CR.Genetic determinants of energy expenditure and insulin resistance in diet-induced obesity in ice[J].Diabetes,2004,53(12):3274-3285.

[9]Lenzen S.The mechanisms of alloxan-and streptozotocin-induced diabetes[J].Diabetologia,2008,51(2):216-226.

(本文编辑李亚琴)

(收稿日期：2015-08-07；修回日期：2016-02-20)

中图分类号：R471

文献标识码：A

doi:10.3969/j.issn.1009-6493.2016.07.007

文章编号：1009-6493(2016)03A-0791-02

作者简介陈红涛，讲师，硕士研究生在读,单位：422000，邵阳医学高等专科学校(护理系)(学习单位：湖南师范大学医学院);覃小菊、吕冬、张楚楚单位：422000，邵阳医学高等专科学校(护理系)；董彩梅(通讯作者)单位：412200，湖南师范大学附属湘东医院。

基金项目湖南省教育厅科学研究项目，编号：13C866；2013年湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目，编号：2013-576。