白族药紫金龙的HPLC指纹图谱研究

苏小军　杨怀镜　曾懿　闻焜

【摘 要】 目的：建立紫金龙药材HPLC指纹图谱分析方法，为紫金龙药材的质量评价提供依据。方法：采用RP-HPLC色谱法，Inertsil ODS-SP（4.6mm×150mm，5μm）色谱柱，以甲醇-0.2%磷酸水溶液（三乙胺调pH为7.0）为流动相梯度洗脱，柱温35℃，流速1.0ml/min，检测波长采用波长切换，0～40min为230nm，40～90min切换至285nm，进样量10μl；数据使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统研究版（2012A） 进行处理。结果：在选定的色谱条件下确定10个峰构成紫金龙药材的特征共有峰，各批次药材均具有上述特征，但特征峰的相对含量分布差异导致色谱概貌存在一定差异。结论：该方法简便、精密度高、重现性好，可为紫金龙药材的质量评价提供依据。

【关键词】 白族药；紫金龙；特征图谱；HPLC

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）04-0001-03

Abstract：Objective To establish the HPLC fingerprint of Dactylicapnos scandentis radix and to research the quality of Dactylicapnos scandentis radix.Methods The gradient elution and multiple wavelength mode was applied in chromatographic separation，and chromatographic fingerprint similarity evaluation software（2012A） was used to analyse data.Results 10 peaks were identified as the characteristic fingerprints of Dactylicapnos scandentis radix. All samples tested contained the same 10 peaks， but the content of each peak showed great difference among the samples，which resulted in the differences on their chromatograms.Conclusion This method is simple，accurate with good reproducibility，and can be used for the quality control of Dactylicapnos scandentis radix.

Keywords：Traditional Bai Medicine；Dactylicapnos Scandentis Radix；Fingerprint；HPLC

白族药滋坚伦（白语：Zixjieilht）为罂粟科植物紫金龙Dactylicapnos scandens （D.Don） Hutch.的根，别名串枝莲、碗豆七，夏秋采集其根，晒干后入药。其味苦、性凉，有毒，具有消炎、止痛镇痛、止血、降压的功效，白族民间用于胃痛、神经性头痛、牙痛、外伤肿痛、外伤出血、高血压等。在我国西南地区民间广泛用于牙痛、神经性头痛、胃痛和止血，临床表明具有较好的镇痛作用[1-5]。紫金龙含有多种生物碱，主含普罗托品、异紫堇定等[6-8]。中药材指纹图谱是近年来被国际公认的控制中药或天然药物质量的有效方法，其优点在于较全面反映中药复杂的化学成分及其相对比例。研究采用反相高效液相色谱法建立紫金龙药材的特征指纹图谱，为该药材的质量评价提供依据[9]。

1 仪器与材料

1.1 仪器 安捷伦1200高效液相色谱仪（包括自动进样器、DAD紫外检测器、HP 色谱工作站等）；GWA-UN2-C30纯水器；CQ-250超声波清洗仪；岛津AND GH-252电子天平。

1.2 材料 紫金龙药材经大理州食品药品检验所杨怀镜主任药师鉴定为罂粟科植物紫金龙Dactylicapnos scandens（D.Don）Hutch.的干燥根，所测样品见表1；原阿片碱（批号：110853-200402，中国药品生物制品检定所）；近视乐眼药水（市场抽样合格制剂）；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱为Inertsil ODS-SP（4.6mm×150mm，5μm）；流动相A相为0.2%磷酸水溶液（三乙胺调pH为7.0），B相为甲醇，梯度洗脱，见表2；柱温：35℃；流速：1.0ml/min；检测波长：0～40min波长为230nm，40～90min切换至285nm；进样量：紫金龙（1～12）进样10μl，原阿片碱对照品进样5μl，近视乐眼药水参照物溶液进样5μl。

2.2 对照品溶液制备 精密称取原阿片碱对照品5.46mg置10ml量瓶，加甲醇定容至刻度，摇匀，微孔滤膜过滤后作为对照品溶液，进样5μl，见图1；取近视乐眼药水2ml用水稀释至50ml的容量瓶中，摇匀，微孔滤膜过滤后作为参照物溶液进样5μl，记录色谱图，见图2。

2.3 供试品溶液制备 精密称取60℃干燥至恒重的紫金龙粉末2g（过40目筛），置具塞锥形瓶中，加入氨水将其润湿，放置30min，加甲醇和氯仿（1∶1）混合溶液20ml，超声提取30min，放冷后，滤过，蒸干，残渣用甲醇分次溶解，转移至10ml量瓶中并稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤后进样10μl，记录色谱图，见图3。

2.4 特征图谱评价方法 采用国家药典委员会开发的中药色谱指纹图谱相似度评价系统研究版（2012A）。对照图谱生成方法为中位数法，时间窗宽度为0.5min，相似度计算方法为夹角余弦法。