池塘养殖水与水产品中孔雀石绿残留的相关性分析

□ 李春青 高丽娜 时文博 陈永平 李连庆 农业部渔业环境及水产品质量监督检验测试中心（天津）



池塘养殖水与水产品中孔雀石绿残留的相关性分析

□ 李春青 高丽娜 时文博 陈永平 李连庆 农业部渔业环境及水产品质量监督检验测试中心（天津）

本文进行了含有孔雀石绿的水体对以色列鲤污染情况的模拟实验。由实验可知，有色孔雀石绿进入水体后，23.2%～24.3%保留在水体中并随时间逐步下降，部分被鱼体吸收，其他大部分被沉积物吸收。沉积物中的孔雀石绿也会少量释放到水体中，从而对养殖鱼类产生二次污染。以色列鲤肌肉在实验前15 d中，无色孔雀石绿残留浓度缓慢升高，在15 d以后，无色孔雀石绿浓度逐渐下降，30～42 d基本稳定在1.0 μg/kg左右。孔雀石绿在整个实验过程中逐渐下降，15～42 d基本稳定在0.5 μg/kg左右。

孔雀石绿是三苯甲烷型染料，历史上曾在水产养殖过程中用作杀菌剂，主要用于寄生虫、真菌和细菌性疾病的治疗，功效显著。但由于其高毒性、高残留、高致癌和高致畸的“四高”特性，我国在《无公害食品渔用药物使用准则》（NY 5071—2002）中已将其列为禁用药物。

然而，在日常对水产品的检查过程中还是偶有阳性水产品出现。阳性水产品中孔雀石绿的引入往往是多途径的，目前为了杜绝在鱼药、饲料、苗种和水产品的生产或养殖过程中违规使用孔雀石绿，各级监管部门加大了监督和查处力度，取得了一定成效。

不过，曾经使用过孔雀石绿的池塘养殖环境（养殖水、沉积物）中孔雀石绿也可能再次迁移至水产品中造成污染，环境中孔雀石绿检测方法研究报道较少，也无相应的检测标准，对此的监控成为难点。因此，本文研究了孔雀石绿在池塘养殖水与水产品中的迁移情况，以期为解决上述问题了提供技术参考。

材料和方法

养殖箱处理

在养殖箱中放入含有孔雀石绿浓度为0.1 mg/L的养殖用水120 L。每隔1～2日更换养殖水一次，换水量约25～30 L。设立3个平行试验和1个对照试验。

实验对象

实验选用体长5～6 c m的健康以色列鲤鱼苗种为实验对象，购取自天津西青水产养殖基地。运至实验场地后，进行消毒处理并放在暂养箱中暂养，同时对实验用鱼进行为期7天的驯化工作，待鱼正常进食并适应环境后取健康活泼的个体进行试验，每个养殖箱中投放鲤鱼苗种30尾。

采样过程

于1 、2、3、7、1 4、21、28、35、42 d分别抽取鲤鱼幼苗3尾和养殖水1 L进行测定。养殖水测定项目包括水温、pH值、溶解氧和孔雀石绿；水产品测定项目为孔雀石绿。

水中孔雀石绿的测定

量取500 mL水样于1 000 mL分液漏斗中，分别加入100 n g/ml孔雀石绿内标200 μL和二氯甲烷20 mL，充分震荡，静置30 min，将下层溶液放入50 mL鸡心瓶中。残留样品再次加入二氯甲烷20 m L，充分震荡，静置30 min，将下层溶液合并放入同一鸡心瓶中，旋转蒸发至干，加入2 m L流动相，漩涡混合1 min，超声5 min，滤膜过滤后进样测定，色谱质谱条件参照《水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》（GB/T 19857- 2005）进行。以信噪比S/N=3计算，方法检出限为0.2 ng/L。

以色列鲤鱼肌肉中孔雀石绿的测定

参照国家标准《水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》（GB/T 19857-2005）进行检测。

结果

池塘水中孔雀石绿的残留

水中的有色孔雀石绿在投入水体后，迅速降低至初始浓度的23.2%～24.3%，之后有色孔雀石绿浓度下降速度有所减缓。经过对沉积物检测发现，有色孔雀石绿在投入水体后部分被鱼体吸收，其他大部分被沉积物吸收，并在较长一段时间内在水和沉积物之间保持动态平衡。即沉积物中的孔雀石绿会少量返回到水质中，从而对养殖鱼类产生二次污染。

鱼体肌肉中孔雀石绿的残留

检测结果显示，以色列鲤鱼在前15 d中，无色孔雀石绿浓度逐渐升高，最高残留量达5.97 μg/kg，而15 d以后，无色孔雀石绿逐渐呈现下降趋势，30～42 d基本稳定在1.0 μg/kg左右。与此同时，有色孔雀石绿在整个实验过程中逐渐下降，15～42 d基本稳定在0.5 μg/kg左右。

实验前15 d中，有色孔雀石绿在以色列鲤体内转化为无色孔雀石绿的速度超过鱼体代谢速度，因而无色孔雀石绿浓度有所升高；当鱼体外界孔雀石绿浓度下降后，转化速度便低于代谢速度，无色孔雀石绿的浓度因而开始逐渐下降。

本研究过程中以色列鲤肌肉中无色孔雀石绿残留最高量达5.97 μg/kg。在经过42 d后，浓度仍有1.0 μg/kg，说明低浓度无色孔雀石绿在以色列鲤体内降解速度缓慢，主要由无色孔雀绿的非离子和亲脂性的特点所致。

讨论

本研究表明，如果曾经使用过孔雀石绿进行杀菌，即便是在水中检测到的孔雀石绿含量比较低，孔雀石绿仍有通过富集作用对鱼体产生二次污染，或蓄积在沉积物中，在未来养殖过程中，通过缓慢释放孔雀石绿至水中的方式对水产品产生二次污染。因此，对使用过孔雀石绿的养殖场除了换水外，对沉积物进行处理也是十分重要的。在有条件的前提下，应彻底更换沉积物，以确保孔雀石绿不会对将来放养的水产品产生二次污染。即便无法做到彻底清坑，也需要进行翻耕、暴晒或使用生物制剂降解孔雀石绿，并检测沉积物中孔雀石绿含量，待其含量降至安全限量以下或基本消失后再行放养。