种公鸡精液质量检测规范与选育标准

魏晓冉，石凤英，张长宝，高长春

（北京市华都峪口禽业有限责任公司，国家蛋鸡产业技术体系平谷综合试验站，北京平谷101206）

种公鸡精液质量检测规范与选育标准

魏晓冉，石凤英，张长宝，高长春

（北京市华都峪口禽业有限责任公司，国家蛋鸡产业技术体系平谷综合试验站，北京平谷101206）

对于蛋种鸡企业来说，种公鸡的精液质量直接影响着种蛋的受精率、雏鸡质量和种鸡场的经济效益。然而种公鸡的精液质量在个体之间存在很大差异，据统计只有1/3～1/2（少数品种可达到2/3）的公鸡其精液质量是良好的，所以对精液质量进行检测，挑选优秀的种公鸡用于生产，是保证种蛋受精率、雏鸡质量的重要措施。对精液质量进行检测，淘汰精液质量不合格的鸡只，降低公母比，降低饲养成本，是保证种鸡场经济效益的必要措施。

目前，精液质量检测与选育工作在实际生产中并未广泛推广使用，究其原因主要有三点：一是精液质量检测程序复杂，检测设备要求高，检测速度慢、成本高，难以进行大规模的推广；二是精液质量选育项目和选育标准模糊不清，即使对精液质量进行检测，无法进行选育，失去了精液质量检测的意义；三是生产单位对精液质量检测和选育的意义认识不到位，忽略精液质量检测和选育工作。因此，需要建立精液质量检测的技术规范以及选育标准，实现精液质量检测和选育工作在生产中的应用与推广。

本文介绍一种操作简单、快速、准确的精液质量检测规范及选育标准，以供大家参考。

1 精液质量检测器材

1.1 精液质量检测与分析系统该系统根据种公鸡的精子特点及分析项目专门定制，精子全自动分析软件对精子图像数学形态化识别后，可自动对每一个精子分配一个唯一标号，同时采用绿色线对其运动轨迹进行精确跟踪识别，以取得比较精确的运动参数和统计学参数。检测项目包括精子密度、精子活力、精子运动轨迹、精子总数等，删去路径速度、曲线速度、直线速度，缩短了检测和分析的时间，提高了检测和分析效率。同时增加单位有效精子数、是否淘汰等项目，并可分品种、分品系设定精液质量选择标准，更加科学、严谨。

1.2 一次性使用精子计数板计数池深要求为60μm，保证形成单层、独立的精子细胞，不发生重叠、堆积等现象，使精子在同一焦面上清晰成像，同时又不影响精子水平方向的自由运动。一次性精子计数板相对于普通的载玻片和盖玻片，具有精子自动均衡吸入的功能,不会产生气泡，避免手工压片易产生气泡、厚度不一致的缺点，易于控制，使精子在同一平面上清晰成像，方便分析。

1.3 其他仪器1.0ml的标准离心管（根据日检测数量确定使用数量，管重量为0.9g）；14ml玻璃集精管；量程100μl移液器；最小刻度为0.01g的电子秤（称精液的重量，根据精液重量判断精液量的多少）。

2 精液质量检测项目

2.1 精液量用1.0ml离心管收集精液后，用最小刻度为0.01g的电子称进行称量，根据精液的重量推测精液量的多少。此方法比使用带有刻度的移液管进行测量更加简单，适合生产单位挑选种公鸡的精液量。不同品种和个体的公鸡，精液量有所差异，同时还受到采精人员、采集手法、公鸡使用频率等多种因素的影响。一般公鸡的射精量在0.4ml以上，精液量低于0.4ml的鸡只建议淘汰。

2.2 外观检查精液采集完成后，需要对精液的外观进行检查，并记录在相应的表格中。正常的精液应该是乳白色、不透明的乳状液体。若颜色出现异常，不再进行镜检。若精液呈黄褐色则是采精过程被粪便污染；精液呈粉红色，说明精液中混有血液，可能是采集手法、采精力度存在问题，采用过程中需要多加注意；精液中有白色的絮状物，在精液中混有尿酸盐；如连续3d出现此种情况，该种公鸡建议淘汰。

2.3 精子密度精子密度指每毫升精液中精子的数量。在检测中多采用粗略镜检法，根据显微镜下精子群体的形状，粗略判断精子密度的方法，此种方法并未对精子进行计数，故在数据统计中存在较大的误差，为了保证精子密度的准确性和可靠性，不建议采用此种方法，可采用精子计数法，此方法要求对精子进行编号和计数，准确性更高，采用精子质量检测和分析系统进行统计，方便快捷，可以进行推广使用。

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2.4 精子活力精子活力是指37℃环境下，前进运动精子数占总精子数的百分比。家禽精子和卵子的受精部位在输卵管壶腹部，即精子进入生殖道后仍需向受精部位运行，其动力一是依靠生殖道的收缩辅助，另一个是精子自身的活动力，同时也需要经过一个“获能”的变化，因此要完成上述全部过程，对输入母鸡生殖道内的精液中必须有一定比例生命力强的精子，生命力强的精子在显微镜下的表现是呈直线运动，故精子活力是鉴定精液质量最主要的指标之一。

2.5 单位有效精子数1ml精液中含有直线前进运动的精子数，是反映1ml的精液中含有具有授精能力的精子情况，是由精子密度与精子活力乘积直接反应，是鉴定精液质量的最直接指标之一。

3 精液质量检测流程

3.1 准备集精管和采精离心管将集精管和离心管用80℃的温水清洗三次，将水滴甩干，烤箱中用75℃的温度烘烤30min（集精管内壁不出现水气为止），待烤箱和玻璃管、离心管冷却后，将集精管和离心管放在密闭良好的收纳箱中待用。

3.2 采集精液采集精液前，将2支离心管插入有编号的泡沫板中，并放在保温盒中；采集公鸡精液，将公鸡精液采集到离心管（重0.9g）中，封闭离心管，每只公鸡一个离心管，并按照鸡只编号进行编号，采集2只鸡放回到有保温盒装的泡沫板中，由专人送到检测室，检测室选择离鸡舍近的房间。编号一定要准确，不能出现混淆和错误。

3.3 配置稀释液用量程为10ml的移液器或带刻度的移液器将8ml的生理盐水放入集精管中。

3.4 稀释液预温将生理盐水放在水温为36.5℃的水浴锅中进行预温，采用生理盐水稀释，保证精子正常渗透压，保证精子活力。

3.5 稀释精液用量程为100μl的移液器吸取20μl的精液，移液器滴头深入稀释液中，缓慢注入，用密封塞盖住集精管，晃动6～8次摇匀。稀释倍数为1：400，稀释倍数过高，视野中精子数量少，不准确；稀释倍数低，视野中精子过多，不易读数。建议稀释倍数以视野中存在150～200个精子为宜。

3.6 提取精液用100μl的移液器吸取15μl精液滴入计数池中，滴入过程缓慢，保证精子充满整个计数池。

4 精液质量选育标准模型

在实验室检测中，多以精子密度、精子活力、精液量三个标准判断精液质量，但由于此方法选择标准多，在上千只种公鸡中（例如峪口禽业一个标准化小区饲养2160只公鸡，用以满足12.5万只母鸡的输精需求）挑选精液质量良好的公鸡，实属不易，故经过实验建立了精液质量选育标准模型。

4.1 精液量单只种公鸡射精量在0.4ml以上。

4.2 精液外观精液的颜色为乳白色，若出现非人为异常情况，对不合格的种公鸡进行淘汰。

4.3 单位有效精子数选择单位有效精子数在21.5亿/ml的种公鸡留作种用。

5 注意事项

5.1 时间要求精液从采集到检测完成，时间不得超过10min，超过10min后精液质量下降较快。

5.2 温度要求精液采集到送达的过程，需要对精液进行保温处理，尤其是在外界温度低于25℃时，需要进行水浴保温，并将添加精液的精子计数板在恒温板上放置备用。

5.3 显微镜倍数选择精液与生理盐水按照1：400倍稀释时，选择20倍的低倍镜进行检测，成像清楚完整。

5.4 过程严谨精液从采集到检测要严格保持无菌操作，所用容器使用高温灭菌，不得使用消毒液进行消毒，以免影响精子活力。

5.5 检测时间检测时间一般选择在下午进行，保证种公鸡正常的采精反射，保证采精量和精液质量。

6 小结

种公鸡精液品质的好坏直接影响着种蛋的受精率，而受精率是种鸡场关键生产指标之一，直接影响着种鸡场的盈亏，因此控制好种公鸡的精液质量是任何一个种鸡场都必须重视的工作，而种公鸡精液质量检测是提高精液质量最直接有效的方法。种公鸡精液质量检测是一项操作简单、用工量少的常规技术，目前已在育种单位得到了推广和应用，也必将应用于蛋种鸡生产中。在人工授精技术中，不仅要考虑精液的遗传品质，同时也要考虑到精液的繁殖性状（包括精液量、精子密度、精子活力、输入母鸡体内的单位有效精子数），故对精液质量进行准确与可靠的检测，需要规范的检测技术，同时加大对精液质量检测和选育过程的监控力度，保证精液质量检测和选育过程的有效进行。

S831.2

C

1673-1085（2016）03-0021-03

2016-02-23