应用乳酸诺氟沙星治疗鸡大肠杆菌病

王彩先 刘华栋 詹丽娥 陆冰洋 唐娟 李婷婷 丁树荣

摘要：本研究目的是通过乳酸诺氟沙星治疗鸡大肠杆菌病，总结出其对鸡大肠杆菌病的效果以及药物使用的剂量。从太原地区某鸡场分离到一株大肠杆菌，使用乳酸诺氟沙星、氯霉素、卡那霉素、庆大霉素、红霉素等药物对其做药敏实验，检测出乳酸诺氟沙星对鸡源大肠杆菌具有高敏感性。使用试管法测定其对鸡大肠杆菌的最低抑菌浓度，结果表明乳酸诺氟沙星对鸡大肠杆菌的最低抑菌浓度为0.24？g/mL。最后通过治疗实验对180只无大肠杆菌病的鸡做攻毒和治疗实验，表明不同剂量的药物治疗组鸡的死亡率明显低于感染不给药组。通过本实验证明乳酸诺氟沙星用于治疗鸡大肠杆菌病具备高效低毒特点，为鸡大肠杆菌病的临床用药提供参考。

关键词：乳酸诺氟沙星；大肠杆菌；药敏实验；抑菌浓度

诺氟沙星属于喹诺酮类第三代产品，在第二代的毗呢酸的基础上，引入F原子，使抗菌范围扩大，抗菌活性显著增强，所以第三代称为氟咬诺酮类，是于1978年日本杏林制药公司首次报道（AM-715，MK-366）。由于其不仅具有抗菌谱广、杀菌活性强、生物利用度高等优点，尤其是对革兰氏阴性菌的抑菌作用明显优于第一、二代喹诺酮。而且该药既能口服饮水，又能静脉注射和肌肉注射给药。所以自该药产生以来，在我国乃至世界临床医学上已广泛应用，疗效满意，无明显的不良反应。在兽医临床上也得到广泛的应用。

乳酸诺氟沙星是乳酸与诺氟沙星结合生成的水溶性诺氟沙星乳酸盐。在水中的溶解度比诺氟沙星提高1200倍，对机体组织刺激性小，使体内生物活性物质提高2-3倍，因而易吸收，作用快。它能直接作用于细菌的核，抑制细菌DNA旋转酶，从而阻断DNA复制，从细菌核的深处破坏细菌的代谢和增殖，因而能迅速把细菌杀死。乳酸诺氟沙星具有广谱、高效、低毒、价廉等优点。对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有较强的杀灭作用。对链球菌的作用是吡哌酸的60倍，对禽多杀性巴氏杆菌的作用与环丙沙星相当，对大肠杆菌和痢疾杆菌的作用超过氧氟沙星，是肠道感染的首选药。安全范围广，毒副作用极小，鸡的口服半致死量为3175mg/（kg·bw），是治疗量的300余倍。价格与同类产品相比，以注射剂为例，价格仅为乳酸氧氟沙星的1/8，为乳酸环丙沙星的1/12。

本实验选取乳酸诺氟沙星也是试图通过实验分析其对鸡大肠杆菌病的治疗效果。

1 材料和方法

1.1 药物

乳酸诺氟沙星注射液和乳酸诺氟沙星预混剂是由郑州瑞达制药有限公司生产，含量5mg/mL，包装5mL/瓶。药敏纸片购于北京天坛药物生物技术开发公司，共6种常见药物，分别是：乳酸诺氟沙星、氯霉素、卡那霉素、庆大霉素、红霉素、青霉素。诺氟沙星。大肠杆菌为太原地区某鸡场分离。麦康凯琼脂培养基购于中国广东环凯微生物科技公司。营养琼脂购于北京双旋微生物培养基制品厂。三糖铁琼脂购于杭州天和微生物试剂有限公司，营养肉汤购于杭州天和微生物试剂有限公司，血琼脂购于郑州安图绿科生物工程有限公司。

1.2 实验动物

20日龄的SPF鸡200只，购于北京梅里亚微通实验动物技术有限公司。

1.3 方法

1.3.1 药敏实验采用K-B试纸扩散法，挑取大肠杆菌单个菌落均匀涂布于营养琼脂平板，将含有抗生素的药敏纸片用烧灼灭菌的镊子分别贴于平板表面，纸片之间间隔24mm以上，37℃培养24h后观察结果，测量药敏纸片抑菌圈的直径，参照CLSI手册中的标准作出判断。

1.3.2 乳酸诺氟沙星最低抑菌浓度测定采用试管法，取无菌试管15支，第一试管中加入肉汤培养基0.9mL，其余14支试管各加入0.5mL。吸取5mg/mL乳酸诺氟沙星注射液0.1mL加入第1管中，充分混匀后吸出0.5mL移人第2管中，混匀后再由第2管移出0.5mL到第3管中，依次到第14管，弃去0.5mL。第15管作为对照。然后向各管中加入菌液0.05mL，置37℃恒温培养24h观察结果。兀细菌生长的药物最高稀释管即为该菌对药物的最低抑菌浓度。

1.3.3 乳酸诺氟沙星对鸡大肠杆菌病的治疗实验将购买的SPF鸡随机分成6组，每组30只，分组情况如表1。试验开始将鸡气囊接种本次分离到的大肠杆菌，每只鸡0.5mL，72h后给各治疗组的鸡在饮水中分别饮用含有相应剂量的乳酸诺氟沙星和诺氟沙星，1次ld，连用Sd。记录试验鸡的临床症状和死亡情况，死亡鸡进行剖检，观察其变化。

2 结果

2.1 药敏试验结果

乳酸诺氟沙星31.3mm、氯霉素28.2mm、卡那霉素26.2mm、庆大霉素17.4mm、红霉素11.1mm、青霉素8.0mm。结果表明大肠杆菌分离株对乳酸诺氟沙星最敏感。

2.2 乳酸诺氟沙星最低抑菌浓度测定结果

经实验结果显示，第12支试管兀细菌生长，表明乳酸诺氟沙星对大肠杆菌对最低抑菌浓度为0.24μg/mL。

2.3 乳酸诺氟沙星对鸡人肠杆菌治疗结果治疗结果如表2。

由表的结果可以看出，治疗组鸡的死亡率明显低于感染后不给药组。高、中剂量组的治疗效果明显优于低剂量的乳酸诺氟沙星和对照药物诺氟沙星。

3 讨论

目前喹诺酮类药物常用于治疗革兰氏阴性菌感染的疾病，特别是第三代喹诺酮类如诺氟沙星、氧氟沙星等药物使用更为常见，尤其是在对大肠杆菌病的治疗上，使用诺氟沙星更为常见，但其成品药物多为其酸性盐，如盐酸诺氟沙星、乳酸诺氟沙星等。

本试验通过使用乳酸诺氟沙星对大肠杆菌病鸡进行治疗，可以看出在高剂量治疗组[1.2g/（kg·bw）]时其对人工致病的大肠杆菌病鸡的治愈率可以达到100%，中剂量治疗组[0.8g/（kg·bw）]也可以达到95%的治愈率，这明显优于使用诺氟沙星治疗的84.2%的治愈率。表明乳酸诺氟沙星对本试验分离到的鸡大肠杆菌对抗菌活性要优于诺氟沙星。姜中其等的研究认为3种诺氟沙星盐（盐酸诺氟沙星、烟酸诺氟沙星、乳酸诺氟沙星）对大肠杆菌、沙门氏菌的抗菌活性差异不大，和诺氟沙星差异也不大。陈志宝等也通过试验得出相同的结论。这与本试验结果不一致，有可能是本次的分离株存在变异的原因。

由于大肠杆菌很容易产生耐药株，因此在养殖过程中应该注意药物的轮换和交替使用。