袁志芸青海省海南州畜牧兽医工作站 813000
一例牛伪狂犬病和巴氏杆菌混合感染的诊治
袁志芸
青海省海南州畜牧兽医工作站813000
牛伪狂犬病是由猪疱疹病毒Ⅰ型引起的传染病,虽然呈散发流行,但是由于目前没有特效治疗方法,病死率几乎为100%,给养牛业造成很大的经济损失,所以加强对牛伪狂犬病的防制尤为重要[1-2]。牛巴氏杆菌病又叫牛出血性败血症,是由多杀性巴氏杆菌引起的一种急性、热性传染病。该菌常在健康牛的上呼吸道中存在,以败血症和组织器官的出血性炎症为特征,表现为患畜高烧、肺炎、急性胃肠炎及内脏器官广泛出血。牛巴氏杆菌病一般呈散发性流行,一年四季均可发病,潜伏期短,传播迅速,致死率高。当牛群受应激等因素刺激导致免疫力降低时可发生内源性感染,造成重大的经济损失。
2015年3月下旬某牛场母牛精神沉郁,食欲不振,鼻镜干燥,发病初期体温升高达41~42℃,但是温度很快降至常温或更低。病牛摩擦鼻镜或面部,不断用蹄子搔痒,或者在地面上摩擦肛门或阴户,出现犬坐姿势,出现伪狂犬病毒特有的“奇痒”症状。病牛流涎,唾液增多,流脓性鼻液,咳嗽,呼吸困难。患牛出现腹泻、呕吐,排粥状稀粪,个别可见便中带有血丝。个别病牛神经系统紊乱,表现如磨齿、眼球震颤、四肢划动和后足踏地等神经症状。单纯注射链霉素、土霉素和安乃近后治疗无效,发病3天后出现死亡。
剖检死亡的病牛,主要见胃内充满食糜,肠道鼓气;肝脏肿大,有少量白色坏死灶和出血点;双侧肺发生肉变,质地坚硬,胸腔内有大量渗出液,浆膜出血,扁桃体水肿充血,喉头黏膜充血、水肿;小肠黏膜充血,肠壁变薄、水肿;脑膜表面充血、出血,并见有少量脑脊液渗出。
(1)细菌的分离鉴定。无菌采集部分病死牛的肝脏和肺脏组织,涂片后分别进行革兰氏、碱性美兰和瑞氏染色,然后镜检。可见革兰氏阴性短小杆菌,美蓝和瑞氏染色均见两极浓染的短杆菌,无鞭毛,也不形成芽孢。病料在血液琼脂培养基上培养24小时后长出淡灰白色、表面光滑湿润、露珠样的小菌落,无溶血现象。而在麦康凯培养基上没有细菌生长。
(2)细菌的生化鉴定。本实验分离的细菌接种于生化反应管可以发酵葡萄糖、甘露醇和蔗糖,产酸不产气,乳糖、枸橼酸、麦芽糖发酵试验、尿素酶、VP试验和甲基红试验均为阴性,可形成靛基质,氧化酶试验呈阳性,液化明胶,能产生硫化氢。根据其生化特性,可以确定细菌为巴氏杆菌。
(1)病毒的分离。取处理过的病料滤液0.5mL接种于处于对数生长期的单层PK细胞,培养48小时后观察细胞病变,发现部分细胞圆缩、脱落,有些细胞融合形成全胞体,呈典型的细胞病变。对照组仍呈均一的单层细胞。
(2)乳胶凝集试验。待检牛血清经华中农业大学动物疫病检测中心用伪狂犬病乳胶凝集诊断试剂盒检测,牛待检血清与乳胶抗原反应产生颗粒状,凝集聚于边缘,液体呈明显凝集反应,结果为阳性(++),对照为阴性。
根据实验室检查结果,结合临床症状和病理剖检变化及动物接种回归实验,确诊此疫病为牛伪狂犬病与多杀性巴氏杆菌病混合感染,及时对养牛场该疾病进行综合防控。预防免疫和早期鉴别诊断是有效防制牛伪狂犬病的关键。
(1)治疗。对发病牛用病毒灵、氟苯尼考等抗病毒和抗感染药治疗,同时给予5%葡萄糖、氟苯尼考和黄芪多糖饮水,配合复方青霉素和硫酸庆大霉素肌注进行抗感染治疗,连用5~7天。及时隔离病牛,同时圈舍和环境用2%的NaOH全面消毒,用1%百毒杀喷雾消毒。及时处理死亡的病牛,对牛群进行强制性紧急免疫接种,用伪狂犬病活疫苗对健康羊进行免疫。
(2)防控。PRV属于高度潜伏感染的病毒,可引起持续性感染,牛猪混养是引起牛伪狂犬病发生的原因之一。防止牛伪狂犬病的发生和流行,必须先净化猪的伪狂犬病。因此养殖场要加强饲养管理,尽量坚持自繁自养,对新引进的牛只严格检疫,防止带入伪狂犬病毒。对牛场圈舍做好卫生消毒工作,要用合适的消毒液定期严格消毒,对同圈的牛和与猪混牧的牛进行伪狂犬病的免疫注射工作,并禁止猫和狗进入牛场,避免带入传染源;一旦发病,必须对患畜进行扑杀隔离,严格无害化处理,防止疫情扩散,尽可能把损失降至最小。
[1]殷震,李景华.动物病毒学[M].第2版.北京:科学出版社,1997:329-340.
[2]郭起绣,沈艳丽,李桂兰.牛、羊伪狂犬病的血清学调查[J].上海畜牧兽医通讯,2008(3)::34.