鼻息肉组织中白细胞介素17和血管内皮生长因子的表达及其相关性

王弦，赵大劲，齐保健

(首都医科大学石景山教学医院 北京市石景山医院耳鼻喉科，北京 100043)

鼻息肉组织中白细胞介素17和血管内皮生长因子的表达及其相关性

王弦，赵大劲，齐保健

(首都医科大学石景山教学医院 北京市石景山医院耳鼻喉科，北京 100043)

目的 研究鼻息肉组织中白细胞介素17(IL-17)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达，并探讨其相关性。方法选取2015年2月至2016年2月在我院耳鼻喉科接受鼻内镜手术治疗的65例慢性鼻-鼻窦炎患者，其中A组(伴鼻息肉者)33例，B组(不伴鼻息肉者)32例；另选同期在医院通过鼻内镜手术治疗的30例鼻中隔偏曲者作为C组(对照组)，对比各组IL-17及VEFG的阳性表达率及表达水平，分析IL-17与VEGF表达的相关性。结果A组和B组患者的IL-17阳性率分别为93.94%、75.00%，VEGF阳性率分别为84.85%、62.50%，均明显高于C组的3.33%和6.67%，且A组患者的IL-17阳性率和VEGF阳性率均明显高于B组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；A组和B组患者的IL-17表达水平分别为(35.29±4.17)个/LP、(30.14±2.12)个/LP，VEGF的表达水平分别为(29.33±3.65)个/LP、(20.18±2.06)个/LP，均明显高于C组的(8.16±1.16)个/LP，(10.22±1.25)个/LP，且A组的IL-17及VEGF的表达水平均明显高于B组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；Pearson法分析显示，IL-17与VEGF的表达呈正相关(r=0.784，P= 0.629＜0.05)。结论IL-17与VEGF在鼻息肉组织的表达显著升高，且二者之间的表达呈正相关。因此，IL-17与VEGF可能共同参与了鼻息肉症状的形成与发展，值得临床重视。

鼻息肉组织；白细胞介素17；血管内皮生长因子；表达

鼻息肉是发生在上呼吸道内的一类慢性炎性疾病，其常与慢性鼻-鼻窦炎共同发作，对患者的呼吸运动存在不良影响。鼻息肉的动物模型表明，在鼻息肉组织的生长过程当中，相关基质存在大量的血管生成，并包含血浆渗漏，其对鼻息肉的形成具有重要作用[1]。白细胞介素-17(interleukin 17，IL-17)是重要的炎症性细胞因子，而血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)则是血管通透因子。IL-17与VEGF均与鼻腔内炎症病变有关，但关于二者在鼻息肉方面的综合研究较少[2-3]。鉴于此，本文通过分析鼻息肉组织内IL-17以及VEGF的表达，研究二者的相关性，旨在更好地辅助临床治疗。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年2月至2016年2月在我院接受鼻内镜手术治疗的65例慢性鼻-鼻窦炎患者，其中伴鼻息肉者33例(A组)，不伴鼻息肉者32例(B组)。纳入标准：(1)符合慢性鼻-鼻窦炎的相关诊断标准[4-5]；(2)治疗前的1个月内未实施激素治疗与抗组胺类药物治疗；(3)经术后病理学确诊。排除标准：(1)变应性鼻炎；(2)支气管哮喘；(3)阿司匹林不耐受者；(4)其他种类的严重系统性疾病者；(5)鼻内真菌感染者。A组患者中男性19例，女性14例；年龄18～63岁，平均(42.67±1.12)岁。B组患者中，男性20例，女性12例；年龄20～65岁，平均(43.08±0.87)岁。另选同期在我院通过鼻内镜手术治疗的30例鼻中隔偏曲者作为C组，其中男性20例，女性10例；年龄21～65岁，平均(42.88±1.25)岁。所有患者均在术中取其较窄侧的代偿性肥大下鼻甲黏膜作为标本。各组患者的基线资料比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法 实验所用试剂中，兔抗人IL-17单克隆抗体，兔抗人VEGF单克隆抗体，SP试剂盒，以及DAB显色试剂盒产自北京的博奥森公司。选取SP法针对IL-17以及VEGF实施免疫组化染色，具体步骤如下：首先将固定标本以常规方式制作成为石蜡块，需染色时再按照厚度5 μm标准进行连续切片。把已切好石蜡切片通过防脱片形式载玻片实施捞片，并放置在烤箱中，将烤箱设置为60℃、30 min，以便切片能够紧紧粘附。通过3%H2O2对内源性酶进行灭活，持续5～10 min，进而使得石蜡切片完成常规性脱蜡至水。应用枸缘酸盐类型缓冲液于微波炉内给予抗原修复，其具体免疫组化型染色方式，需详细参考SP试剂盒内产品说明依次按步骤进行。通过显微镜观察判断阳性细胞，其中能够在背景中明确表现为特异性质的棕黄色以及棕褐色类型颗粒均可判定为阳性，而经对比无显著特异性着色者则为阴性。将各玻片置于低倍镜视野，按照双盲法进行选择，选出10个阳性数量较多者给予详细计数，并分别计算出其阳性细胞个数在总细胞个数中所占百分比，算出平均值，并进行积分评价。

1.3 观察指标 比较各组IL-17及VEFG的阳性表达率及表达水平，分析IL-17与VEGF表达的相关性。

1.4 统计学方法 应用SPSS20.0统计软件进行数据分析，计数资料比较采用χ2检验，计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，相关性应用Pearson法进行评价，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组IL-17及VEFG的阳性表达率比较 A组和B组患者的IL-17阳性率及VEGF阳性率均明显高于C组，且A组的IL-17阳性率及VEGF阳性率均明显高于B组，差异均有统计学意义(χ2=51.615、38.508、33.049、21.085、4.477、4.201，均P＜0.05)，见表1、图1。

表1 各组IL-17及VEFG的阳性表达率比较[例（%）]

图1 IL-17及VEGF在各组中的表达(免疫组化染色，×400倍)

2.2 各组IL-17及VEGF的表达水平比较 A组和B组患者的IL-17及VEGF的表达水平均明显高于C组，且A组的IL-17及VEGF的表达水平均明显高于B组，差异有统计学意义(t=34.422、27.244、50.166、22.827、6.246、12.394，均P＜0.05)，见表2。

表2 各组IL-17及VEGF的表达水平比较(±s)

表2 各组IL-17及VEGF的表达水平比较(±s)

注：与B组比较，aP＜0.05；与C组比较，bP＜0.05。

组别A组B组C组F值P值例数33 32 30 IL-17(个/LP) 35.29±4.17ab30.14±2.12b8.16±1.16 3.984 0.002 VEGF(个/LP) 29.33±3.65ab20.18±2.06b10.22±1.25 3.823 0.014

2.3 IL-17与VEGF表达的相关性 根据Pearson法分析IL-17与VEGF表达的相关性，A组VEGF和IL-17之间呈正相关(r=0.784，P=0.000)，B组VEGF和IL-17之间呈相关(r=0.629，P=0.001)。

3 讨 论

临床上，鼻息肉作为耳鼻喉科十分常见的一类疾病，其在成年人群体中的发病率较高，对患者的正常呼吸具有较大影响。手术疗法是常见的临床治疗方案，但部分患者在术后仍会复发，进而影响其生活质量。当前对于鼻息肉的发病机制仍未完全阐明，国外部分报道指出，鼻息肉的特征主要表现在上皮增生和间质水肿，以及血管增生与扩张等方面，还可合并多类炎性细胞的浸润[6-7]。因此，分析炎症细胞因子以及VEGF在鼻息肉组织中的表达，对于防治鼻息肉具有重要的意义。

本研究结果显示，A组和B组IL-17及VEGF的阳性率及表达水平均明显高于C组，且A组的IL-17及VEGF阳性率及表达水平均明显高于B组，这提示随着患者症状程度的加重，IL-17与VEGF均呈现出明显的表达上调。且进一步根据Pearson法分析IL-17与VEGF表达的相关性可知，二者之间呈正相关联系。分析原因，笔者认为这可能是因为IL-17作为前炎症细胞因子，其可诱导机体内细胞形成大量的促炎性因子，例如环氧化酶-2和细胞间粘附分子-1等。IL-17与相关受体结合之后，调节了促炎症细胞因子的活性，同时参与到鼻息肉的结构重塑，进而在鼻息肉的产生与发展中发挥作用[8-9]。VEGF是一种血管通透因子，其可结合血管内皮细胞中的特异性受体FLT及FLK/KDR，从而刺激内皮细胞不断地分裂、增殖与移动，进而诱导血管生成，其在炎症和创伤愈合的病理过程中具有重要作用[10-11]。在鼻息肉的形成过程中，VEGF可能通过促使鼻黏膜血管的通透性变大与血浆渗出变多，加重鼻黏膜水肿，加速血管增生，通过IL-17对鼻息肉结构的重塑作用，最终促进了鼻息肉的发生与发展。Liu等[12]也报道证实，鼻息肉的形成是多因素和多步骤的过程，其中始动因素是患者的鼻黏膜损伤，而炎性细胞因子间的平衡紊乱则可能是一种诱导机制，通过一系列生化反应致使患者的纤维组织疝出，并经过上皮再生和间质水肿等诸多病理过程，最终引起鼻息肉。此外，王悦等[13]的报道也有类似的结论可加以证实。

综上所述，IL-17与VEGF在鼻息肉组织的表达显著升高，且两者之间的表达呈正相关。因此，IL-17与VEGF可能共同参与了鼻息肉症状的形成与发展，值得临床重视。

[1]柳佳丽,罗英,万俊,等.白细胞介素-9在慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉中的表达及意义[J].实用医学杂志,2014,30(15):2515-2516.

[2]刘屹,刘领波,张淑芳,等.血管内皮生长因子在初发和复发鼻息肉中的表达[J].山西医药杂志,2013,42(9):983-985.

[3]宋倩,王建亭.慢性鼻窦炎伴鼻息肉合并哮喘患者FeNO与IL-17表达和肺功能的相关性[J].山西医科大学学报,2014,45(11): 1043-1045.

[4]Pan B,Che D,Cao J,et al.Interleukin-17 levels correlate with poor prognosis and vascular endothelial growth factor concentration in the serum of patients with non-small cell lung cancer[J].Biomarkers, 2015,20(4):232-239.

[5]丁国臣,曹志伟,王亚辉,等.IL-23/IL-17轴在慢性鼻-鼻窦炎鼻息肉中的表达及意义[J].武警医学,2013,24(7):557-560.

[6]董沙沙,李广伦,杨颉.多发性骨髓瘤患者血清血管内皮生长因子和白介素-17水平变化的临床意义[J].中国实验血液学杂志, 2012,20(2):344-347.

[7]刘楠,刘达,刘领波,等.白细胞介素17与血管内皮生长因子在鼻息肉组织中的表达及相关性分析[J].中国耳鼻咽喉头颈外科, 2015,22(10):523-525.

[8]Park SJ,Pai KS,Kim JH,et al.Could increased vascular endothelial growth factor induced by interleukin 17 be the cause of posterior reversible encephalopathy syndrome in systemic lupus erythematosus [J].J Rheumatol,2012,39(4):870-872.

[9]刘屹,赵勇,靳元嵘,等.VEGF、GM-CSF在初发和复发性鼻息肉中表达的关系[J].河北医药,2014,36(9):1375-1376.

[10]Li FJ,Cai ZJ,Yang F,et al.Th17 expression and IL-17 levels in laryngeal squamous cell carcinoma patients[J].Acta Otolaryngol, 2016,136(5):484-490.

[11]王世飞,杨盈坡,蒋敏,等.血管内皮生长因子在复发性鼻息肉手术干预前后动态检测的临床意义[J].中国实用医刊,2014,41(5):1-3.

[12]Liu QL,Huang L,Zhao QJ,et al.Relationship between serum interleukin-17 level and inflammatory bowel disease[J].J Biol Regul HomeostAgents,2016,30(1):181-188.

[13]王悦,马永明,濮晓萍,等.鼻息肉患者外周血Th17细胞的表达及意义[J].海南医学,2015,26(15):2231-2233.

Expression and correlation analysis of interleukin 17 and vascular endothelial growth factor in nasal polyps.

WANG Xian,ZHAO Da-jing,QI Bao-jian.Department of ENT,the Beijing Shijingshan Hospital,Shijingshan Teaching Hospital of Capital Medical University,Beijing 100043,CHINA

Objective To study the expression of interleukin 17(IL-17)and vascular endothelial growth factor (VEGF)in nasal polyps,and explore their correlation.MethodsFrom February 2015 to February 2016,a total of 65 patients with chronic sinusitis and nasal sinusitis,who received nasal endoscopic surgery in Department of ENT of our hospital were selected and divided into A group(with nasal polyp,n=33)and B group(without nasal polyps,n=32).At the same time,30 cases of patients with nasal septum deviation underwent nasal endoscopic surgery were chosen as C group(control group).The positive expression rate and expression level of IL-17 and VEFG in the three groups were compared,and the correlation between the expression of IL-17 and VEGF was analyzed.ResultsThe positive rate of IL-17 and VEGF in A group(93.94%,84.85%,respectively)and B group(75.00%,62.50%)were significantly higher than those of C group(3.33%,6.67%,respectively),P＜0.05.Moreover,the positive rate of IL-17 and VEGF in A group was significantly higher than those in B group(P＜0.05).The expression levels of IL-17 and VEGF were(35.29±4.17)/LP, (29.33±3.65)/LP in A group and(30.14±2.12)/LP,(20.18±2.06)/LP in B group,which were significantly higher than those in C group of(8.16±1.16)/LP,(10.22±1.25)/LP.The expression levels of IL-17 and VEGF in A group were significantly higher than those in B group(P＜0.05).The correlation analysis of Pearson showed that there was a positive correlation between the two factors(r=0.784,0.629;P＜0.05).ConclusionThe expressions of IL-17 and VEGF significantly increase in nasal polyps,and there is a positive correlation between the two factors.Therefore,IL-17 and VEGF may be involved in the formation and development of nasal polyps,which is worthy of clinical attention.

Nasal polyps tissue;Interleukin 17(IL-17);Vascular endothelial growth factor(VEGF);Expression

R765.25

A

1003—6350（2016）22—3669—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.22.020

2016-04-11)

王弦。E-mail：wangxian036928@sina.com