羊痘诊断及防治措施

郑德彪　金嘉旻　施铭煜　韩奇宏　陆宇超　毛爱民

(1.无锡市滨湖区胡埭街道畜牧兽医站,江苏无锡 214021; 2.无锡市动物疫病预防控制中心,江苏无锡 214021; 3.无锡市惠山区堰桥街道兽医站,江苏无锡 214021)

羊痘诊断及防治措施

郑德彪1金嘉旻2施铭煜3韩奇宏2陆宇超2毛爱民2

(1.无锡市滨湖区胡埭街道畜牧兽医站,江苏无锡 214021; 2.无锡市动物疫病预防控制中心,江苏无锡 214021; 3.无锡市惠山区堰桥街道兽医站,江苏无锡 214021)

羊痘是由羊痘病毒（Capripoxviurs，CPV）感染山羊和绵羊而引起的一种热性、急性、接触性传染病，患畜以发热、全身性起痘为典型特征。OIE将该病列为A类动物传染病，我国也将其列为Ⅰ 类动物疫病。本文从羊痘病原及流行概况、症状与病变特征、诊断方法、疫苗研究概况等几个方面阐述了羊痘的防治技术研究进展，并提出羊痘预防措施和治疗措施，对控制羊痘的发生和流行具有重要的参考意义。

羊痘 疫苗研究 诊断方法 预防措施

羊痘（Sheeppox and goatpox，SGP）又称绵羊痘或山羊痘，是由羊痘病毒属（Capripoxvirus，CPV）的绵羊痘病毒（Sheeppoxvirus，SPPV）或山羊痘病毒（Goatpox virus，GTPV）引起的羊的一种急性、热性、接触性传染病。其主要表现为发热、无毛或少毛的皮肤和黏膜上出现丘疹和疱疹为特征。典型病例初期为痘疹，最后干结脱落而痊愈，人也可偶感山羊痘[1]，是所有动物痘病中最为严重的一种，有较高的死亡率，能造成巨大的经济损失。有该病的国家和地区的易感动物及其相关产品被世界各国列为严格限制进出的对象，严重影响国际贸易和养羊业的发展。世界上许多地区有该病发生的报道，如印度、尼日利亚、希腊等。我国的江苏、广东、贵州、山东、浙江、广西、甘肃、黑龙江、福建等地均有该病发生，有的地区呈暴发流行。羊痘病毒（SGPV）还可作为生物武器，成为世界恐怖分子威胁世界和平的有力手段，被美国疾病控制中心（CDC）划归到Ⅱ类危险病毒。世界动物卫生组织（OIE）将该病列为法定通报传染病，我国将其列为Ⅰ类动物疾病[2]。

1 羊痘简介

1.1 羊痘病原

羊痘病毒是痘病毒科、脊索动物痘病毒亚科、羊痘病毒属。羊痘病毒属包括山羊痘病毒（GTPV）、绵羊痘病毒（SP PV）和牛皮肤疙瘩病病毒（LSDV）；羊痘病毒基因组为线性双股DNA，全长约为150kb，共有147个开放阅读框，是唯一在细胞质内复制的有囊膜的双股DNA病毒。

1.2 易感动物

羊痘病毒可以感染各种年龄、性别、品种的羊，但羔羊、泌乳羊及老年羊更易感且症状严重。另外山羊痘病毒也能引起野兔和驯鹿发病。

1.3 传播方式

主要通过呼吸道传播，也可经损伤的皮肤、黏膜侵入机体，经常是由于感染动物与易感动物直接的、亲密的接触后发生；试验证明通过昆虫的叮咬可传播山羊痘。另外，通过皮内、静脉以及皮下接种，可以引起易感动物的感染。

2 羊痘的症状与病变特征

2.1 主要症状

潜伏期一般为6～8d，长的达16d；体温骤升至41℃～42℃，精神不振，食欲减退，拱腰发抖[1]；典型的临床病变为皮肤黏膜出现痘疹。病羊全身均可能发生痘疹，特别是在口唇、尾根、乳房等少毛或无毛的部位最易发现。痘疹开始为红斑，1～2d后形成突出于皮肤表面的痘疹，随后痘疹逐渐扩大变成灰白色或淡红色的半球状的隆起结节，质地较硬。痘疹有两种变化，一种逐渐变为水疱，如无继发感染，则结痂脱落。如有继发感染，则形成脓疮。另一种直接结痂脱落，痂皮脱后流下星状疤痕；对于易感羊群，感染率为75%～100%，死亡率为10%～58%。

2.2 主要病理变化

全身皮肤痘疹是最为显著的临床剖检变化；呼吸系统：咽喉、气管、支气管和肺脏表面出现大小不一的痘斑，有时在咽喉、气管、可见痘斑破溃形成溃疡，而在肺脏可见有大片的肝变区，还可观察到紫红色或黄色圆形痘斑，直径0.3～0.5cm，心外膜有大头针大小的出血点和较大的出血斑。消化系统：唇、舌、瘤胃和皱胃黏膜上有大量白色的痘斑，质地坚硬。有时痘斑破溃形成溃疡，在痘疹集中部位皮下可见到不规整的斑点状出血或黄色胶冻样渗出物。真胃、十二指肠、回肠黏膜呈出血性炎症，肠系膜淋巴结水肿；全身淋巴结，特别是颌下淋巴结、肺门淋巴结高度肿胀，切面多汁，有时可见周边出血；肾脏有多发性灰白色结节出现。

3 羊痘诊断检测方法

3.1 临床诊断

典型的感染会引起牲畜明显的临床症状，根据这些特征可对羊痘病做出初步诊断。

3.2 病原诊断方法

3.2.1 电镜观察

采取病羊皮肤和黏膜的丘疹和水疱病料做成切片负染后直接在电镜观察病毒粒子是诊断羊痘的常用方法，但在发病区往往没有这样的设备，难以满足快速诊断的需要[3]。

3.2.2 病毒培养

病毒培养有较高的特异性，羊痘病毒可在牛、绵羊、山羊源的组织培养细胞上生长，原代或次代羔羊睾丸细胞和羔羊肾细胞最为敏感[4]。很多研究表明在不同地点和不同时间分离获得的羊痘病毒株，对各种细胞培养物的敏感性不尽一致。因此，在由病料初代分离羊痘病毒时，最好多用几种细胞培养物。羊痘病毒在细胞培养物中生长缓慢，病毒培养比较耗时、费力，不适合进行快速诊断。

3.3 血清学方法

3.3.1 传统血清学方法

有病毒中和试验（VNT）、荧光抗体试验（FAT）、琼脂扩散试验（AGID）、免疫电泳（IE）、对流免疫电泳（CIE）、反向被动血凝试验（RPHA）、乳胶凝集试验（LAT）、单向辐射状溶血试验（SRH）、单辐射免疫扩散和酶联免疫吸附试验（ELISA）等[ 5 - 6]。

3.3.2 ELISA方法

酶联免疫吸附试验（ELISA）因其操作便利、快速、敏感、特异性强，便于自动化，能检测群体特异性抗体而倍受青睐。目前国外已建立了许多种检测SGPV 抗原或抗体的ELISA 方法。

3.3.3 应用特异性重组蛋白建立的方法

P32 蛋白是SGPV 共有的特异性很强的具有免疫原性的结构蛋白，可用于诊断与预防，是目前羊痘研究领域的热点之一。研究结果表明，全长P32 蛋白可溶性最大，且在ELISA 中的反应性最好，但由于其跨膜区对细胞的毒性，使其表达量低，很难纯化到重组P32 蛋白[7]。国内外研究者多以截去跨膜区的P32 基因为研究对象，研究其重组蛋白的用途。虽然以重组P32 为基础建立的ELISA 方法具有高度的特异性，与正痘病毒和副痘病毒没有交叉反应，但由于在ELISA 中的反应性最好的全长P32 表达量低，因此其推广受限。

3.4 分子生物学方法

用PCR 方法可以简单、快速、特异地从组织培养上清液、活组织样品中检测出SGPV 的DNA 片段，还可以通过对PCR产物的酶切分析进行CPV 种的鉴定。

4 预防措施

4.1 饲养管理

羊圈内要经常清扫，定期消毒，通风良好，阳光充足，经常保持干燥。保证羊吃饱喝足。冬天注意防寒保暖，夏天防高温，消灭蚊蝇，为羊提供一个舒适的环境，提高抗病能力。

4.2 检疫

新引入的羊要隔离21d，经观察和检疫后证明完全健康的方可与原有的羊群混养，不从疫区购羊。

4.3 预防接种

羊痘鸡胚化弱毒疫苗：它对绵羊的毒力显著地减弱，并且保持了优良的免疫原性。在尾内面或腋下无毛部皮内接种0.5m1，接种后第4d部分羊就可以产生免疫力，至第6d可全部获得坚强免疫力。免疫期可持续1～1.5年。

羊痘组织细胞苗：对绵羊完全无害，注射动物不扩散本病，因产生免疫力快，可用于紧急接种，已广泛使用，免疫期＞1年。

4.4 加强消毒灭源

在发现羊群有症状病例和可疑病例时，应立即与健康羊群隔离，对圈舍和环境进行消毒，对健康羊群进行紧急免疫，对病死羊深埋或作其他无害化处理，严防病原扩散。

5 治疗措施

尚无特效药治疗，常采用对症治疗等综合性措施。对于口腔有病变的羊，应给予柔软饲料，饮用清洁水。为防止口腔黏膜继发感染，促进糜烂的愈合，可用1%的醋酸液、2%的硼酸液或1%的来苏水冲洗口腔。有溃疡时，可用1%的硫酸铜溶液、1%的明矾溶液或0.1%的高锰酸钾溶液冲洗。皮肤发生痘疹，局部可用0.1%的高锰酸钾溶液洗涤，擦干后抹紫药水或碘甘油等。恶性山羊痘采用新砷矾纳明治疗[8]。

康复羊血清治疗用康复羊血治疗可明显增强病羊的免疫力。治疗量：每只成年羊10～20m1，小羊5～10m1，皮下注射。发病早期治疗效果较好，若已进入脓疱期则加大剂量。另外，在进行对症治疗的同时，要适当使用青、链霉素等药物进行辅助治疗，以防继发感染。

[1] 路秀英，李占国，张云艳.羊痘的防控技术[J].中国畜牧兽医文摘，2013，29（8）：87-88.

[2] 王开功，虞天德，张大权，等.贵州省首次暴发山羊痘的诊断研究[J].动物医学进展，2003，24（4）：116 - 118.

[3] 陈轶霞.羊痘诊断技术进展[J].安徽农业科学，2008，36（34）：15008-15009.

[4] BABIUKS，PARKYNG，COPPSJ，et a1 .Evaluation of an ovine testis cell line（OA3 .Ts）for propagation of capripoxvirus isolates and development of animmunostainingtechnique for viral plaque visualization[J] .J Vet Diagn Invest，2007，19（5）：486- 491 .

[5] RAOT VS，NEGI BS，BANSAL MP.Use of purified soluble antigens of sheeppoxvirus inserodiagnoss[J] .IndianJournal of Animal Sciences，1997，（67）：642 -645 .

[6] RAO T V S，NEGI B S，BANSAL MP.Development and standardization of arapid diagnosis test for sheep pox[J] .IndianJ Comp Microbiol Immunol InfectDis，1997，18（1）：47 - 51 .

[7] 陈轶霞，郑亚东，窦永喜，等.羊痘病毒P32 蛋白基因的克隆与原核表达[J].动物医学进展，2007，28（1）：31- 34.

[8] 刘小芳，刘慧.羊痘的诊断和治疗技术[J].河南畜牧兽医，2010，31（6）：48-49.