金黄色葡萄球菌毒力基因检测及分子分型研究

王莹

【摘要】 目的 对金黄色葡萄球菌进行毒力基因检测以及分子分型情况的研究。方法 488株金黄色葡萄球菌作为研究对象， 采用琼脂稀释法作为测定苯唑西林以及头孢西丁对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）， 以聚合酶链式反应（PCR）方法进行葡萄球菌染色体mec盒子（SCCmec）分型以及多位点序列分型， 并以多重PCR方法检测31个常规的金黄色葡萄球菌毒力基因。结果 488株金黄色葡萄球菌中共检测出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）227株， 检出率达46.5%， 从分型上看， 其中SCCmecⅢ占比最多， 达81.5%， 其次是Ⅳ型， 占10.1%；另有261株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）， 其主要克隆型为CC1， 占34.1%， 有109株（41.8%）的MSSA其同时携带超过15个毒力基因， 明显要高于MRSA菌株（28.2%）。结论 本地区的MRSA流行率为46.5%， 相对于全国平均水平基本一致， 其中主要的流行克隆为SCCmecⅢ， 占81.5%， 而MSSA菌株其主要流行克隆为CC1， 占34.1%， 从毒力基因来看MSSA其毒力基因的检出率要明显高于MRSA， 这种情况提示相关的医疗卫生部门需要根据实际情况采取有效的措施控制各种病菌的传播。

【关键词】 金黄色葡萄球菌；毒力基因检测；分子分型研究

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.01.126

金黄色葡萄球菌是医院以及社区感染常见的致病病菌， 其广泛的存在于自然界中， 可以导致多种感染疾病， 严重威胁人们的生命健康安全[1]。并且金黄色葡萄球的临床重要性还由于其有着非常高的毒力以及快速发展的耐药性， 一旦没有将其控制住， 非常容易引起传播和流行， 我国作为抗生素使用的大国， 使得耐药的现象非常严重， 在各地区MRSA的检出率都相对较高。本文以488株金黄色葡萄球菌作为研究对象， 研究金黄色葡萄球菌的毒力基因以及分子分型情况， 为医疗部门采取必要的预防措施提供必要的研究理论依据， 具体的研究过程报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 取本中心2013～2015年分离的488株金黄色葡萄球菌作为研究对象， 确保每一株病菌样本不是同一患者相同部位的重复分离株， 标本包括痰标本254株， 占52.0%；分泌物标本97株， 占19.9%；血液标本64株， 占13.1%；脓液标本38株， 占7.8%；引流液标本11株， 占2.3%；腹水标本11株， 占2.3%；胸水标本8株， 占1.6%；脑脊液标本5株， 占1.0%。

1. 2 方法 抗菌药物敏感检测采用琼脂稀释法测定苯唑西林以及头孢西丁对金黄色葡萄球菌的MIC；基因组DNA提取， 按照革兰阳性菌DNA提取步骤提取。SCCmec分型检测：以PCR方法进行SCCmec分型以及多位点序列分型；毒力因子检测：并以多重PCR方法检测31个常规的金黄色葡萄球菌毒力基因[2]。

1. 3 统计学方法 采用SPSS21.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

488株金黄色葡萄球菌中共检测出MRSA 227株， 检出率46.5%。从分型上看， 其中SCCmecⅢ占比最多， 达81.5% （185/227）， 其次是Ⅳ型， 占10.1%（23/227）；另有261株MSSA， 其主要克隆型为CC1， 占34.1%（89/261）， 有109株（41.8%）的MSSA其同时携带超过15个毒力基因， 明显要高于MRSA菌株[28.2%（64/227）]， 差异有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在， 是人类的一种重要病原菌， 属于葡萄球菌属， 可引起多种严重感染， 由金黄色葡萄球菌引起的感染仅次于大肠杆菌居第二位[3]。金黄色葡萄球菌有着多重耐药性以及高致病性的特点， 随着抗生素的广泛使用， 使得其在高选择压力下出现大量的耐药菌， 尤其是对于MRSA来说， 对于多种抗生素呈现出耐药现象。另外， 金黄色葡萄球菌的致病性与其高毒性有着很大的关系， 这从金黄色葡萄球菌的常见的31个毒力基因， 菌株至少同时携带6个毒力基因就可以看出。

综上所述。经研究显示本地区的MRSA流行率46.5%， 相对于全国平均水平基本一致， 其中主要的流行克隆为SCCmecⅢ， 占81.5%， 而MSSA菌株其主要流行克隆为CC1， 占34.1%， 从毒力基因来看MSSA其毒力基因的检出率要明显高于MRSA， 这表明本地区存在耐药株的传播， 本地区部分医院消毒控制管理仍然存在不足， 因此需要加强消毒管理和培训， 定期及时加强空气消毒， 医护人员检查患者前后要严格洗手消毒， 加强医院环境、物体表面卫生清洁， 强调合理使用抗生素， 以这些综合措施达到有效控制医院感染环境因素。

参考文献

[1] 王新， 韦艺媛， 张静， 等. 乳房炎奶牛金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及PFGE分型研究. 畜牧兽医学报， 2011， 14（7）：974-980.

[2] 谭翰清， 林凤， 谭海芳， 等. 医院分离金黄色葡萄球菌的毒力基因和耐药基因的研究. 中国消毒学杂志， 2011， 12（6）：710-713， 716.

[3] 陈道利， 金东， 崔志刚， 等. 马鞍山市志贺菌福氏4c亚型毒力基因检测及分子分型研究. 中国人兽共患病学报， 2010， 18（9）： 851-855.

[收稿日期：2015-07-27]