范子玲,周玉龙,夏 成,吴 凌,舒 适,许楚楚,肖鑫焕,王 刚,白云龙(黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江 大庆 163319)
黑龙江省某猪场散发慢性猪瘟的诊断
范子玲,周玉龙,夏 成★,吴 凌,舒 适,许楚楚,肖鑫焕,王 刚,白云龙
(黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江 大庆 163319)
猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的一种急性或慢性、热性和高度接触性传染病。近年,由于普遍采取疫苗接种等预防措施,猪瘟流行形式发生了变化,呈散发性流行。2015年10月,黑龙江八一农垦大学兽医院接到来自大庆某猪场的3头发病猪,根据发病情况、临床检查、剖检病理变化及RT-PCR检测结果,最终确诊为慢性猪瘟。
慢性猪瘟;发病情况;临床检查;病理剖检变化;RT-PCR检测
猪瘟是一种高度接触性、传染性的病毒性疾病。猪是本病唯一的自然宿主,不同品种、年龄和性别的猪均可感染,患病和弱毒株感染的母猪,可经胎盘垂直感染胎儿[1]。该病一年四季均可发生,一般以春、秋较为严重;自然感染潜伏期为5~7 d,短的2 d,长的21 d[2]。在本病常发地区,猪群有一定的免疫性,发病率和病死率较低;在新疫区发病率和病死率在90%以上。本病呈世界性分布,由于危害程度高,对养猪业造成巨大经济损失,世界动物卫生组织(OIE)将本病列入A类16种法定传染病之一,并规定为国际重要检疫对象[3]。
根据临床症状的表现程度和持续时间,猪瘟可分为急性型、慢性型、温和型。急性型猪瘟,病猪症状很明显,病死率极高[4]。慢性型猪瘟临床症状:病猪体温升高不明显,病程长,可超过1个月,贫血,消瘦,常伏卧,行走无力,有时轻热,食欲不振,便秘和腹泻交替出现,有的患猪皮肤呈紫斑或出现死痂[5]。其剖检病理变化为出血和梗死变化不明显,但回肠末端、盲肠和结肠常有特征性坏死和纽扣状溃疡[6]。由于疫苗接种等预防措施的作用下,慢性型猪瘟发病率低,临床症状较轻,病程较长,不易诊断,易被忽视,会给养猪业带来很大的损失。因此,慢性猪瘟被列为养猪场亟需解决的重要疫病之一。本文现就某猪场散发的慢性猪瘟的诊断情况介绍如下。
黑龙江大庆地区某猪场饲养母猪135头、育肥猪400头,保育猪350头及未断奶仔猪共1 000多头,各个阶段的猪分舍饲养。该猪场有较规范性的免疫程序,母猪接种疫苗种类(猪瘟疫苗、伪狂犬疫苗、口蹄疫疫苗、细小病毒疫苗和水肿病疫苗等);仔猪接种疫苗种类及时间(猪瘟兔化弱毒疫苗,30 d左右;伪狂犬疫苗,50 d左右;口蹄疫疫苗,60 d左右)。此次发病猪为2头育肥猪和1头保育猪,2头育肥猪2015年10月8日发病,次日即死亡,1头保育猪送检当日(2015年10月9日)发病,未死亡。
2头育肥猪(编号1、2)在8日早上八时发现精神沉郁,行动缓慢,不进食,头部下垂,次日9时发现死亡。其中1号猪体表有广泛出血点(图1),尤其是腹下、耳根和四肢内侧等部位明显,腹部膨大,眼睑水肿(图2);2号猪腹部膨大,体表无其他异常。1头保育猪(编号3)送检当日早上发病,不能站立,呈游泳状,体表无其他异常。1头保育猪(编号3)送检当日早上发病,不能站立,呈游泳状,体表无其他异常。
图1 1号猪皮肤广泛出血点Fig.1 Widely hemorrhagic spot of the swine
图2 1号猪眼睑水肿Fig.2 Palpebral edema of the swine
1号猪:下颌淋巴结水肿、出血,喉头充血,脾出现黑色梗死灶,肝无异常,肺炎性水肿,肾无异常,膀胱黏膜出血,肠鼓气,回盲肠部有纽扣状的伪膜性坏死和溃疡(图3)。
图3 1号猪回盲肠部纽扣状Fig.3 Status marmoratus showing ileocecum of the swine mandibulares on the cross section of the lymphonodi
2号猪:喉头、下颌淋巴结水肿,下颌淋巴结大理石样出血(图4),喉头充血,腹腔积血水、纤维素性渗出,脾出血,肝边缘坏死,肺无异常,膀胱黏膜出血,肾有坏死灶、质软,胃黏膜出血,肠鼓气,肠黏膜出血、内容物呈番茄酱样,回盲肠部有纽扣状的伪膜性坏死和溃疡。
3号猪:下颌淋巴结水肿、出血不严重,喉头有出血点,脾肿大、出血、梗死(图5),肝坏死,肾盂出血(图6),肾发白、质软,胃黏膜溃疡,回盲肠部有纽扣状的伪膜性坏死和溃疡。
图4 2号猪下颌淋巴结切面大理石样Fig.4 Buttonhole lesion in
图5 3号猪脾肿大、出血、梗死Fig.5 Enlargement,hemorrhage and
图6 3号猪肾盂出血Fig.5 Hemorrhage in the pelvis of infarction on the spleen of the swine the swine
在无菌条件下(超净台),分别取3头猪的脾组织约1 g,用灭菌研磨器充分研磨,经处理后,提取猪瘟病毒RNA,合成cDNA,以此为模板进行PCR扩增,反应体系为25 μL,取PCR扩增产物进行电泳、照胶,目的片段为288 bp[7]。
图7 3头猪RT-PCR检测结果Fig.7 RT-PCR Detection results of three swine
由图7可见,用RT-PCR方法扩增出的3头猪病毒的目的片段都在288 bp左右,与预计的理论值相符,表明此3头猪病原为猪瘟病毒。
根据发病情况、临床症状、剖检病理变化及RTPCR检测结果可确诊3头猪患慢性猪瘟。
本猪场在猪30日龄时已接种过猪瘟兔化弱毒疫苗,仍有3头猪发病,说明绝大部分的猪获得了良好的免疫保护,达到了预防效果,但是应尽量杜绝免疫后还会发病的现象。经过调查,发现这3头猪发病应该与漏打或疫苗接种不规范所致的免疫剂量不足有关[8-9]。除此之外,造成免疫失败的原因还有很多:如疫苗选择不当,疫苗保存运输不当,免疫抑制剂的应用,免疫程序不合理,有免疫空档,母猪猪瘟病毒持续性感染,免疫猪出现免疫耐受等[10]。
通过病理剖检变化,观察到特征性病变,回盲肠部有纽扣状的伪膜性坏死和溃疡,已基本确认该病为慢性猪瘟,但是与问诊结果不相符:2头猪发病次日即死亡,从发病持续时间和死亡时间来看,该病发病急,不符合慢性猪瘟症状。后经过进一步询问,得知3头猪发病已有几天,怀疑是水肿病,就用治疗水肿病方法进行治疗,直到有2头病猪死亡才送检。由此看来,就可以完全确诊为慢性猪瘟。
猪瘟的诊断方法有很多,例如动物接种试验、免疫荧光抗体试验等[11],但这些诊断方法费时较长,不利于猪瘟的快速诊断及快速针对性防疫的实际需要,而RT-PCR诊断方法采取少量病料(实质脏器和体液等)即可对猪瘟进行快速诊断,且对所有类型的猪瘟都是一种有效的快速诊断方法[12]。因此,在本次病例中采用RT-PCR进行快速确诊。
通常猪场一旦发生猪瘟,需要采取的紧急防控措施有:①处理病死猪,深埋;②对未发病猪紧急接种猪瘟兔化弱毒疫苗,进行加强免疫[13];③认真消毒被污染地方,粪便堆积发酵、无害化处理;④平时做好疫病监测[14];⑤制定合理的免疫程序;⑥加强饲养管理。然而,由于本猪场散发了慢性猪瘟,提示猪场疫苗免疫还存在漏洞,患病的猪将成为传染源[15],对其他猪群构成危害,一旦疫区未患病猪免疫力降低,就会被感染而患病,这样就随时有暴发猪瘟的危险。因此,一般情况下对没有发病的同群猪常应用大剂量的疫苗,一方面是强烈刺激机体产生抗体;另一方面是疫苗抗原的占位作用,能阻止强毒对其他正常细胞和组织的侵袭和毒害;而且,疫苗抗原刺激机体产生干扰素,会抑制病毒的繁殖[16]。
综上所述,猪瘟的防控重点以预防为主,及时严格的接种疫苗可以降低发病率,减少损失。因此,应高度重视免疫监测,及时掌握猪群的整体免疫状态,制定出适于各自猪场的个性化免疫程序。
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The diagnosis of sporadic chronic swine fever in the pig farm of Heilongjiang province
Fan Ziling,Zhou Yulong,Xia Cheng*,Wu Ling,Shu Shi, Xu Chuchu,Xiao Xinhuan,Wang Gang,Bai Yunlong
(College of Animal Science and Veterinary Medicine,Heilongjiang Bayi Agricultural University,Heilongjiang Daqing 163319)
Classical swine fever is an acute or chronic,feverish and highly contagious disease of swine,caused by classical swine fever virus.In recent years,the prevalence of classical swine fever has shown sporadic due to widespread vaccination.In October 2015,the veterinary hospital of Heilongjiang Bayi Agricultural University treated three infected swine,according to the results of incidence,clinical examination,pathologic measurement and RT-PCR detection,the three swine were diagnosed as chronic swine fever.
Chronic swine fever;Incidence;Clinical examination;Pathological changes;RT-PCR detection
S858.28
B
1672-9692(2015)12-0043-04
2015-09-21
范子玲(1991-),女,在读硕士,研究方向为临床兽医学科研和实践。
夏成(1964-),男,博士,教授,主要研究方向为奶牛营养代谢病。