疑难单亲亲子鉴定1例



疑难单亲亲子鉴定1例

陈芳1，章红星1，陈建红1，马武军2

（1.浙江汉博司法鉴定中心，浙江杭州310000；2.台州市路桥区人民法院，浙江台州318050）

关键词：亲子鉴定；单亲；突变

1　案例

1.1简要案情

因申报户口需要，自称母亲的女子与孩子（女儿）来本中心要求进行亲子鉴定。采集指血备检。

1.2检验过程

1.2.1 DNA提取

采用常规Chelex-100法提取基因组DNA。采用GoldeneyeTM20A试剂盒［基点认知技术（北京）有限公司］、AGCU EX22试剂盒（无锡中德美联生物技术有限公司）及AGCU 21+1 STR荧光检测试剂盒（无锡中德美联生物技术有限公司），进行22个常染色体的39 个STR基因座的分型，采用Investigator Argus X-12试剂盒（德国QIAGEN公司）进行12个X-STR基因座的分型，采用MicroreaderTM19 X ID System试剂盒（苏州阅微基因技术有限公司）进行19个X-STR基因座的分型。扩增体系按试剂盒使用说明书要求完成。

1.2.2 STR分型

采用9700型PCR仪（美国AB公司）进行PCR扩增，使用3130XL型遗传分析仪（美国AB公司）进行毛细管电泳，使用GeneMapper ID v3.2.1软件处理电泳数据，实验过程采用相关操作手册进行。

1.3检验结果

本案例中先采用GoldeneyeTM20A试剂盒进行19个常染色体STR检验，发现Penta D、D8S1179基因座不符合孟德尔遗传规律，采用AGCU EX22试剂盒进行验证，相同基因座结果一致。随后采用AGCU 21+l试剂盒进行20个常染色体STR基因座的检验，未发现不符合遗传规律的基因座。进一步采用Investigator Argus X-12试剂盒进行12个X-STR基因座的分型，又发现DXS10101基因座不符合遗传规律，最后采用MicroreaderTM19 X ID System试剂盒进行19个XSTR基因座的分型，出现DXS981、DXS9902基因座不符合遗传规律。所有不符合遗传规律的基因座中除DXS10101基因座之外，其他基因座均表现为增加或减少一个重复单位的变化。

采用浙江地区人群调查数据计算亲权指数（paternity index，PI），39个常染色体STR基因座的累积亲权指数CPI为44.97。本案例检测使用的试剂盒间STR基因座有交叉，可以对一些基因座结果进行相互验证。检测的39个常染色体STR基因座分型结果（见表1）和X染色体X-STR分型结果（见表2）。根据常染色体STR分型结果，依据《亲权鉴定技术规范》判断标准，若0.0001＜CPI＜10000，则不排除亲权关系，依据此判断标准，此案例则不排除母亲与女儿之间亲生血缘关系的存在，结合X-STR分型结果，则可以排除母亲与女儿之间的亲生血缘关系。

表1　39个常染色体STR基因座分型结果与亲权指数

表2　27个X染色体X-STR基因座分型结果

2　讨论

目前，亲子鉴定广泛采用STR遗传标记，但是，STR基因座存在较高的突变率[1]，使得亲生父（母）亲与孩子之间会出现不符合遗传规律的现象[2]，不利于亲子鉴定结果的解释。日常检案中常出现1～2个遗传标记不符合遗传规律的情况，本案例在检测39个常染色体STR时出现2个基因座不符合遗传规律，增加检测27个X染色体STR基因座，又出现3个不符合遗传规律的基因座，最终排除存在亲子关系。

STR突变是逐步发生的，即每次突变只改变一个重复单位，两个或更多个重复单位的变化是在前一次突变基础上发生的，也就是多步突变是逐步形成的。而最终突变模式都是表现为增加或减少一个或几个重复单位。90%以上的突变为一步突变，即表现为STR突变均为增加或减少一个重复单位，二步突变者少于10%，更多步突变的比例则更少[3]。本案例中当事人告知因申报户口的需要而做亲子鉴定，且为母女关系的亲子鉴定，在检测19个常染色体STR时，有2个基因座不符合遗传规律，且均为一个重复单位的变化，初步考虑为突变所致。增加检测至39个STR基因座时，仍只有两个基因座不符合遗传规律。此时，如果不进一步增加检测其他遗传标记，结合案情，想当然的认为不符合遗传规律的基因座是由于基因突变导致的，容易给出不排除存在亲子关系的意见。

通过该案例，让我们体会到，因申报户口而做亲子鉴定，看似简单的鉴定需求，其实存在很大潜在风险。首先，在对鉴定方案的选择上，对于父母子均参加鉴定的案例，不同机构采取的处理方式不同，有的作为父母皆疑进行处理，有的当成两个二联体进行处理，也有些先把母亲与孩子当成二联体处理，再作为标准三联体进行处理。不同的处理方式，在系统效能上存在一定的差异。其次，在案件受理时，对一些因申报户口而做亲子鉴定的案例，充分了解被鉴定人的需求是必需的，但不可盲目相信当事人所述，切不可因其用于申报户口而降低判断标准，本案例就是一个很好的证明。单亲亲子鉴定中，遇到不符合遗传规律的情形，一定要增加检测足够多的遗传标记，且结合累积亲权指数进行判断[4]，方可下意见。此案中，如果盲目相信当事人因申报户口而做鉴定，潜意识里就会理所当然的认为是存在母女关系，对一些不具备多种遗传标记的鉴定机构，特别是对一些针对申报户口而不计算亲权指数的鉴定机构，容易给出不排除的结论，从而导致结果的误判。

此案例通过增加检测X-STR，联合常染色体STR结果，最终排除存在亲子关系。性染色体由于其自身特点，可以用于同一父系鉴定或姐妹关系鉴定等，但目前尚无统一的判断标准。此类鉴定中，当有一个性染色体STR基因座不符合遗传规律时该如何处理，又或者应该累积检测多少个性染色体STR方可满足系统效能，从而给出支持的意见，这些都是我们目前需要解决的问题。建议在采用性染色体STR做鉴定时，遇到不符合遗传规律的基因座，切勿因为结果无法解释而删除不符合遗传规律的基因座，应在分析说明中如实说明，最好不要给出任何结论性的意见，从而避免结果误判。

在鉴定实践中，常常会遇到1～2个基因座不符合的疑难案例，遇到这类案例时，首先要确认不符合基因座是否是真实存在的，可以通过重复实验，不同试剂盒验证进行确认。确认真实存在之后，需进一步确认不符合基因座是否是由于基因突变导致。首先观察突变步数，突变的步数越多其发生的机会就越小，如果基因座不符合为两个以上重复单位的变化，这种情况被鉴定人之间排除存在亲子关系的可能性更大，增加遗传标记并计算累计亲权指数，当累计亲权指数CPI＜0.0001时，便可排除存在亲子关系。如果不符合遗传规律的基因座均为一个重复单位的变化，增加检测其他遗传标记，未发现更多不符合基因座的存在，此时要考虑被鉴定人父母与可疑父母之间是否存在近亲血缘关系，综合多种遗传标记，方可做出定论，以保证鉴定结果的准确性和科学性。

参考文献：

[1]蔡颖，周广彪，赵书民，等.中国人群亲权鉴定常用STR基因座平均突变率的估计[J].中国司法鉴定，2010，（5）：56-59.

[2]Brinkmann B，Klintschar M，Neuhuber F，et al.Mutation rate in human microsatellites：influence of the structure and length of the tandem repeat[J]. Am J Hum Genet，1998，62（6）：1408-1415.

[3]吕德坚，陆惠玲.亲子鉴定STR突变的考虑[J].中国司法鉴定，2009，45（4）：43-45.

[4]伍新尧，杨庆恩，等.亲权鉴定判断标准和结论表述的建立[J].中山大学学报，2010，31（1）:20-22.

（本文编辑：李成涛）

鉴定制度

Forensic System

作者简介：陈芳（1983—），女，主检法医师，主要从事法医物证学鉴定。E-mail:chen-fang@zju.edu.cn。

收稿日期：2015-01-30

文章编号：1671-2072-（2015）05-0121-03

doi:10.3969/j.issn.1671-2072.2015.05.026

文献标志码:B

中图分类号:DF795.4