金线莲快繁技术体系的优化

沈睿，李婉怡，张莉莉，刘永立(浙江大学农业与生物技术学院，浙江杭州310058)

花叶开唇兰(Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl)是兰科花叶兰属多年生植物，为陆生兰，又名金线莲(通称)、金钱草、鸟人参。金线莲性喜凉爽、荫湿［1］，在我国主要分布于亚热带地区，即福建、广东、广西、浙江、江西、海南、云南、四川、贵州以及西藏南部等省区。金线莲是我国传统的珍贵药材，可全草入药，味甘微苦、性平微寒，具有清热解毒、润肺止咳和祛风利湿等功效，因此受到医药行业的广泛重视。目前金线莲的人工繁殖主要是靠组织培养育苗后进行大田移栽，金线莲的组织培养已有报道［2－4］，然而如何高效且节能地进行扩繁金线莲是值得进一步探讨的课题。该研究以福建金线莲为材料，研究了基本培养基、植物生长调节剂以及光照对其繁殖的影响，为金线莲快繁技术体系的优化和生产应用提供了参考。

1 材料与方法

取自实验室原有的金线莲组培苗的幼嫩带腋芽茎段为外植体材料，该材料为福建品种。基本培养基为改良MS培养基(硝酸铵减半)和1/2MS培养基(大量元素减半)，添加不同浓度的萘乙酸(NAA)和6-BA，pH调整为5.8，在121℃下灭菌20 min。培养条件为温度(25±2)℃、光照3 000 lx、时间12 h/d、环境湿度60% ～80%。

表1 不同植物生长调节剂对金线莲增殖培养的影响

2 结果与分析

2.1 不同植物生长调节剂对金线莲增殖的影响 由表1可见，培养基中没有添加6-BA时，NAA的浓度对金线莲芽数增殖的影响不大，随着6-BA添加浓度的增加，金线莲芽数增殖数量也随之增加;芽数在第8组(改良MS培养基+NAA 0.4 mg/L+6-BA 1 mg/L)最多，即6-BA的浓度在1 mg/L时最佳，超过1 mg/L时，效果反而下降。不论6-BA的浓度变化，株高总是随NAA的浓度(在0～0.4 mg/L浓度范围内)增大而增高，随6-BA浓度(在0～8 mg/L范围内)增大而增大(表1)，在NAA 0.4 mg/L+6-BA 8 mg/L添加区为最高。只有在不添加6-BA时才生根。生根数随NAA浓度(在0～0.4 mg/L浓度范围内)增大而增多。

2.2 不同光照条件对金线莲增殖和生长的影响 从表2可看出，不同光照条件对金线莲增殖芽数没有显著影响，但株高明显增加，节间显著加长，植株白化细长呈现徒长状态，特别有利于进一步切割繁殖。在遮光条件下，节约能源，组培室温度也极易控制。

表2 不同光照条件对金线莲增殖和生长的影响

2.3 不同培养基和植物生长调节剂对金线莲生根培养的影响 从表3可以看出，改良MS培养基与1/2MS培养基相比，无论生根数还是根长均相对较好，生根数是改良MS培养基 +IBA 0.4 mg/L 最佳，根长是改良MS+NAA 0.2 mg/L;在该试验中，IBA和NAA对金线莲的生根均有较好的作用，二者无大差异。经过驯化的金线莲组培苗，移栽到以草炭为基质的营养钵中，1个月以后生长旺盛。

表3 不同培养基、植物生长调节剂对金线莲生根培养的影响

3 总结

该试验以金线莲无菌苗为研究材料，建立起一条金线莲的快速繁殖途径。用改良MS培养基，添加不同浓度的NAA和6-BA，得出最佳的增殖培养配方为改良MS培养基+NAA 0.4 mg/L+6-BA 1 mg/L。

生根试验中，用改良MS培养基和1/2MS培养基，用不同浓度的NAA和IBA，培养无菌苗，统计生根数和根长。生根数是改良MS培养基+IBA 0.4 mg/L最佳，而根长是改良MS培养基+NAA 0.2 mg/L，但两者差异不大。

［1］陈泳和，饶宝蓉，江文清，等.武夷山金线莲特征特性及林下栽培技术［J］.福建农业科技，2013(12):32 －34.

［2］范子南，肖华山，范晓红，等.金线莲的组织培养研究［J］.福建师范大学学报:自然科学版，1997，13(2):82 －87.

［3］李秀军，陈穗云，王玉梅，等.台湾金线莲的组培快繁研究［J］.青海师范大学学报:自然科学版，2004(3):91－93.

［4］韩晓红，王春龙，段春红，等.不同激素水平对金线莲组织培养的影响［J］.广东农业科学，2012(18):94－98.