郭洋洋,郑基焕,毛润乾,张宇宏*,李文辉,陈嘉东,黄明度,Ying-Fang XIAO
(1.中科院华南植物园,广州 510650;2.广东省昆虫研究所,广东省野生动物保护与利用公共实验室,广东省农业害虫综合治理重点实验室,广州 510260;3.广东省粮食科学研究所,广州 510050;4.Mid-Florida REC,University of Florida,Apopka,FL,USA 32703)
观察记录体长小于1 cm 昆虫的行为相对费时、费力,比如观察记录红火蚁Solenopsis invicta Buren的形态和数目时,常常因其无规律的运动、微小的虫体和凶猛的习性,而给操作者带来了诸多的困难和安全威胁。因此,针对小型昆虫的观察记录急需新的技术方法支持。
目前,观察记录小型昆虫的方法主要有3种:(1)直接观察记录昆虫的形态、行为和数目。在昆虫行为和昆虫鉴别的研究中,多采用直接观察记录的方法(Holway,1999;Morrison,2000;Dejean et al.,2005;曾玲等,2005a)。比如,观察记录红火蚁觅食行为时,常采用直接观察工蚁的行为特征结合记录本或调查表格记录的方法;观察记录红火蚁数目时,常采用直接计数(即用毛笔等将小型昆虫转移到新的容器中,同时计数)或称量计数(即昆虫数目=昆虫总重/单个昆虫的平均重量)结合表格记录的方法。(2)用体视显微镜观察记录昆虫的形态和数目。针对直接观察难以看清或需要鉴别的小型昆虫,常采用体视镜观察结合记录本记录的方法(林立丰等,2005;阮传清等,2012)。(3)相机拍照观察记录昆虫形态和数目。小型昆虫计数和野外观察昆虫时,可用相机拍照记录,然后再结合记录本或调查表格,观察记录其形态和数目。
总之,传统的观察记录方法虽然解决了观察记录小型昆虫形态、行为和数目中存在的问题,能满足大多科研需求。但也存在观察记录过程繁琐、观察质量不高和存在安全隐患等缺陷,需要改进提高。针对传统的观察记录方法中存在的问题,我们设计了一种昆虫观察记录仪,并初步验证其使用效果。
昆虫观察记录仪有四个部分组成,包括观察系统、照明系统、拍摄系统和显示与处理系统。其中,观察系统主体由Leica M8 体视显微镜组成,体视镜不仅为观察提供了平台,而且其显微功能还使观察小型昆虫成为现实;照明系统由环形冷光灯和改装后的两个卤钨灯组成,两种灯具通过不同光质、不同角度的配合来提高观察质量;拍摄系统由Nikon D320 相机和改装成的相机接口组成,相机通过拍摄来收集记录观察结果;显示与处理系统由显示器或笔记本电脑组成,此系统不仅能使操作者直观的看到到观察对象,还能结合办公和图像处理软件,快速的记录和处理观察结果。
连接方式如图1 所示,图中①卤钨灯及其电源;②冷光灯及其电源;③Leica M8 体视显微镜;④Nikon D320 相机;⑤显示屏;⑥笔记本电脑。使用前要将电源电压调到最低,同时根据需要选择显示与处理系统,并用数据线连好。打开电源,调节观察系统和照明系统,直至观察角度最合适、图像最清。然后便可以开始相关试验。
图1 昆虫观察记录仪示意图Fig.1 The diagram of the device for observation and recording of insects
供试红火蚁种群采自广州市从化区,整巢采回后放入塑料桶中进行室内饲养。实验时,向饲养桶内浇适量水,使工蚁爬出。用红火蚁工蚁定量采集装置随机采样(郭洋洋等,2012),5个蚁群各采一组样(各组样品数均大于100)。迅速将样本转移到内壁涂有滑石粉的培养皿中。用昆虫观察记录仪观察其形态、测量体长,数据由Excel软件进行统计分析。
其中,测量红火蚁体长的方法为:在培养皿底部标出1 mm 的长度,然后放入待测昆虫,用观察记录仪拍照,并在笔记本电脑上以SmoothDraw 4.0 软件中的圆形笔尖直径(可在1-128个单位长之间调整)为标尺,测量并换算出红火蚁工蚁的体长。
将3-5 头红火蚁工蚁浸泡于盛有75%乙醇的指形管中,30 min 后取出晾干,用昆虫观察记录仪观察其鉴别特征。其中,鉴别特征包括唇基两侧齿、上颚内缘小齿、腹柄节和腹部末端螯刺(Trager JC,1991;曾玲等,2005)。然后,选择清晰度和形态细节符合要求的照片,用SmoothDraw 4.0 软件中的临摹和图像处理功能画出能反应其鉴别特征的形态图。
实验测量的结果表明:工蚁体长在2-7 mm之间,体长呈连续性变型现象,与曾玲等(2005)的研究结果一致。统计结果(图2)显示:5个蚁巢所取样本中,体长在3-5 mm 的工蚁所占比例均在91.2%以上,最高可达97.5%;体长小于3 mm 的工蚁所占比例均小于3%,体长大于5 mm的工蚁所占比例均小于8%。据此,可将工蚁划分为三个亚品级:微型工蚁,体长小于3 mm;中型工蚁,体长在3-5 mm 左右;大型工蚁,体长大于5 mm。
随机测量的结果表明,昆虫观察记录仪可以用于小型昆虫观察和昆虫体长的精确测量。
图2 不同体长的工蚁所占比例;X 代表工蚁体长Fig.2 Proportion of workers in different length,X meant the workers body length
用昆虫观察记录仪观察可知,红火蚁工蚁身体呈橘红色,可分为头、胸、腹三部分,各部分比例均匀。头部略成方形,后头中央有明显的凹陷,上颚发达,内缘有3个明显的小齿;腹部背板呈深褐色,前胸背板前端隆起,胸腹连接处有两个腹柄结,第一结节呈现倒“V”状,第二结节呈圆锥状;腹部呈卵圆形,末端有螯针伸出。
图3 显示了昆虫观察记录仪的制图功能,绘出的形态图可清晰的展示红火蚁工蚁的唇基两侧齿、上颚内缘小齿、腹柄节和腹部末端螯刺等鉴别特征。
观察记录是昆虫学研究中的基础环节(曾玲等,2005;林立丰等,2005)。鉴别特征在昆虫鉴定中有重要应用,比如Norman 等(2010)就认为未来的高清晰观察系统与相关软件结合,可以实现自助式鉴定物种;形态图常与文字描述一起,在书藉和刊物中起着相得益彰的作用(郑乐怡等,1999)。因此,提高观察记录的效率和质量是科研工作者不断追求的目标。
图3 昆虫观察记录仪拍摄制作的形态图Fig.3 Illustration filmed and produced by the device for observation and recording of insects
由于人的物理条件和观察仪器的限制,传统的观察方法难以达到高质量的观察效果。对此,昆虫观察记录仪通过对照明系统和拍摄系统的设计予以克服。比如照明系统,结合两种光质的优点,通过调节亮度和照射角度使观察样本处于最佳的光照条件下;拍摄系统的核心为Nikon D320(2400 万有效像素),可满足高像素和快速传输信息的要求。同时,传统的观察记录方法还由于观察、记录和结果处理之间相互孤立,从而易导致操作者的疲劳,还限制实验效率。对此,昆虫观察记录仪通过功能组合的方法予以解决。比如,将观察系统、拍摄系统和笔记本电脑连接在一起,观察时可直接把照片和视频传入电脑,随时结合办公和图像处理软件对结果进行处理。
此外,利用昆虫观察记录仪还可对有攻击性的小型昆虫进行拍照,然后在图像软件上计数,从而避免直接接触,保证操作安全。总之,昆虫观察记录仪能提高观察记录小型昆虫的效率和质量,为小型昆虫的研究提供了一种可靠的方法。
References)
Collins HL,Callcott AMA.Fipronil:an ultra-low-dose bait toxicant for control of red imported fire ants(Hymenoptera:Formicidae)[J].Florida Entomologist,1998,81(3):407-415.
Dejean A,Le Breton J,Suzzoni JP,et al.Influence of interspecific competition on the recruitment behavior and liquid food transport in the tramp ant species Pheidole megacephala[J].The Science of Nature,2005,92:324-327.
Guo YY,Mao RQ,Xiao YF,et al.Devices and methods for quantitative collection and transfer of red Imported fire ant workers[J].Journal of Environmental Entomology,2012,34(4):509-513.[郭洋洋,毛润乾,Ying-Fang XIAO,等.红火蚁工蚁定量采集与分装的装置及使用方法[J].环境昆虫学报,2012,34(4):509-513]
Holway DA.Competitive mechanisms underlying the displacement of Native ants by the invasive argentine ant[J].Ecology,1999,80(1):238-251.
Lin LF,Duan JH,Lu WC,et al.Morphological characteristic and identification of red fire ant in Wuchuan,Guangdong[J].Chinese Journal Vector.Biol.& Control,2005,16(3):174-177.[林立丰,段金花,卢文成,等.广东省吴川红火蚁的形态特征及其鉴别[J].中国媒介生物学及控制杂志,2005,16(3):174-177]
Morrison LW.Mechanisms of interspecific competition among an invasive and two native fire ants[J].OIKOS,2000,90:238-252.
Macleod N,Benfield M,Curverhous P.Time to automate identification[J].Nature,2010,467:154-155.
Ruan CQ,Chen Jl,Liu B,et al.Morphology and behavior of Asian Citrus Psyllid,Diaphorina citri Kuwayama[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2012,28(31):186-190.[阮传清,陈建利,刘波,等.柑橘木虱主要形态与成虫行为习性观察[J].中国农学通报,2012,28(31):186-190]
Trager JCA.revision of the fire ants,Solenopsis geminata Group(Hymenoptera:Formicidae:Myrmicinae)[J].Journal of the New York Entomological Society,1991,99:141-198.
Zeng L,Lu YY,He XF,et al.Identification of red imported fire ant Solenopsis invicta to invade mainland China and infestation in Wuchuan,Guangdong[J].Chinese Bulletin of Entomology,2005a,42(2):144-148.[曾玲,陆永跃,何晓芳,等.入侵中国大陆的红火蚁的鉴定及发生为害调查[J].昆虫知识,2005a,42(2):144-148]
Zeng L,Lu YY,Chen ZN.Survey and Control for Red Imported Fire Ant Solenopsis invicta Buren[M].Guangzhou:Guangdong Science and Technology Press,2005b,1-35.[曾玲,陆永跃,陈忠南.红火蚁监测与防治[M].广州:广东科技出版社,2005b,1-35]
Zheng LY,Gui H.Classification of Insect[M].Nanjing:Nanjing Normal University Press,1999,397-400.[郑乐怡,归鸿.昆虫分类[M].南京:南师范大学出版社.1999,397-400]