卵巢癌患者血清可溶性B7-H4和HE4水平的变化及其临床意义

吴建清 吴莉萍

卵巢癌患者血清可溶性B7-H4和HE4水平的变化及其临床意义

吴建清 吴莉萍

目的 探讨血清可溶性B7-H4（sB7-H4）和人附睾蛋白-4（HE4）水平在卵巢癌患者中的变化及临床意义。方法 应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测50例卵巢癌患者和50例良性上皮性卵巢肿瘤血清sB7-H4和HE4水平，并以50例健康体检者做对照组。结果 卵巢癌患者组血清中sB7-H4和HE4水平均高于良性上皮性卵巢肿瘤组和正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；随着病变程度加重，血清中sB7-H4和HE4水平显著增加；相关性分析表明，血清sB7-H4和HE4水平呈显著正相关（r=0.633；均P＜0.05）。结论 sB7-H4和HE4在卵巢癌发生发展过程中可能起重要作用，且与卵巢癌病变严重程度相关，血清sB7-H4和HE4含量检测有助于判断病情的程度。

卵巢癌 可溶性B7-H4 人附睾蛋白-4

卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，病死率居妇科肿瘤之首，严重威胁妇女健康。B7-H4是近年来发现的协同刺激因子B7家族成员，其在多种肿瘤组织中高表达，与恶性肿瘤尤其是卵巢癌关系密切，可能是卵巢癌的一种新型肿瘤标志物［1］。人附睾蛋白-4（HE4）是新型的肿瘤标志物，用于检测卵巢癌的诊断已开始引起学者们的关注［2］。作者通过测定卵巢癌患者血清B7-H4和HE4的浓度变化，了解其在卵巢癌发生发展中的作用，为卵巢癌患者早期诊断和病情监测提供实验依据。

1 临床资料

1.1 一般资料 2013年6月至2014年9月嘉兴市妇幼保健院住院的，经病理检查确诊的卵巢癌患者50例，入院前患者＜3个月均未应用任何药物、化疗或放疗治疗，年龄21～68岁，平均年龄（54.5±9.8）岁。纳入标准：（1）均为初次手术。（2）经临床、影像学诊断，病理检查确诊。（3）根据2000年FIGO手术病理分期标准，I期20例、Ⅱ期15例、Ⅲ期9 例、Ⅳ期6例。早期（I/II期）患者行卵巢癌根治术，晚期（III/Ⅳ期）患者行肿瘤细胞减灭术。50例良性上皮性卵巢肿瘤（浆液性囊腺瘤21例、黏液性囊腺瘤29例），年龄23～65岁，平均年龄（52.9±10.6）岁。排除：血小板异常、血栓性疾病、内分泌疾病及其他器官肿瘤病史。纳入患者采血时均非月经期。对照组50例，均为桐乡市洲泉镇中心卫生院体检健康的妇女。年龄20～69岁，平均（52.5±10.2）岁。各组的年龄差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法 所有受检者清晨空腹抽取静脉血5ml，离心5min，3000r/min，血清分离后放-20℃冰箱保存备用。采用ELISA测定血清中sB7-H4和HE4，试剂盒购自

2.1 卵巢癌组、良性上皮性卵巢肿瘤组和对照组的血清sB7-H4和HE4 水平比较 见表1。

表1 卵巢癌患者与正常人血清sB7-H4和HE4水平的变化（x±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05，与良性上皮性卵巢肿瘤组比较，#P＜0.05

2.2 不同临床分期卵巢癌组血清sB7-H4和HE4水平比较 见表2。美国ADL公司和上海西唐生物科技有限公司，按试剂盒说明书要求操作。

表2 不同临床分期卵巢癌患者血清sB7-H4和HE4水平比较（x±s）

1.3 统计学分析 采用的SPSS16.0软件。数据以（x±s）表示，采用t检验，相关分析用Person 相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.3 卵巢癌患者sB7-H4和HE4相关性分析 sB7-H4水平和HE4水平经正态性检验，均属正态分布，相关性分析结果显示：sB7-H4水平和HE4水平呈正相关（r=0.633，P＜0.01）。

3 讨论

卵巢癌是女性生殖系常见的三大恶性肿瘤之一，发病率为 40/10万，病死率为妇科肿瘤之首，近年来其发病率不断升高且有年轻化趋势。卵巢癌由于其缺乏早期症状和体征，故早期诊断困难，病死率较高，如果卵巢癌能在早期发现，以目前的医疗水平Ⅰ期卵巢癌患者治愈率达94%［3］，然而大部分卵巢癌发现于晚期，预知的5年生存率仅为15%左右，因此寻找一种新的特异性强、灵敏性高的有价值的血清肿瘤标志物成为目前卵巢癌的早期诊断亟待解决的课题。B7-H4是最近发现的一种在卵巢癌早期患者中高表达的负性协同刺激因子，在卵巢癌中对活化的T细胞起负调节作用，其机制可能是通过抑制T细胞的增殖、细胞因子的产生和细胞周期的进程来负性调控T细胞的免疫应答，与肿瘤的免疫逃逸有关，很可能是一种新的肿瘤标志物［4］。研究发现B7-H4在肿瘤细胞中的表达主要有两种形式，其一是以跨膜形式表达于肿瘤细胞表面，其二是表达于肿瘤细胞胞浆中。与正常组织表达形成对照的是，85%的卵巢癌细胞表面表达B7-H4，这使之有望成为卵巢癌特异性标志物［5］。HE4即人附睾蛋白-4，又名核心表位蛋白，属于抑蛋白酶家族，最早于1991年由Kirchhoff等从人附睾远端上皮细胞中发现，是附睾特异性生育相关蛋白。研究表明，HE4是新近提出的卵巢癌和子宫内膜癌肿瘤标志物，它在卵巢癌和子宫内膜癌高度表达，在患者血清中检则到HE4水平显著升高，而在非妇科肿瘤患者血清中未见HE4升高。HE4较癌抗原125灵敏度高、特异性好，可用于患者确诊、术后复发监测和治疗反应评价等，已经成为盆腔肿瘤新的标志物［6］。

本资料表明，卵巢癌组血清sB7-H4和HE4水平显著高于良性上皮性卵巢肿瘤组和对照组（P＜0.01），而良性上皮性卵巢肿瘤组和对照组差异无统计学意义（P＞0.05），与国外学者［7］研究结果相符。这提示血清sB7-H4和HE4水平的高低与卵巢癌的发生与发展密切相关，可作为卵巢癌早期诊断的血清标志物，并用于卵巢癌早期辅助诊断、疗效评价。有研究显示与正常患者和良性疾病的患者相比，卵巢癌患者血清中B7-H4的表达显著升高，血清中B7-H4 在大多数的卵巢浆液性癌和卵巢子宫内膜样癌血清中的表达较卵巢轴液性癌相对较高表达［8］。与本资料结果相一致。卢仁泉等［9］检测82例卵巢癌患者、26例卵巢良性疾病患者及40名健康对照者血清HE4水平，发现卵巢癌患者HF4水平明显高于健康者以及卵巢良性疾病患者，差异有统计学意义，通过与传统的卵巢癌标志CAl25比较发现，在相同特异度的情况下，两组HE4的敏感度均稍高于CAl25，进一步确认了HE4对早期诊断卵巢癌的价值，与本资料相符。进一步研究结果显示不同临床分期宫颈癌患者随着病情加重血清sB7-H4和HE4水平有增高趋势，但I期和II期比较差异无显著性（P＞0.05），I、II期卵巢癌患者血清sB7-H4水平显著低于Ⅲ/Ⅳ期患者，差异有统计学意义（P＜0.05），这一结果提示sB7-H4和HE4可作为宫颈癌患者的预警分子，可能对宫颈癌的早期诊断有提示作用，可以作为判断宫颈癌病情发展的标志物。有研究表明血清B7-H4蛋白水平与上皮性卵巢癌患者的临床FIGO分期（I+II、Ⅲ+Ⅳ）和肿瘤分化程度有关，B7-H4可以较好的反映卵巢癌的严重程度，提示其与上皮性卵巢癌的临床进展密切相关，并可能用于卵巢癌的预后判断［4］。临床FIGOⅢ、Ⅳ期患者血清HE4水平明显高于早期I、II期患者，随病程进展HE4敏感度逐步升高，Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌患者＞80%，研究表明其有助于卵巢癌的早期诊断和发病风险的预测［9］。相关性分析结果显示sB7-H4和HE4水平呈正相关关系（r=0.633，P＜0.01），表明随血清sB7-H4水平的提高，HE4水平也随之升高，两者协同表达上调与卵巢癌的发生发展有关。

综上所述，血清sB7-H4和HE4同卵巢癌的临床分期和严重程度密切相关，可能成为卵巢癌肿瘤标志物的一个新的方向，是诊断卵巢癌的有效工具，检测血清sB7-H4和HE4水平在卵巢癌的早期诊断、及疾病监测方面具有良好的应用前景。

1 Choi IH1, Zhu G,et al. Genomic organization and expression analysis of B7-H4, an immune inhibitory molecule of the B7 family. J Immunol,2003,171(9):4650～4654.

2 李莉,王睿,周欣.血清CA125和HE4水平与卵巢癌病情的相关性研究.中国实验诊断学,2013,17(5):829～832.

3 Simon I, Liu Y, Krall KL, et al. Evaluation of the novel serum markers B7-H4, Spondin 2, and DcR3 for diagnosis and early detection of ovarian cancer. Gynecol Oncol,2007, 106(1):112～118.

4 赵枰,曹兴建,张秀琳,等.上皮性卵巢癌患者血清B7-H4蛋白水平的测定及其临床意义.中华全科医师杂志,2011,10(4):260～262.

5 Tringler B, Liu W, Corral L, et al. B7-H4 overexpression in ovarian tumors. Gynecol Oncol,2006, 100(1): 44～52.

6 杨彬,彭林.HE4-卵巢癌和子宫内膜癌的标志物.医学综述,2011,20(17):3087～3089.

7 Anderson GL1, McIntosh M, Wu L,et al. Assessing lead time of selected ovarian cancer biomarkers: a nested case-control study.J Natl Cancer Inst,2010,102(1): 26～38.

8 谷文文,杜丹丽. HK6和B7-H4在卵巢癌诊断价值的探讨.蚌埠医学院学报,2012,37(6):684～686.

9 卢仁泉,郭林,胡娟.人附睾上皮分泌蛋白4在卵巢癌诊治中的应用价值. 中华检验医学杂志,2009,32(12):1379～1383.

314500 浙江省桐乡市洲泉镇中心卫生院检验科（吴建清）

314051 浙江省嘉兴市妇幼保健院检验科（吴莉萍）