不同分期老年糖尿病肾病患者血清氧化应激、血管新生指标以及外周血T细胞含量的评估

左满花，唐俊

（1.湖北民族学院医学院，湖北 恩施 445000；2.湖北恩施州中心医院肾内科，湖北 恩施 445000）

·临床论著·

不同分期老年糖尿病肾病患者血清氧化应激、血管新生指标以及外周血T细胞含量的评估

左满花1，唐俊2

（1.湖北民族学院医学院，湖北 恩施 445000；2.湖北恩施州中心医院肾内科，湖北 恩施 445000）

目的分析不同分期老年糖尿病肾病患者的血清氧化应激、血管新生指标以及外周血T细胞含量。方法选择2012年6月-2014年6月在该校附院接受住院治疗的老年糖尿病肾病患者99例作为观察组对象，根据病情严重程度分为早期糖尿病肾病组、中晚期糖尿病肾病组，另取同期在该院进行健康体检且不伴有糖尿病肾病的老年人作为正常对照组，比较各组间血清氧化应激、血管新生指标以及外周血T细胞含量等差异。结果①早期DN组、中晚期DN组患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于正常对照组，且中晚期DN组患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于早期DN组（P＜0.05）；②早期DN组、中晚期DN组患者血清VEGF、PEDF及ES水平高于正常对照组，且中晚期DN组患者血清VEGF、PEDF及ES水平高于早期DN组（P＜0.05）；③早期DN组、中晚期DN组患者血清CD4+、CD4+/CD8+水平高于正常对照组，CD8+水平低于正常对照组（P＜0.05），早期DN组与中晚期DN组间差异不明显。结论氧化应激损伤、血管新生及免疫功能紊乱均参与了糖尿病肾病的发生发展，并随病情分期升级进一步失衡。

老年糖尿病肾病；氧化应激；血管新生

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是长期严重糖尿病导致的肾脏病变，其发病机制目前尚不明了，可能与炎症、氧化应激等关系密切[1]。老年糖尿病患者并发肾脏损害的几率高，故老年糖尿病肾病是DN的最大患病群体，此类患者病情更加复杂、治疗更为困难[2]。为了了解老年糖尿病肾病患者的全身改变特点以更好的寻找临床治疗靶点，本次研究重点分析不同分期老年糖尿病肾病患者的血清氧化应激、血管新生指标以及外周血T细胞含量，具体汇报如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2012年6月-2014年6月在该校附院接受住院治疗的老年糖尿病肾病患者99例作为观察组对象。根据2010年中华医学会制定的糖尿病肾病分期标准分为早期糖尿病肾病组、中晚期糖尿病肾病组。早期糖尿病肾病组患者51例。其中，男性28例，女性23例；年龄60～71岁，平均（63.14±5.27）岁；糖尿病病程4～11年，平均（7.69±2.21）年。中晚期糖尿病肾病组患者48例。其中，男性26例，女性22例；年龄61～76岁，平均（65.71±8.66）岁；糖尿病病程7～17年，平均（11.35±3.27）年。另取同期在本院进行健康体检且不伴有糖尿病肾病的老年人50例作为对照组。其中，男性26例，女性24例；年龄61～78岁，平均（69.37±7.88）岁。

1.2 观察指标

1.2.1 氧化应激水平各组患者均抽取外周静脉血，采用羟胺法检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD），硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛（malondialdehyde，MDA），酶联免疫吸附法测定晚期蛋白氧化产物（advanced oxidation protein products，AOPP）水平。

1.2.2 血管新生指标各组患者均抽取外周静脉血，测定血清血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、色素上皮衍生因子（pigment epithelium-derived factor，PEDF）、内皮抑素（endostatin，ES）。

1.2.3 T细胞含量各组患者均抽取外周静脉血，测定T细胞亚群含量，包括CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+。

1.3 统计学方法

采用SPSS 18.0软件对数据进行统计学分析，三组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD法，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 氧化应激水平

方差分析显示三组之间有差异，且经LSD两两比较显示，早期DN组、中晚期DN组患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于正常对照组，且中晚期DN组患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于早期DN组（P＜0.05），具体见表1。

表1 不同分期老年糖尿病肾病患者的血清氧化应激水平比较（±s）

表1 不同分期老年糖尿病肾病患者的血清氧化应激水平比较（±s）

组别SOD/（u/ml）MDA/（μmol/L）AOPP/（μmol/L）早期DN组132.81±10.937.09±0.8893.48±8.72中晚期DN组214.28±27.4111.37±1.73152.84±13.28正常对照组80.63±9.384.83±0.7560.33±6.32 F值9.2748.38411.372 P＜0.05＜0.05＜0.05

2.2 血管新生指标

方差分析显示三组之间有差异，且经LSD两两比较显示，早期DN组、中晚期DN组患者血清VEGF、PEDF及ES水平高于正常对照组，且中晚期DN组患者血清VEGF、PEDF及ES水平高于早期DN组（P＜0.05），具体见表2。

表2 不同分期老年糖尿病肾病患者的血清血管新生指标水平比较（±s）

表2 不同分期老年糖尿病肾病患者的血清血管新生指标水平比较（±s）

组别VEGF/（pg/ml）PEDF/（μg/L）ES/（ng/ml）早期DN组132.03±11.8359.27±6.8895.28±8.31中晚期DN组211.26±27.6683.21±7.85173.28±15.39正常对照组18.73±2.1613.21±1.8583.29±7.23 F值8.2936.49210.394 P＜0.05＜0.05＜0.05

2.3 T细胞含量

方差分析显示三组之间CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平有差异，且经LSD两两比较显示，早期DN组、中晚期DN组患者血清CD4+及CD4+/CD8+水平高于正常对照组，CD8+水平低于正常对照组（P＜0.05），早期DN组与中晚期DN组间差异不明显，具体见表3。

表3 不同分期老年糖尿病肾病患者的血清T细胞含量比较（±s）

表3 不同分期老年糖尿病肾病患者的血清T细胞含量比较（±s）

组别CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+早期DN组64.18±7.3238.19±6.3823.16±2.041.63±0.42中晚期DN组63.29±5.3939.02±7.2521.38±2.481.91±0.49正常对照组62.18±5.0533.29±6.3927.92±3.291.25±0.31 F值0.3925.3957.1939.284 P＞0.05＜0.05＜0.05＜0.05

3 讨论

较多研究显示氧化应激在DN发生发展过程中扮演了重要角色，随着DN病情加重机体抗活性氧能力逐步下降。超氧化物歧化酶（SOD）是生物体内氧自由基的天然清除剂，属于金属蛋白酶，可以清除自由基O2，可以反映体内氧化应激状态[3]。丙二醛（MDA）是膜脂质过氧化最重要的产物之一，其产生可以加剧膜的损伤，可以与含游离氨基酸的蛋白质发生交联，增加血管基膜厚度。晚期蛋白氧化产物（AOPP）是反映蛋白氧化程度的敏感指标，其作为没有氧化的物质是链式反应的终末产物[4]。上述研究比较各组间血清氧化应激指标水平，结果显示：早期DN组、中晚期DN组患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于正常对照组，且中晚期DN组患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于早期DN组（P＜0.05），提示抗氧化应激降低是DN病情加重的重要因素之一[5-6]。

在DN中异常新生血管表达增加，此类新生血管在结构上是不成熟的，可以导致血管通透性增加、血浆蛋白外渗、肾小囊玻璃滴状病变、小动脉透明样变等DN的典型病理改变[7]。血管内皮生长因子（VEGF）为特异性作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子，可以促进内皮细胞分裂增殖、迁移，对于促进血管新生及增强血管通透性具有积极作用。生理状态下VEGF在肾脏足细胞上表达，在伴发糖尿病时糖基化终末产物、各种细胞因子增多，加上肾小球高压等因素，均导致肾脏VEGF表达上调[8-9]。内皮抑素（ES）是一种抑制血管再生的蛋白质，是目前已知最有效的血管新生抑制因子之一，可以有效抑制VEGF等促血管生长因子诱导的内皮细胞增殖迁移，与VEGF一起参与调控血管新生过程。色素上皮衍生因子（PEDF）属于丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族，其与受体结合后可以激活下游信号传导，发挥营养保护神经，组织血管新生、抗炎症等作用，是目前最高效的内源性血管生成抑制因子[10-11]。上述研究比较了各组患者的血清血管新生指标水平，结果显示早期DN组、中晚期DN组患者血清VEGF、PEDF、ES水平高于正常对照组，中晚期DN组患者血清VEGF、PEDF、ES水平高于早期DN组（P＜0.05），提示在DN患者体内VEGF病理性增多的同时，机体为了达到新的平衡，反馈性促进PEDF及ES等血管抑制性因子的表达[12]。

近年来越来越多的研究证实DN患者存在明显的细胞免疫及体液免疫异常，故免疫因素可能是DN发生的一个重要因素。机体免疫系统激活产生的炎症因子可导致血管内皮损伤进而促进血管并发症的发生。上述研究比较各组患者的T细胞含量，结果显示：早期DN组、中晚期DN组患者血清CD4+、CD4+/CD8+水平高于正常对照组，CD8+水平低于正常对照组（P＜0.05），早期DN组与中晚期DN组间差异不明显，提示DN患者存在明显的细胞免疫功能异常，且随着病情加重免疫功能紊乱加剧[13]。

综上所述，得出以下结论：氧化应激损伤、血管新生及免疫功能紊乱均参与了糖尿病肾病的发生发展，并随病情分期升级进一步失衡，可以成为日后临床治疗的切入点。

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Evaluation of elderly diabetic nephropathy patients'serum oxidative stress,angiogenesis targets and peripheral blood T cells contents during different stages

Man-hua ZUO1,Jun TANG2
(1.Medical College of Hubei University for Nationalities,Enshi,Hubei 445000,P.R.China; 2.Department of Nephrology,Central Hospital,Enshi,Hubei 445000,P.R.China)

【Objective】To analyze elderly diabetic nephropathy patients'serum oxidative stress,angiogenesis targets and peripheral blood T cells contents during different stages.【Methods】99 cases of elderly diabetic nephropathy patients during different stages between June 2012 to June 2014 in our hospital were chose as study object,all patients were divided into early diabetic nephropathy group,middle-late diabetic nephropathy group,in the same period chose physical examination people(without diabetic nephropathy)in our hospital as normal control group, compared three groups'serum oxidative stress levels,angiogenesis index and content of peripheral blood T cells.【Results】Early DN group and middle-late DN group patients'serum SOD,MDA,AOPP levels were higher than normal control group people,and middle-late DN patients'serum SOD,MDA,AOPP levels were higher than early DN group patients(P＜0.05);Early DN group and middle-late DN group patients'serum VEGF,PEDF and ES levels were higher than normal control group people,and middle-late DN group patients'serum VEGF,PEDF and ES levels were higher than early DN group patients(P＜0.05);Early DN group and middle-late DN group patients' serum CD4+,CD4+/CD8+levels were higher than normal control group people,CD8+level was lower than normal control group people(P＜0.05),these levels between early DN group and middle-late DN group had no obvious difference.【Conclusion】Qxidative stress injury,angiogenesis and immune dysfunction are involved in the develop－ment of diabetic nephropathy,and loss balance as condition stage upgrade.

senile diabetic nephropathy;oxidative stress;angiogenesis

R587.1

A

1005-8982（2015）31-0074-04

2015-04-21

唐俊，Tel：13593620500，E-mail：mailzuoi80@163.com