重组人血管内皮抑素介入栓塞治疗对肝癌患者血清血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶含量的影响及其临床价值

肖金成，李靖，黎海亮，郭晨阳

（郑州大学附属肿瘤医院介入科，河南 郑州 450000）

·临床论著·

重组人血管内皮抑素介入栓塞治疗对肝癌患者血清血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶含量的影响及其临床价值

肖金成，李靖，黎海亮，郭晨阳

（郑州大学附属肿瘤医院介入科，河南 郑州 450000）

目的分析重组人血管内皮抑素介入栓塞治疗对肝癌患者血清血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMP）含量的影响及其临床价值。方法选择在该院接受住院治疗的肝癌患者作为研究对象，随机分为接受传统肝动脉化疗栓塞治疗的对照组、接受重组人血管内皮抑素介入栓塞治疗的观察组，比较两组患者的治疗后血清VEGF水平、血清MMP水平及淋巴细胞亚群分布等差异。结果观察组患者接受治疗7，15及30 d后的血清VEGF水平均明显低于对照组（P＜0.05）。观察组患者接受治疗后的血清MMP-2及MMP-9水平均明显低于对照组（P＜0.05）。观察组患者接受治疗后的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平明显高于对照组（P＜0.05）。结论重组人血管内皮抑素介入栓塞治疗可以有效抑制肝癌患者的肿瘤细胞血管新生及侵袭能力，提升患者治疗后细胞免疫功能，有助于治疗效果的维持。

肝癌；重组人血管内皮抑素；介入栓塞

肝癌为目前临床恶性程度最高的肿瘤性疾病之一，临床确诊时多已至中晚期，故姑息性治疗方式应用较为合理。经肝动脉化疗栓塞术是目前应用最为广泛的微创治疗方法，通过栓塞肝癌细胞供血动脉、同时局部应用化疗药物，以达到最大程度杀灭肿瘤细胞的目的。但是栓塞治疗后周围区域会残留肝癌细胞，加上动脉化疗栓塞治疗后血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表达水平显著增高，可造成参与肿瘤细胞迅速增生转移[1]。重组人血管内皮抑素是特异性、多靶点抑制VEGF表达的物质，其与单纯动脉化疗栓塞术联用有望增强治疗效果、改善患者预后。本次研究主要分析重组人血管内皮抑素介入栓塞治疗对肝癌患者血清VEGF、基质金属蛋白酶（matrix-metalloproteinases，MMP）含量的影响及其临床价值。具体汇报如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择于2013年9月-2014年9月在本院接受住院治疗的首次确诊的肝癌患者82例作为研究对象，均经临床病理证实且排除伴冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）和糖尿病等重大疾病患者，所有入组患者及家属在了解研究过程后均签署知情同意书。按照随机数表法将所有入组患者分为：接受传统肝动脉化疗栓塞（traditionalhepaticarterial chemoembolization，TACE）治疗的对照组，接受TACE术中加用重组人血管内皮抑素的观察组，每组各41例。观察组患者中，男性23例，女性18例；年龄53～82岁，平均（68.26±8.05）岁；观察组患者中，男性22例，女性19例；年龄55～81岁，平均（69.31±8.76）岁。两组患者的基线资料差异无统计学意义，P＞0.05，具有可比性。

1.2 治疗方法

对照组患者接受常规肝动脉栓塞治疗，具体如下：患者全身麻醉插管，常规消毒铺巾后穿刺股动脉，行腹腔干造影、肿瘤供血动脉选择性插管。经导管注入丝裂霉素8 mg、替加氟注射液1.0 g，将吡柔比星20 mg与碘化油5～20 ml混合成乳化物，用明胶海绵栓塞动脉血管近端。观察组患者用吡柔比星20 mg+重组人血管内皮抑素30 mg，与碘化油5～20 ml混合成乳化物，其余操作同对照组。

1.3 观察指标

1.3.1 血清VEGF水平两组患者采用不同治疗方案前后，均抽取外周静脉血，采用ELISA法测定血管内皮细胞生长因子（VEGF）水平。

1.3.2 血清MMP水平两组患者采用不同治疗方案前后，均抽取外周静脉血，采用ELISA法测定基质金属蛋白酶（MMP）水平，具体包括MMP-2及MMP-9。

1.3.3 淋巴细胞亚群分布两组患者采用不同治疗方案前后，均抽取外周静脉血，采用酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法测定T细胞亚群分布情况，具体包括CD4+、CD8+及CD4+/CD8+。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0软件对上述数据进行统计学分析，计量资料采用t检验、计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

癞阿小虽然三十好几还光棍一个，但他碰过的女人决不比老村长烂眼阿根少，所以女人身上那点小秘密他太懂了。想想也是，这大热天的，柳红穿的套衫薄得跟张纸似的，他的手就相当于直接碰到了敏感部位；再加上苏石出门有半年了，她还能不念得慌吗？再加上刚才玉米地里撞见苏秋琴，触景生情……就在柳红飘到云端上的瞬间，癞阿小抓住时机将她按倒在地，动手扒她的裤子想霸王强上弓；但突然哗啦一声巨响，一只大西瓜砸在他头上，癞阿小倒下了。

2 结果

2.1 血清VEGF水平

治疗前两组患者的血清VEGF水平差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患者接受治疗7，15及30 d后的血清VEGF水平均明显低于对照组（P＜0.05），具体见表1。

表1 两组患者接受不同治疗方案前后的血清VEGF水平比较（pg/ml±s）

表1 两组患者接受不同治疗方案前后的血清VEGF水平比较（pg/ml±s）

组别治疗前治疗后7 d治疗后15 d治疗后30 d观察组123.92±21.05 112.38±18.62 100.72±13.2789.21±8.33对照组126.27±19.73 121.82±21.18 153.28±26.42 173.28±32.61 t值0.3844.9386.3829.0372 P＞0.05＜0.05＜0.05＜0.05

表2 两组患者接受不同治疗方案前后的血清MMP水平比较（ng/L±s）

表2 两组患者接受不同治疗方案前后的血清MMP水平比较（ng/L±s）

组别治疗前MMP-2MMP-9治疗后MMP-2MMP-9观察组126.54±11.13 127.28±11.7234.48±4.3435.42±5.06对照组128.04±12.56 129.17±13.3375.12±7.2677.33±8.15 t值0.4420.3536.8477.485 P＞0.05＞0.05＜0.05＜0.05

2.2 血清MMP水平

如表2所示，治疗前两组患者的血清MMP水平差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患者接受治疗后的血清MMP-2及MMP-9水平均明显低于对照组（P＜0.05）。

2.3 淋巴细胞亚群分布

治疗前两组患者的T细胞亚群分布差异无统计学意义（P＞0.05），观察组患者接受治疗后的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平明显高于对照组（P＜0.05），具体见表3。

表3 两组患者接受不同治疗方案前后的淋巴细胞亚群分布情况（±s）

表3 两组患者接受不同治疗方案前后的淋巴细胞亚群分布情况（±s）

组别治疗前治疗后CD3+/%CD4+/%CD3+/%CD4+/%CD4+/CD8+观察组50.03±2.1741.12±3.661.73±0.2554.53±4.4743.42±4.272.24±0.36 CD4+/CD8+对照组49.49±2.6341.36±4.481.67±0.1748.15±2.5838.07±3.751.71±0.17 t值0.3210.2860.5354.9855.2656.395 P＞0.05＞0.05＞0.05＜0.05＜0.05＜0.05

3 讨论

肝癌在临床中较为常见，恶性程度高，多数患者自觉身体不适而就医时已至肝癌中晚期，失去最佳根治性治疗时机，故经肝动脉化疗栓塞术（TACE）是较为理想的治疗方式。目前普遍认为TACE虽可有效杀灭肿瘤细胞、阻断其血供，但是其存在明显弊端：术后血管内皮生长因子（VEGF）表达水平显著增高，可直接导致栓塞区域周围的残留肿瘤组织内部血管新生、肿瘤组织获取养分后快速增生并经血管途径发生远处播散转移，加重病情[2-3]。为了有效控制肝癌病情，在TACE同时加入抑制VEGF活性的药物是较为可行的改良治疗方案。重组人血管内皮抑素具有显著抑制VEGF表达的效果，其作用于血管内皮细胞，抑制肿瘤血管的生存而达到抗肿瘤目的[4]。由于血管内皮细胞具有正常人体染色体基因组，遗传性具有稳定性，因此其治疗不易获得耐药性，具有广谱安全等临床应用优势。本次研究就选择中晚期肝癌患者作为研究对象，重点观察重组人血管内皮抑素在其治疗中的效果。

恶性肿瘤细胞的侵袭能力主要与其诱导血管再生能力相关，即肿瘤的生长转移依赖于肿瘤组织内部的新生血管形成[5]。血管内皮细胞生长因子（VEGF）是一类对血管生长具有强诱导能力的因子，其可特异性作用于血管内皮细胞、直接参与肿瘤血管的形成。经肝动脉栓塞治疗（TACE）的机制就是封闭肿瘤血管、阻断肿瘤细胞的营养供应，造成内皮细胞的缺血缺氧甚至坏死，栓塞同时局部注入的化疗药物可以辅助达到控制肿瘤生长转移的目的[6-7]。肝动脉栓塞治疗并非根治性治疗手段，已经有较多临床资料显示，TACE治疗后参与病灶边缘或者内部会有新血管形成，使得肿瘤继续生长转移，造成肝癌复发且病情更为严重[8]。鉴于VEGF对血管内皮细胞作用的特异性，通过测定患者血清VEGF水平可以直观了解患者的肿瘤血管新生能力及肿瘤复发可能性。上述结果显示对照组患者接受治疗后的血清VEGF先降后升，而观察组患者接受治疗后一段时间的血清VEGF水平显著低于治疗前，亦明显低于对照组患者。说明单纯TACE治疗后对照组患者出现的肿瘤血管新生及肿瘤复发，而重组人血管内皮抑素的多靶点抗血管形成作用抑制了血清VEGF水平的上升，同时有效遏制了肿瘤组织的血管新生及肿瘤复发[9]。

基质金属蛋白酶（MMPs）是肿瘤细胞分泌的一类锌离子依赖蛋白酶，是细胞外基质的主要降解酶之一，可以降解所有细胞外基质（extracellular matrix，ECM）成分，已经有较多临床学者发现MMPs直接参与了肿瘤转移[10]。MMPs有较多亚型，其中MMP-2及MMP-9是最主要两种，MMP-2及MMP-9可在肿瘤介导下完成ECM破坏，促进成纤维细胞进入细胞外基质与肿瘤产生协同作用，最终产生恶性循环加重ECM破坏及肿瘤侵袭转移。MMPs作为肿瘤转移必不可少的蛋白酶，其水平可以准确反映肿瘤侵袭力大小及治疗对肿瘤活性的杀灭情况[11]。上述研究结果显示：观察组患者在TACE治疗中加入了重组人血管内皮抑素，显著降低了血清MMP-2、MMP-9水平，抑制残余肿瘤组织活性及转移能力，这与重组人血管内皮抑素的诱导肿瘤细胞快速凋亡、调节组织蛋白酶生物活性等作用相关。

肝癌患者普遍存在免疫功能降低的情况，在抗肿瘤过程中细胞免疫发挥着重要作用，其功能水平与肿瘤的侵袭转移程度呈反比。T淋巴细胞中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平直接决定细胞免疫整体状态，其中，CD3+淋巴细胞代表全T淋巴细胞、CD4+淋巴细胞代表辅助性T淋巴细胞，CD8+代表抑制性T淋巴细胞[12]。上述研究显示观察组患者接受治疗后的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平明显高于对照组，可见接受重组人血管内皮抑素治疗后肿瘤患者细胞免疫功能提升，有助于其术后发挥抑制残余肿瘤细胞的作用，同时细胞免疫功能的提升侧面反映了术中肿瘤细胞被有效杀灭、残余肿瘤组织的活性小、转移侵袭力低。

综上所述，得出以下结论：重组人血管内皮抑素介入栓塞治疗可以有效抑制肝癌患者的肿瘤细胞血管新生及侵袭能力，提升患者治疗后细胞免疫功能，值得在日后临床实践中推广应用。

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The influence and clinical value of recombinant human endostatin vascular endothelial on liver cancer patient's serum VEGF,MMP levels

Jin-cheng XIAO,Jing LI,Hai-liang LI,Chen-yang GUO
(Department of Interventional Radiology,Cancer Hospital affiliated to Zhengzhou University, Zhengzhou,Henan 450000,P.R.China)

【Objective】To analyze influence of recombinant human endostatin vascular endothelial on liver cancer patients'serum VEGF,MMP levels and its clinical value.【Methods】Liver cancer patients in our hospital as research object,randomly divided into control group with traditional TACE treatment,observation group with recombinant human endostatin vascular endothelial treatment,compared serum VEGF levels after treatment,serum levels of MMP and lymphocyte subsets distribution differences.【Results】observation group patients'serum VEGF level after treatment was significantly lower than control group(P＜0.05).observation group patient's serum levels of MMP-2 and MMP-9 after treatment were significantly lower than control group(P＜0.05).observation group patients'CD3+,CD4+,CD4+/CD8+levels after treatment were significantly higher than control group(P＜0.05).【Conclusion】recombinant human endostatin vascular endothelial treatment could effectively inhibit tumor cells in liver cancer patients angiogenesis and invasion ability,promote cells after treatment in patients with immune function, help to cure effect.

liver cancer;recombinant human endostatin;interventional embolization

R735.7

A

1005-8982（2015）31-0070-04

2015-06-13