黄永春,陈辉辉,涂晨凌,于慧娟
(1.集美大学水产学院 361021;2.福建省海洋渔业资源与生态环境重点实验室)
对虾是全球性水产养殖种类,也是全球交易量最大的水产品。2012年我国对虾养殖产量达165万t,占全球养殖产量的40%,成为全球对虾养殖产量第一大国。随着虾养殖规模的不断扩大、集约化程度的提高以及虾生存环境的恶化,疾病对对虾的危害程度越来越大。特别是对虾白斑综合症病毒,是迄今为止危害最为严重的一种对虾病毒,感染虾7~10 d内死亡率可达80% ~100%[1]。采用抗生素和其他化学类药物防治,容易打破生物间相互依赖、相互制约的生态平衡关系,抑制了有益藻类的繁殖,给对虾健康养殖带来严重后果。而中草药具有天然、高效、毒副作用小、不易产生抗药性等优点,其某些成分既有抗菌作用,又有免疫作用,能改善机体的免疫状态,提高自身抗病能力,因此在水产养殖中的应用越来越受到关注[2-3]。为此,探讨了中草药与生物防控技术在对虾白斑综合症中的应用,以促进我国对虾健康生态养殖的发展。
对虾白斑综合症病毒 (white spot syndrome virus,WSSV)是一种双链 DNA病毒,病毒粒子呈椭圆形,具有双层囊膜但不形成包涵体[4]。目前国际上已测定了3株对虾白斑综合症病毒全基因组序列,分别为泰国株 (AF369029)[5]、中国大陆株(AF332093)[6]及台湾株 (AF440570)[7]。
对虾白斑综合症病毒是全球对虾养殖业最主要的病原体之一,其致病宿主范围广、致病力高、传播迅速,该病典型症状为对虾甲壳内侧出现直径0.5~2.0 mm大小的白色斑点,甲壳易剥离;虾体色微红,摄食减少或停止摄食,静卧池底,体质虚弱,空胃空肠等症状;感染虾7~10 d内死亡率可达80%~100%,是迄今为止危害最为严重的一种对虾病毒,在全球范围内造成重大经济损失,严重阻遏了对虾养殖产业的发展,成为目前对虾养殖业可持续发展的主要障碍之一[1]。
中草药作为一种天然物质,具有来源广泛、价格低廉、不宜导致病原菌产生耐药性等优点。目前已有200余种中草药被报道具有多种免疫活性,能够影响和调节动物机体的免疫功能[2]。中草药按其功效可分为以下几类:一是抗病毒类中草药,如板蓝根、野菊花、紫胡、射干 、虎杖、苦地丁等;二是抗菌抑菌类中草药,如乌梅、百部、大黄、鱼腥草、大青叶、白头翁等;三是促进生长类中草药,如大蒜、山楂、金樱子、露水草、龙胆草等;四是驱虫、杀虫类中草药,如槟榔、苦参、苦楝、草果、仙鹤草、常山、五倍子等[3]。中草药除含有药用功效的成分外,还含有蛋白质、多糖、脂类、微量元素、维生素等营养成分,因而中草药具有增强机体免疫力、调整机体新陈代谢、增强抗应激能力、抗菌抑菌、促消化吸收、促生长、杀虫驱虫等多种功能,适合作为免疫增强剂应用于水产养殖业[8-10]。
国外学者 Kumaran[11]、Balasubramanian[12]和Yogeeswaran[13]采用不同的试剂和方法获得的中草药提取物组分均能使对虾抗 WSSV侵染能力增强,存活率大幅提高。Balasubramanian[14-15]选取 20 种印度传统药用植物用于抗病毒药物筛选,发现从木橘、苦瓜、狗牙根、马缨丹、真珠草等植物中获得的有机性或水溶性提取物具有较强的抗病毒活性,其中以狗牙根效果最为显著。用狗牙根的醇溶性粗提取物投喂斑节对虾后,对虾对WSSV侵染的抵抗力显著增强。天冬和角果木水溶性提取物被对虾摄入后,对虾的非特异性免疫力增强,WSSV侵染后的死亡率降低[16]。
吴俊文[17]在每千克饲料内添加中草药复合制剂净10 g,连续投喂南美白对虾5~7 d,其对WSSV的控制率达80%以上,并在一定程度上控制了WSSV的传播;杨清华等[18]研究表明在饲料中添加复方中草药投喂凡纳滨对虾可以影响对虾对WSSV的抗病能力,当添加复方中草药浓度为0.1%时,连续饲喂26 d,对虾抗病力的提高最为明显。若饲喂时间过短或过长,对虾抗病力的提高均不明显。连续饲喂比间断饲喂效果要好,短期间断给药,高剂量组的对虾抗病力提高,而低剂量组的对虾抗病力下降。在治疗试验中,当复方中草药添加浓度为0.2%,连续饲喂30 d,对虾治疗效果最为明显。郭志勋等[19]发现番石榴叶水提取物对WSSV有一定的杀灭作用,并指出其杀毒效果与药物、病毒的相对浓度及处理时间相关,当水体中番石榴叶提取物浓度达到1×10-2mg/mL时,可以有效杀灭水体中足以使对虾死亡的WSSV。阴晓丽等[20]指出番石榴叶中极性较强的乙酸乙酯相、正丁醇相是影响WSSV病性的有效成分。在基础饲料中添加0.8%的黄芪多糖,可明显提高对虾存活率,对克氏原螯虾抗WSSV感染有明显的效果[21]。
对虾白斑综合症生物防控技术是基于病毒流行病学原理、对虾养殖生态系统群体结构和种群间相互作用及食物链原理,研究了对虾养殖系统中鱼类的摄食习性和与对虾的摄食竞争力,通过混养适当规格和数量的吞食性鱼类,在健康对虾还未摄食带病毒对虾之前,先摄食清除病死对虾,从而达到切断对虾间病毒经口传播的途径,切断WSSV的感染等,建立了养殖对虾WSS生物防控技术体系,减少药物使用,生产健康安全水产品。
生产上根据不同地区的养殖情况,可选择不同的混养鱼类,如草鱼、革胡子鲶、罗非鱼、卵形鲳鲹、石斑鱼、斑点叉尾鮰、美国红鱼以及军曹鱼联合生物防控 (表1)。一般在虾苗投放10 d或20~30 d,虾苗达到2~4 cm后,再混养适当规格和一定数量的鱼类,通过这些鱼类在虾池中摄食残饵、活动弱的患病对虾或病死对虾以及其他水中生物,可改良对虾池生态,切断病原体,达到鱼虾双丰收。
表1 对虾白斑综合症混养鱼种类、时间、规格和数量
随着对虾养殖规模的不断扩大、集约化程度的提高以及虾生存环境的恶化,疾病的危害程度越来越大,给养虾生产造成了巨大损失。但是,长期使用抗生素和其他化学类药物防治养殖病害,已引发了一系列环境问题和社会问题。尽管各国学者自WSSV大规模暴发以来,一直在不断寻找预防和控制该病的方法,但至今对WSSV尚无有效的治疗方法,因此从切断可能的病毒来源、投喂免疫增强剂来提高虾体的抵抗力是预防WSSV发生和流行行之有效的方法。为此,利用中草药这一绿色、环保药物和添加剂来提高虾体自身非特异性免疫能力,并结合混养吞食鱼类摄食弱虾、病虾和死虾的防控技术,能够及时消灭传播源,有效控制对虾白斑综合症病毒的蔓延,减少渔药使用,生产绿色对虾产品,促进对虾产业可持续健康发展。
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