施氏獭蛤室内规模化人工育苗技术研究

王　斌，栗志民，刘志刚，刘付少梅，冯小龙

（1.广东海洋大学水产学院，广东 湛江 524025；2.湛江银浪海洋生物技术有限公司，广东 湛江 524025）

施氏獭蛤室内规模化人工育苗技术研究

王斌1，栗志民1，刘志刚1，刘付少梅2，冯小龙2

（1.广东海洋大学水产学院，广东 湛江 524025；2.湛江银浪海洋生物技术有限公司，广东 湛江 524025）

为解决施氏獭蛤天然种苗匮乏和人工育苗技术尚不成熟的问题，促进其产业发展，于2013年开展了施氏獭蛤（Lutraria sieboldii Reeve）室内规模化人工育苗技术研究。采用池底铺沙，饵料以单胞藻为主，并辅以鸡蛋黄和淀粉，施氏獭蛤亲贝存活率89.7%，雄贝和雌贝性腺成熟率分别为89.1%和78.7%，亲贝产卵量126万粒/个，受精率达到93.4%。在水温25.5～26.5℃，盐度27.3～28.5条件下，施氏獭蛤受精后15min和25min分别释放第一极体和第二极体，受精后35min达到2细胞期，约4 h 40min形成原肠胚期，6 h 25min形成担轮幼虫，受精后14 h进入面盘幼虫期。投喂不同的开口饵料，施氏獭蛤面盘幼虫生长速率不同。单独投喂湛江等边金藻、湛江等边金藻+小球藻和单独投喂小球藻，5日龄幼虫壳长分别为130、118和105 μm，说明单独投喂湛江等边金藻培育效果最好。湛江等鞭金藻+小球藻、小球藻+牟氏角毛藻、牟氏角毛藻+湛江等鞭金藻、湛江等鞭金藻+亚心形扁藻等不同饵料组合对施氏獭蛤幼虫和稚贝生长影响均差异显著（P＜0.05），其中小球藻+牟氏角毛藻组合培育幼虫效果最佳，而湛江等鞭金藻+亚心形扁藻培育稚贝效果最好。不同附着基对施氏獭蛤幼虫的生长和存活产生显著影响（P＜0.05）。采用遮光网、聚乙烯网片、细砂、河口沉积泥和附着板5种附着基，考察幼虫生长和存活两个指标，结果表明，附着板效果最好。通过两批生产性育苗，亲贝的催产率达到90%，浮游幼虫平均存活率为84.3%，培育出壳长为2.5～3.0mm的稚贝3 180万粒，平均稚贝育成率达到33.1%。

施氏獭蛤；人工育苗；促熟培育；投饵技术；附着基

施氏獭蛤（Lutraria sieboldii Reeve）隶属于瓣鳃纲（Lamellibranchia）异齿亚纲（Heterodonta）帘蛤目（Veneroida）蛤蜊科（Mactridae）獭蛤属（Lutraria），是一种埋栖型双壳经济贝类，主要分布于我国的广东、广西、浙江和台湾等沿海，在日本、东南亚也有分布［1］。近10年来，国内学者研究了其生态习性［2］、性腺发育和生殖周期［3］、融合卵裂和胚胎发育过程［4］、幼虫和稚贝的发育和行为［5］，摸索了人工育苗、中间培育和海区养殖技术［6-7］及遗传多样性［8］。该贝生长快，养殖周期短，肉质鲜美，近年来在中国南方海域具有规模化养殖潜力和市场前景。然而，施氏獭蛤天然种苗匮乏和人工育苗技术尚不成熟，影响了其产业发展。笔者在前人研究基础之上，开展了施氏獭蛤室内规模化人工育苗技术的研究，旨在为该贝类规模化生产提供技术基础。

1　材料与方法

1.1材料

实验于2013年在湛江市遂溪县草谭镇湛江银浪海洋生物技术有限公司贝类种苗场进行。亲贝采自遂溪县北部湾海域，亲贝壳形完整，外观健壮，无损伤，1.5龄，规格（壳长 ×壳高）为（12.38±2.21）cm ×（7.64±1.13）cm，鲜体质量（138.7±15.6）g。实验用饵料在育苗前20 d左右开始培养，种类有湛江等边金藻（Isochrysiszhanjiangensis），牟氏角毛藻（Chaetoceros muelleri），亚心形扁藻（Platymonas subcordiformis），小球藻（Chlorella vulgaris）。附着基为30 cm ×30 cm黑色聚乙烯板。饵料和附着基实验用容器为容积60 L塑料桶，装水50 L。

1.2方法

1.2.1亲贝促熟亲贝促熟在3个规格为3 m ×2.5 m ×1.2 m的水池中进行，池底铺沙厚25 cm。亲贝促熟培育密度100 ind·m-2。培育水温25.5～26.5℃，盐度27.3～28.5。饵料以单胞藻为主，包括湛江等边金藻（5～6 ×104ind·mL-1）、牟氏角毛藻（3～4 ×104ind·mL-1）、亚心形扁藻（1～2 ×104cell·mL-1）、小球藻（2～3 ×104cell·mL-1），并辅以鸡蛋黄、干酵母、和淀粉。各组投饵量以维持水体淡淡的藻色为度，鸡蛋黄、干酵母、淀粉的投喂浓度均为2～3g·m-3，日投饵3～5次。各组每天上午8：00全换水1次，每天检查死贝情况，及时移除死亡贝体以防止污染水质，记录死亡个数。换水后注意观察性腺产卵排精等发育情况。每隔1周各组随机抽取10个亲贝，肉眼观察生殖腺在内脏团表面的覆盖率，以覆盖率达80%为生殖腺成熟。促熟培育时间历时78 d，实验结束后计算每个水池亲贝存活率、成熟率。

1.2.2亲贝催产与受精孵化亲贝产卵池与亲贝促熟培育池相同。采用流水结合升温（将催产池水温升高3℃）刺激进行亲贝催产。雌贝产卵时，在水中呈颗粒状排出，卵子密度可以控制为 5～6ind·mL-1。雄贝排精时，在水中呈烟雾状排出，精子过多时，在排放过程中及时取出雄贝。孵化期间保持微充气，水温25.5～26.5℃，盐度27.3～28.5，催产结束时及时移出亲贝并记录产卵量和受精卵数量。受精率 =（受精卵数/卵子总数）×100%。

1.2.3施氏獭蛤幼虫开口饵料的选择实验当受精卵孵化至D形幼虫时，从第1天D形幼虫至第5天壳顶初期幼虫，观察不同开口饵料对幼虫生长的影响。将池中同一批健康幼虫转移至60 L塑料桶内，初始密度为 3 ind·mL-1。开口饵料的种类及其每次投喂量为湛江等边金藻800～2500 cell·mL-1、小球藻5 000～15 000 cell·mL-1，或混合投喂湛江等边金藻（400～1250 cell·mL-1）+小球藻（2500～7500 cell·mL-1）。每天定时取样观察幼虫摄食情况，根据胃饱和程度适量增减。实验期间水温25.5～26.5℃，pH7.9～8.2，盐度27.3～28.5，每天换水50%，各组均设3个平行组，实验历时5 d。每天随机抽取30个个体测量幼虫壳长。

1.2.4不同饵料组合对施氏獭蛤幼虫生长的影响

以壳顶初期幼虫为实验材料，观察不同饵料对施氏獭蛤壳顶初期幼虫生长的影响。幼虫规格为平均壳长（154.4±4.87）μm、平均壳高（147.7±3.76）μm，实验在匍匐期幼虫期终止。实验在60 L塑料桶中进行，幼虫初始密度2 ind·mL-1，饵料设4种组合：Ⅰ组［湛江等鞭金藻（2 500～20 000 cell·mL-1）+ 小球藻（15 000～30 000 cell·mL-1）］、Ⅱ组［小球藻（25 000～30 000 cell·mL-1）+ 牟氏角毛藻（10 000～ 15 000 cell·mL-1）］、Ⅲ组［牟氏角毛藻（10 000～15 000 cell·mL-1）+ 湛江等鞭金藻（15 000～20 000 cell·mL-1）］、Ⅳ组［湛江等鞭金藻（15 000～20 000 cell·mL-1）+ 亚心形扁藻（1500～10 000 cell·mL-1）］。每天定时取样观察幼虫摄食情况，根据胃饱满程度适量增减。实验期间水温26.5～28.5℃，pH 7.9 ～8.2，盐度27.3 - 28.5，各组每日投喂2次，每天换水50%。实验设3个平行组。每天每组随机测30个幼虫的壳长。

1.2.5不同饵料组合对施氏獭蛤稚贝生长的影响

以匍匐期幼虫为实验材料，观察不同饵料对施氏獭蛤从附着期幼虫至底栖稚贝生长的影响。幼虫规格为平均壳长（566.2±5.68）μm，平均壳高（435.6±4.82）μm。实验在60 L塑料桶中进行，饵料设4种组合：Ⅰ组［湛江等鞭金藻（2 500～20 000 cell·mL-1）+ 小球藻（15 000～30 000 cell·mL-1）］、Ⅱ组［小球藻（25 000～30 000 cell·mL-1）+ 牟氏角毛藻（2 500～15 000 cell·mL-1）］、Ⅲ组［牟氏角毛藻（10 000～15 000 cell·mL-1+ 湛江等鞭金藻（15 000～20 000 cell·mL-1）］、Ⅳ组［湛江等鞭金藻（15 000～20 000 cell·mL-1）+ 亚心形扁藻（1 500～10 000 cell·mL-1）］。每天定时取样观察幼虫摄食情况，根据胃饱满程度适量增减。实验期间水温 26.5 ～28.5℃，pH7.9 ～8.2，盐度27.3 - 28.5，各组每日投喂2次，每天换水50%。实验设3个平行组。每天每组随机测 30个幼虫或稚贝的壳长，实验终止后计算每种饵料培养下施氏獭蛤的生长速度，即生长速率=（实验结束时壳长-实验起始时壳长）/实验天数。

1.2.6不同附着基附苗实验待幼虫发育至匍匐幼虫期时，选择同一批健康幼虫至塑料桶（60 L），初始密度1 ind·mL-1，平均壳长（260.62±12.31）μm、平均壳高（237.83±8.26）μm。设4个不同附着基组进行附苗效果实验，A组［遮光网（遮光率90%，制作成直径6 cm、高30 cm的圆柱形）］、B组［聚乙烯网（将孔径为0.5 cm的深绿色聚乙烯网卷成直径6 cm、高30 cm的圆柱形）］、C组［细沙（粒径150～250 μm）］、D组［河口沉积泥（粒径2～3 μm）］，E组［附着板，黑色聚乙烯塑料制成边长30 cm×30 cm的正方形］。各组均设3个平行。实验期间，水温26.5～28.5℃，盐度27.3～28.5。饵料为湛江等鞭金藻（5 000～20 000 cell·mL-1·d-1）、小球藻（15 000～30 000 cell·mL-1·d-1）、角毛藻（5 000 ～15 000 cell·mL-1·d-1）、亚心形扁藻（3000～10 000 cell·mL-1·d-1），每组每次混合投喂4种饵料，每日2次，投饵量根据胃饱满程度适量增减。每天用虹吸法换水50%，每2 d随机抽取30个稚贝测量壳长、壳高。实验共进行28 d。实验结束后统计各组稚贝数量（包括附着在桶底和桶壁上的个体）及壳长，育成率 =（实验结束稚贝数量/实验开始匍匐幼虫数量）×100%，平均日生长率（μm·d-1）= ［（实验结束稚贝平均壳长 - 实验开始匍匐幼虫壳长）/实验时间］×100%。

1.2.7生产性幼虫培育生产性育苗池规格为底面积24 m2、高1.3 m的水泥池。幼虫发育到D形幼虫时，采用43 μm孔径筛绢网进行倒池，幼虫密度3～4 ind·mL-1，开始投喂湛江等边金藻，投饵量500～2000 cell·mL-1·d-1，每天定时取样观察幼虫摄食情况，根据胃饱满程度适量增减。水温 26.5 ～28.5℃，盐度27.3～28.5，pH值7.9～8.2。每池16个气石微波状连续充气，每天投料前换水一次，每次换水50%，壳顶初期幼虫至匍匐期幼虫阶段，投喂小球藻+牟氏角毛藻，附着期幼虫至稚贝期阶段，投喂湛江等鞭金藻+亚心形扁藻，投饵密度如前所述。每天上午8：00左右测量壳长、密度、温度和盐度。实验期间统计的指标包括:催产率［（产卵亲贝个数/亲贝总数）×100%］，浮游幼虫期存活率［（壳顶后期幼虫数量/D形幼虫数量）×100%］，稚贝育成率 ［（稚贝数/D形幼虫数）×100%］，以及计算出苗量和幼虫规格。

1.3数据处理

实验设3个重复组，数据统计采用SPSS 17.0进行单因素方差（ANOVA）分析，作图采用EXCEL2003。

2　结果与分析

2.1亲贝促熟培育效果

施氏獭蛤亲贝促熟，采用池底铺沙，培育密度100 ind·m-2，饵料以单胞藻为主，辅以鸡蛋黄和淀粉，在水温25.5～26.5℃，盐度27.3 - 28.5条件下，亲贝促熟效果如表1所示，3组亲贝平均存活率89.7%，雄贝和雌贝平均性腺成熟率分别为 89.1%和78.7%，亲贝平均产卵量126万粒/个，平均受精率93.4%。

表1　施氏獭蛤亲贝促熟效果Table 1　Conditioning effect for parental Lutraria sieboldii

2.2施氏獭蛤胚胎发育和形态特征

在水温25.5～26.5℃，盐度27.3～28.5条件下，施氏獭蛤胚胎发育和形态特征如表2所示。受精后15min和25min，分别释放第一极体和第二极体。受精后35min，受精卵进行第一次不等分裂，分裂前细胞质流向植物极，形成第一极叶，接着不等纵裂形成大小二个分裂球，即为2细胞期。细胞继续卵裂，分别在50min、1 h 5min、1 h 35min形成4细胞期、8细胞期和16细胞期。在3 h 50min出现囊胚期，大分裂球逐渐陷入胚体之内，小分裂球包围大分裂球，形成一囊状的结构，囊胚的表面布有纤毛，开始游动。6h25min形成担轮幼虫，胚体渐变梨形，顶端膨大隆起，长一束纤毛，为顶纤毛束，其中央有一根粗大的鞭毛，长约80 μm，胚体的上半腰长一圈纤毛环。受精后14 h进入面盘幼虫期，胚体两侧覆盖2片较硬而透明的半圆形壳，呈“D”形，两壳在背部成直线铰合，胚体顶端呈椭圆盘状，形成运动器官面盘，其四周细胞被有纤毛，消化道器官分化尚不完善。

表2　施氏獭蛤胚胎发育时间和特征Table 2　Developmental time and characteristics of embryo of Lutraria sieboldii

续表2（Continued）

2.3不同开口饵料对幼虫（前5 d）生长的影响

投喂不同开口饵料，施氏獭蛤面盘幼虫（前5 d）生长曲线如图1所示。在第5天时测量结果表明，湛江等边金藻组，壳长为130 μm，湛江等边金藻 +小球藻组，壳长为118 μm，小球藻组，壳长为105 μm，方差分析显示，3组饵料间对面盘幼虫的生长影响差异显著（P＜0.05）。

图1　不同开口饵料对幼虫（5d）生长的影响Fig.1　Effects of different opening diets on growth for veliger（5 d）

2.4不同饵料组合对幼虫生长的影响

如图 2所示，投喂湛江等鞭金藻+小球藻、小球藻+牟氏角毛藻、牟氏角毛藻+湛江等鞭金藻、湛江等鞭金藻+亚心形扁藻，平均壳长分别达到274.7 μm、321.3 μm、262 μm、257.7 μm。其中，以投喂小球藻+牟氏角毛藻，施氏獭蛤幼虫生长速率最快，方差分析表明，与其他各组差异显著（P＜0.05）。

图2　不同饵料组合对施氏獭蛤壳顶初期幼虫生长的影响Fig.2　Effects of differernt diet groups on growth of Lutraria sieboldii early umbo larvae

2.5不同饵料组合对稚贝生长的影响

如图3所示，4种饵料组合Ⅰ组（湛江等鞭金藻+小球藻）、Ⅱ组（小球藻+牟氏角毛藻）、Ⅲ组（牟氏角毛藻+湛江等鞭金藻）、Ⅳ组（湛江等鞭金藻+亚心形扁藻），对稚贝生长产生显著影响，在实验结束时，测得壳长生长速率分别为201 μm·d-1、159.2 μm·d-1、156.2 μm·d-1、209.8 μm·d-1。其中，Ⅳ组（湛江等鞭金藻+亚心形扁藻）饵料对该贝类该阶段的生长影响最为显著（P＜0.05），其次为Ⅰ组（湛江等鞭金藻+小球藻）饵料组合。

2.6不同附着基的附苗效果

实验结果表明，不同附着基对施氏獭蛤幼虫的生长和存活产生显著影响（P＜0.05）。从图4可见，遮光网、聚乙烯网片、细砂、河口沉积泥和附着板5种附着基幼虫壳长生长率分别为 127.5、155.1、172.5、270.7和252.4 μm·d-1，其中以河口沉积泥和附着板幼虫生长最快。从图5可见，采用遮光网、聚乙烯网片、细砂、河口沉积泥和附着板作为附着基培育幼虫，其存活率分别为 17.4%、23.1%、46.7%、14.5%、62.6%。其中以细砂和附着板为附着基培育效果最好。综合考虑生长和存活两个指标，施氏獭蛤幼虫附着阶段采用附着板作为附着基培育效果最好。

图3　不同饵料组合对施氏獭蛤稚贝生长速率的影响Fig.3　Effects of different diet groups on growth rate of Lutraria sieboldii spat

2.7生产性育苗

如表3所示，通过2批生产性育苗，对亲贝的催产率达到90%，浮游幼虫平均存活率为84.3%，培育出壳长为2.5～3.0mm的稚贝3 180万粒，平均稚贝育成率达到33.1%。

图4　不同附着基对施氏獭蛤幼虫壳长日生长率的影响Fig.4　Effects of different attachment substance on daily growth rate for larvae of Lutraria sieboldii

图5　不同附着基对施氏獭蛤幼虫存活率的影响Fig.5　Effects of different attachment substance on survival rate for larvae of　Lutraria sieboldii

表3　施氏獭蛤生产性育苗效果Table 3　Productive breeding effects of Lutraria sieboldii

3　讨　论

3.1亲贝促熟

双壳贝类的人工育苗是指亲贝的选择、蓄养、诱导排放精卵、受精、幼虫培育及采苗过程，因此，亲贝促熟无疑是人工育苗成败的关键之一［9］。目前亲贝选择主要来源于海区天然亲贝。这种方法挑取的亲贝性腺发育不同步，经常出现催产失败；或者由于强烈刺激排出，精卵成熟度不够而导致胚胎畸形率高、幼虫体质差、生长缓慢、不能抵御外界环境的变化而中途夭折。本研究在亲贝催产前约2.5～3个月，挑取施氏獭蛤亲贝，避免选择个体太小和太大个体，同时保证个体健壮、无创伤、无寄生虫和病害。亲贝个体太小产卵量少，个体太大多为老熟个体，对诱导刺激反应缓慢，卵子质量较差。采用有底质（池底铺沙厚25 cm）培育，符合其埋栖生活习性。使用金藻、硅藻和绿藻的混合投喂，投喂密度依照藻类细胞大小，坚持少量多次的原则，这与皱肋文蛤［10］、古蚶［11］、菲律宾蛤仔［12］人工促熟类似。值得注意的是，在亲贝促熟期间，投喂了强化饵料鸡蛋黄。生殖腺发育的好坏是贝类繁殖成败的关键，其中脂质的积累是影响生殖腺发育的主要因素之一，因为脂质是贝类生殖腺发育的重要能源和结构物质，脂类成分和脂肪酸组成在生殖腺发育过程中经历了重要的量变，这些变化直接影响性细胞的质量，从而影响胚胎发育和卵子孵化，同时在生殖过程、生化和物质代谢等方面均有很重要的作用［13］。研究表明，亲贝促熟时通过强化饵料蛋黄的投喂不仅可以人为加强亲贝营养，增强其体质，让亲贝逐渐适应育苗环境，降低诱导催产过程中对亲贝的伤害和催产后的死亡，而且有效地促进了亲贝的性腺发育，保证大批亲贝集中产卵排精［14-15］。本研究亲贝平均存活率、雄贝和雌贝平均性腺成熟率、亲贝平均产卵量和平均受精率等指标均较高，可能与亲贝促熟过程中投喂饵料多样化，营养均衡全面有关。此外，亲贝促熟期间保持连续充气，适量换水，及时清理粪便等措施保证了水质新鲜和换水前后水温、盐度的稳定，避免了流产的发生。

3.2幼虫发育不同阶段的投饵技术

幼虫培育是指D形幼虫开始到幼虫变态为稚贝的阶段，幼虫培育技术包括选优、投饵、换水、倒池与清底、充气、抑菌、理化因子观测等［9］。过去有关贝类幼虫发育不同阶段饵料种类及搭配的研究较少［16-18］。本研究着重开展了幼虫发育不同阶段的投饵技术，包括开口饵料的选择、幼虫浮游阶段和稚贝期。实验结果表明，D形幼虫开口饵料以湛江等边金藻最佳，经过5 d的培育，湛江等边金藻组壳长生长分别比湛江等边金藻+小球藻组和小球藻组提高10.17%和23.81%。这与D形幼虫消化器官的结构和单胞藻的结构有关。D形幼虫期消化器官分化尚未完善，胃和消化盲囊不发达，口径较小，要求饵料浮于水中，易被摄食，容易消化，营养价值高。湛江等边金藻直径不超过10 μm，无细胞壁，具有鞭毛浮游性强，而小球藻缺乏鞭毛浮游性差，且具有细胞壁不易消化。

施氏獭蛤从D形幼虫发育成匍匐幼虫约需1周时间，本研究采用湛江等鞭金藻+小球藻、小球藻+牟氏角毛藻、牟氏角毛藻+湛江等鞭金藻、湛江等鞭金藻+亚心形扁藻等4种不同饵料组合，观察了对幼虫生长的影响。结果显示，投喂小球藻+牟氏角毛藻，施氏獭蛤幼虫生长速率最快，壳长比湛江等鞭金藻+小球藻、牟氏角毛藻+湛江等鞭金藻、湛江等鞭金藻+亚心形扁藻3个组合分别提高了17%、22.6%和24.7%。在此阶段，幼虫从浮游阶段转为匍匐阶段，运动能力较弱，其对微藻的滤食效应主要取决于微藻浓度、运动能力及其在空间中分布格局。本研究显示施氏獭蛤幼虫对小球藻+牟氏角毛藻的滤食明显强于其他3种饵料组合，究其原因，小球藻和牟氏角毛藻均缺乏鞭毛，个体相对较小，运动能力相对较弱，且其初始浓度相对较高，导致其在水体中分布相对较为均匀而更易被幼虫高效滤取。与其他单胞藻相比，牟氏角毛藻具有耐高温、繁殖速度快、抗污染能力强等优点，同时藻体内含有大量的脂肪酸、蛋白质等营养物质，是海产经济动物一种理想的饵料生物，在对虾类育苗、梭子蟹育苗以及泥蚶、牡蛎等贝类育苗生产中，作为幼体的优质饵料被广泛应用［19-22］。

幼虫附着到稚贝培育阶段，饵料投喂采用与幼虫阶段相似的4种饵料组合，结果显示，投喂湛江等鞭金藻+亚心形扁藻效果最好，与湛江等鞭金藻+ 小球藻、小球藻+牟氏角毛藻、牟氏角毛藻+湛江等鞭金藻3个组合相比，壳长生长速率分别提高了4.3%、31.8%和34.3%，这可能与该阶段幼虫的背光习性增强，其摄食量在夜间更大有关。亚心型扁藻在夜间极易下沉，提高了该阶段幼虫和稚贝的摄食机率。从实验结果来看，湛江等鞭金藻+小球藻组合对该阶段的生长效果也较好。

3.3施氏獭蛤幼虫的附苗技术

双壳类的成体无论固着生活型、附着生活型，还是埋栖生活型，其生命史的早期都要经过足丝附着生活的阶段，称为附着期。施氏獭蛤属于底栖贝类，其后期面盘幼虫在变态时并不从浮游生活直接转为底栖生活，而是在从浮游生活转为底栖生活之间有一个7～9 d的附着期。据观察，适时在水体中投放附着器，后期幼虫可及时变态进入附着期；池底不投放任何附着器，幼虫也可以附着在池壁和池底，但进入附着期的时间将会推迟3～5 d。如果不投放任何附着器，幼虫大量附着在育苗池的底部，而育苗池底部的粪便、死亡的藻类、原生动物、细菌等不利于附着幼虫的存活、生长，所以在施氏獭蛤幼虫变态期应适时投放附着器可提高幼虫的成活率［6］，同时，附着基的种类是影响贝类幼虫变态和稚贝生长的重要因素［23-27］。实验结果表明不同附着基上幼苗的日生长率和成活率差异显著，从幼虫壳长日生长率来看，河口沉积泥＞附着板＞细砂＞聚乙烯网片＞遮光网，从存活率来看，附着板＞细砂＞聚乙烯网片＞遮光网＞河口沉积泥。通过考察生长和存活两个指标，施氏獭蛤幼虫附着阶段，采用附着板作为附着基培育效果最好。以河口沉积泥作为附着基，其生长率要高出其他附着基组，这可能与施氏獭蛤附着幼虫和稚贝的生长不仅需要饵料的补充，而且与沉积泥中含有丰富的微量元素供附着幼虫和稚贝摄取有关，河口沉积泥促进附着幼虫和稚贝生长的机制有待进一步研究。然而，从存活率来看，河口沉积泥作为附着基，附着幼虫和稚贝的存活率最低，这与沉积泥中沉积的附着幼虫和稚贝排泄的粪便和死亡的藻类，容易滋生原生动物和细菌，水质易于恶化有关。

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（责任编辑：陈庄）

Studies on Large Scale Artificial Breeding of Lutraria sieboldii

WANG Bin1，LI Zhi-min1，LIU Zhi-gang1，LIUFU Shao-min2，FENG Xiao-long2
（1.Fisheries College of Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524025，China；2.Zhanjiang Silver Wave Marine Biotechnology Company Ltd.，Zhanjiang 524022，China）

A large scale artificial breeding of Lutraria sieboldii was conducted in 2013.The results showed that by adopting methods of bottom culture in sand，feeding with microalgae，egg yolk and starch，the survival rate of parent shellfish reached 89.7%.Gonadal maturation rates of male and female parent shellfish were 89.1% and 78.7% respectively，and the amount of spawned eggs of per parent shellfish was 1.26 million，of which the fertilization rate reached 93.4%.Under the condition of water temperature of 25.5-26.5 and water salinity of 27.3-28.5，the first polar body（pb1）and the second polar body（pb2）were released respectively in15min and 25min after fertilization.About 35min after eggs fertilization，the second cell stage was formed.As the cells divided，their number continued to increase.After about 4 h 40min，6h 25min and 14 h ，gastrula，trochophore and D-shaped larvae was formed..Shell lengths of Lutraria sieboldii veliger larvae increased with the time extension by fed with three different diets，including Isochrysis zhanjiangensis，Isochrysiszhanjiangensis plus Chlorellavulgaris，and Chlorella vulgaris，reaching 130μm，118μm and 105μm.Cultivation effect was best with Isochrysis zhanjiangensis as opening diet after 5 days cultivation.Lutraria sieboldiiv larvaes increased markedly by using four diets including Isochrysis zhanjiangensis plus Chlorella vulgaris，Chlorella vulgaris plus Chaetoceros muelleri，Chaetoceros muelleri plus Isochrysis zhanjiangensis，Isochrysis zhanjiangensis plus Platymonas subcordiformis.Compared with other 3 diets，Chlorella vulgaris plus Chaetoceros muelleri was best for larvae cultivation from early umbo larvae to creeping larvae.The same 4 diets had markedly effects on Lutraria sieboldii from attachment larvae to spat.Compared with other 3 diets，zhanjiangensis，Isochrysiszhanjiangensis plus Platymonas subcordiformis were best for larvae cultivation，with growth rate of shell lengths of 209.8 μm·d-1.Secondly，growth rate of shell length was 201μm·d-1while fed Isochrysiszhanjiangensis plus Chlorella vulgaris.Growth and survival of Lutraria sieboldii larvae was affected by different attachment substances including shading network，polyethylene network film，sediment mud and attachment plate.Through observing growth and survival，attachment plate was the best attachment substance for Lutraria sieboldiiv larvae cultivation，with the growth rate of 252.4 μm·d-1andthe survival rate of62.6%.Through the two batch of seedling production，induced spawning rate of parent shellfish reached 90%，the average survival rate of larvae was 84.3%.Total spats（shell length 2.5-3.0mm）of 3180 were cultivated，and breeding rate of spat reached 33.1%.

Lutraria sieboldii；artificial breeding；condition；feeding technique；attachment substance

S968.31

A

1673-9159（2015）01-0035-08

2014-12-05

广东省科技厅产学研项目（2011B090400216）；广东省海洋与渔业局项目（A201001H01）；高校重大科研成果培育计划项目（GDOU2013050326）

王斌，2015届水产养殖本科生。Email：wangbinscyz@163.com

栗志民，副教授。Email：lizhimin811@163.com