调节活化正常T细胞表达与分泌趋化因子与子宫内膜异位症的关系

谢 平

（广东省佛山市顺德区桂洲医院，广东 佛山 528305）

调节活化正常T细胞表达与分泌趋化因子与子宫内膜异位症的关系

谢 平

（广东省佛山市顺德区桂洲医院，广东 佛山 528305）

目的 分析RANTES（调节活化正常T细胞表达与分泌趋化因子）在子宫内膜异位症患者发病中的作用与价值。方法 选取2012年2月至2014年2月于我院接受治疗的40例子宫内膜异位症患者为观察组，同时选取同期于我院接受宫内节育器（IUD）治疗的20例正常子宫内膜患者为对照组，检测两组患者子宫内膜标本中RANTES的表达水平。结果 经受IL-1β刺激2 d、3 d后观察组患者病理标本细胞中RANTES蛋白表达水平明显高于对照组，同时观察组患者病理标本细胞上清液对单核细胞的趋化指数呈明显上升趋势，与对照组相比差异显著（P＜0.05）。结论 子宫内膜异位症患者RANTES蛋白表达水平的差异是导致子宫内膜异位病灶形成的重要原因，需在临床上引起广泛重视。

RANTES；子宫内膜异位症；调节活化正常T细胞；趋化因子

子宫内膜异位症多发于生育年龄妇女群体中，据相关统计资料显示，其发病率高达15%左右，临床多表现为痛经、盆腔包块、性交痛等症状，且超过50%的患者可能出现不孕等表现［1］，对患者的身心健康可能造成严重威胁。目前临床上对子宫内膜异位症的发病原因尚不明确。大量研究观点表明，子宫内膜异位症是多项因素相互作用所致，且与人体调节活化正常T细胞表达及分泌趋化因子的作用存在一定的相关性［2］。基于此，为进一步分析RANTES与子宫内膜异位症的相关性，我院对近年来收治的40例患者进行了研究，报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料：选取2012年2月至2014年2月于我院接受治疗的40例子宫内膜异位症患者为观察组。所有患者均行腹腔镜手术治疗，均为女性，年龄在25～44岁，平均年龄为（35.4±2.1）岁；按照美国生育协会修订的腹腔镜诊断内异症（rAFS）的分期标准将其分为Ⅰ期14例，Ⅱ期19例，Ⅲ期7例。选取同期于我院接受IUD治疗的20例正常子宫内膜者为对照组，年龄24～43岁，平均年龄为（34.9±1.8）岁。入选研究的两组对象在性别、年龄等基础资料的对比方面并不存在显著差异（P＞0.05），具有较强的可比性。

1.2方法：①标本处理：观察组患者于手术治疗过程中取患者异位囊肿壁病理组织，面积控制在2 cm×2 cm左右。对照组对象则于无菌操作下，刮取子宫内膜。并于两组标本中分别置入链霉素与青霉素行细胞培养。②实验方法：观察组标本采用洗涤液冲洗2次后，将其体积剪碎至1 mm×1 mm×1 mm。并注入1.25 g/LⅠ型胶酶，于37 ℃温度条件下，消化1 h，后过滤，离心5 min，待细胞沉淀后重复培养洗涤。采用玻片法，对加波形蛋白行免疫组化染色处理，随后鉴定标本间质细胞的纯度。将细胞接种于孔板中，待融合度高达90%时，加入低血清培养2 d，并于培养液中加入浓度为10 μg/L的白细胞介素-1β（IL-1β），持续培养，分别于1 d、2 d及3 d后收集标本上清及细胞液，行常规检测处理。采取组织和细胞总RNA提取法（TRIzol）将细胞总RNA提取出，并实施扩增处理，采用内参条带光密度与特异扩增条带为参数实施半定量分析处理。同时采用酶联免疫吸附检测法测定标本上清中RANTES表达水平。采用小室实验法检测标本间质细胞上清液对其单核细胞的趋化活性水平。

1.3统计学方法：采用SPSS19.0统计学软件对实验数据进行处理与分析，计量资料选用（）表示，组间对比进行t检验，以P＜0.05时为有显著性差异和统计学意义。

2　结 果

2.1两组患者病理标本中RANTES蛋白表达水平对比：经IL-1β刺激1 d后，观察组与对照组细胞内RANTES蛋白表达水平并无显著差异（P＞0.05）；2 d、3 d后观察组患者病理标本细胞中RANTES蛋白表达水平明显高于对照组，组间对比差异显著（P＜0.05），见表1。

表1　两组患者病理标本中RANTES蛋白表达水平对比［（），ng/L］

表1　两组患者病理标本中RANTES蛋白表达水平对比［（），ng/L］

组别　　例数　RANTES蛋白水平1 d　2 d　3 d观察组　40　50.89±7.25　133.61±9.42266.88±8.39对照组　20　45.71±8.62　47.45±9.95　51.76±8.61 t -0.987　29.527　42.986 P -　　＞0.05　　＜0.05　　＜0.05

2.2两组标本单核细胞趋化活性检测结果对比：在经受IL-1β刺激3 d后，观察组患者病理标本细胞上清液对单核细胞的趋化指数呈明显上升趋势，与对照组相比差异显著（P＜0.05），见表2。

表2　两组患者病理标本单核细胞趋化活性检测结果对比（）

表2　两组患者病理标本单核细胞趋化活性检测结果对比（）

组别　　例数　　透膜细胞数　　趋化指数观察组　40　63.62±2.61　12.73±0.62对照组　20　10.91±3.10　2.17±0.64 t -15.677　9.649 P -＜0.05　　＜0.05

3　讨 论

近年来有大量研究文献证实，子宫内膜异位症患者其异位子宫内膜的黏附、侵袭伴随着人体激素的变化而产生相关的炎性反应，同时也是患者子宫内膜异位病灶形成的重要原因［3］。但临床上对逆流经血在人体子宫内膜碎片中发挥的作用尚且存在一定的争议。有部分观点认为，子宫内膜异位症患者其在位内膜可能发生形态及基因表达方面的变化，但在子宫内膜逆流于人体腹腔后，可能导致大量细胞因子的表达异常，导致子宫内膜避开人体的免疫监视反应，进而促使其种植、繁衍，引起子宫内膜异位症的产生［4］。

调节活化T细胞与分泌趋化因子是趋化因子CC亚家族中的代表因子之一，主要由人体巨噬细胞、活性T细胞及子宫内膜细胞分泌而出，表达于血管内皮细胞、单核细胞、T细胞及嗜酸粒细胞中。并通过与相关受体结合，参与到免疫细胞的活化反应，并在机体的炎性反应中起到关键的作用。有部分研究表示，子宫内膜异位症患者腹腔液中嗜酸粒及巨噬细胞的数量、RANTES蛋白表达水平显著高于正常对照组，与本组实验研究结果基本一致［5］。RANTES蛋白因子是人体巨噬细胞中特异性较高的激活因子之一，并经由输卵管逆流至人体腹腔，与活化细胞发生反应，分泌出炎性介质，促使人体内异位子宫内膜的生成，导致病灶的形成。本组研究中通过对子宫内膜异位症与正常子宫内膜患者进行对照分析，结果提示，经受IL-1β刺激2 d、3 d后观察组患者病理标本细胞中RANTES蛋白表达水平明显高于对照组，同时观察组患者病理标本细胞上清液对单核细胞的趋化指数呈明显上升趋势，与对照组相比差异显著（P＜0.05），同时也进一步证实子宫内膜异位症患者RANTES蛋白表达水平的差异是导致子宫内膜异位病灶形成的重要原因，需在临床上引起广泛重视。

［1］范小斌，曹引丽，蔺小贤，等.RANTES在子宫内膜异位症在位内膜及异位内膜的表达及其意义［J］.实用妇产科杂志，2012，28（12）：1035-1038.

［2］吴亚玲，郝敏.趋化因子在子宫内膜异位症发病机制中的作用［J］.国际妇产科学杂志，2009，36（5）：352-355.

［3］黄红艺，张凤兰，张团英，等.CXCL10在子宫内膜异位症患者血清及腹腔液的表达及意义［J］.实用医学杂志，2011，27（8）：1394-1395.

［4］林敏，王溢，董克，等.子宫内膜异位症患者腹腔液中NF-κB和趋化因子MCP-1、RANTES的表达［J］.实用医学杂志，2014，11（4）：577-579.

［5］高桂芹，林琬君，李宝森，等.子宫内膜异位症患者血清与腹腔液中RANTES水平及其临床意义［J］.天津医药，2013，21（7）：654-657.

R711.71

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1671-8194（2015）26-0057-02