Pax-8在卵巢腺癌中的表达及其意义

汪春年　陈洁　夏朝霞　吴晓英

1.浙江省宁波市临床病理诊断中心，浙江宁波315031；2.中南大学湘雅医学院，湖南长沙410008

Pax-8在卵巢腺癌中的表达及其意义

汪春年1陈洁1夏朝霞1吴晓英2

1.浙江省宁波市临床病理诊断中心，浙江宁波315031；2.中南大学湘雅医学院，湖南长沙410008

目的检测Pax-8在卵巢腺癌组织中的表达状况并分析Pax-8在卵巢腺癌中的诊断价值。方法收集2011年6月～2015年7月宁波市临床病理诊断中心卵巢腺癌手术标本蜡块，其中卵巢原发性腺癌52例、卵巢转移性腺癌31例。采用免疫组化检测癌组织中Pax-8的表达情况。结果卵巢原发性腺癌组织中Pax-8阳性表达率为82.7%，Pax-8在浆液性腺癌、内膜样腺癌、透明细胞腺癌、黏液性腺癌中的阳性率分别为96.8%、100.0%、100.0%、33.3%。卵巢原发性腺癌中Pax-8阳性表达与病理分级、临床分期及肿瘤复发/转移无关（P＞0.05）。Pax-8在卵巢转移性腺癌中均未见阳性表达，与原发性腺癌比较，差异有高度统计学意义（P＜0.01）。结论Pax-8在卵巢原发性腺癌中高水平表达，表现出高敏感性和高特异性，可作为卵巢原发性腺癌的判断指标之一。

卵巢腺癌；Pax-8；原发性；转移

卵巢腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，早期不容易发现，多数发现时已出现广泛的浸润和转移，预后差。临床工作中，经常碰到恶性腹水或淋巴结癌转移等晚期癌症患者，为寻求最佳治疗方案，需要依靠免疫标记寻找癌的原发灶［1］。卵巢腺癌的常用的免疫标志物包括ER、PR、CK7、WT-1等，但这些标志物受敏感性及特异性的影响，有一定的局限性。近年来研究发现Pax-8在卵巢癌中的表达表现出高敏感性和特异性，除甲状腺、肾脏外，在乳腺以及其他非妇科原发肿瘤中几乎不表达［2］。目前国内文献中，可见数篇有关Pax-8在卵巢浆液性肿瘤中的表达研究［3-4］，本研究采用免疫组化方法检测Pax-8在卵巢腺癌中的表达，探讨其在卵巢腺癌诊断中的价值。

1　资料与方法

1.1一般资料

收集2011年6月～2015年7月宁波市临床病理诊断中心卵巢腺癌52例患者的手术标本蜡块。患者年龄29～81岁，平均（52±1）岁，术前均未接受化疗或放疗。其中浆液性腺癌31例，子宫内膜样腺癌4例，黏液性腺癌12例，透明细胞腺癌5例；按FIGO分期标准：Ⅰ期13例，Ⅱ～Ⅳ期39例。患者随访至2015年4月（随访时间为3～44个月），8例出现复发/转移，其中2例因广泛转移死亡，44例未见复发转移。卵巢转移性腺癌31例，年龄30～69岁，平均（46±1）岁，其中胃肠道21例，阑尾5例，乳腺2例，肺1例，胆囊/胰胆管2例。

1.2方法

所有标本均经10%中性福尔马林固定，常规石蜡包埋制片，Roche公司Benchmark XT全自动免疫组化检测仪进行免疫组化染色。所有实验均设置阴性及已知阳性对照。试剂一抗兔抗人Pax-8抗体购于迈新生物技术有限公司，二抗及DAB均为Roche公司Benchmark XT配套试剂。

1.3结果判定

Pax-8染色以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性判断标准。每张切片选取10个高倍视野，每高倍视野计数200个癌细胞，按阳性细胞所占百分比确定Pax-8表达情况：肿瘤细胞阳性数＜10%为免疫反应阴性（-），肿瘤细胞阳性数≥10%为免疫反应阳性（+）。

1.4统计学方法

采用统计软件SPSS 17.0对数据进行分析，正态分布计量资料以均数±标准差表示，两独立样本的计量资料采用t检验；计数资料以率表示，采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

Pax-8在卵巢原发性腺癌中阳性表达率为82.7%（43/52），其中浆液性腺癌中阳性表达率为96.8%（30/31）（图1A），黏液性腺癌中阳性表达率为33.3%（4/12）（图1B），透明细胞腺癌中阳性表达率为100.0%（5/5）（图1C），子宫内膜样腺癌中阳性表达率为100.0%（4/4）（图1D）。Pax-8在31例卵巢转移性腺癌中均未见阳性表达（图1E）。原发性卵巢腺癌中Pax-8的表达与病理分级、临床分期及肿瘤复发/转移均无关（P＞0.05）（表1）。卵巢原发性腺癌中Pax-8的阳性表达与转移性腺癌中的阳性表达相比较，差异有高度统计学意义（P＜0.01）（表2）。

3　讨论

Pax-8蛋白是转录因子的成对盒基因（PAX）家族成员之一，为核转录因子，调控甲状腺、肾脏、副中肾管系统等的发育。近年来研究发现Pax-8与器官系统特异性标记联合，对于未知原发部位转移癌原发灶的查找、或某些上皮性肿瘤的鉴别有一定的意义。Pax-8在甲状腺、甲状旁腺、胸腺、副中肾管、肾脏等上皮性肿瘤中表达［5-6］。但Pax-8在正常卵巢表面上皮、包涵囊肿上皮中不表达，输卵管上皮中的分泌细胞表达Pax-8，这一现象更支持卵巢癌来源于苗勒系统，也支持高级别浆液性腺癌来源于输卵管伞端这一假说。

本研究的主要目的是探讨Pax-8在卵巢腺癌中的表达情况。本研究发现Pax-8在卵巢原发性腺癌中的阳性表达率为82.7%，在卵巢腺癌中的表达具有较高的敏感性。Pax-8在浆液性腺癌、内膜样腺癌及透明细胞腺癌中的阳性率均高于95%，而黏液性腺癌中Pax-8阳性表达率低。Pax-8的表达与卵巢原发性腺癌的分化程度、临床分期、肿瘤复发/转移不相关。本研究结果与相关文献报道相一致［3-4，7-8］。邢宝玲等［9］研究发现在卵巢输卵管、宫体、子宫颈的浆液性腺癌、交界性浆液性肿瘤、子宫内膜样腺癌、透明细胞腺癌中的表达均为100%，推断Pax-8是苗勒管腺上皮敏感且特异性的标志物，对女性生殖道上皮性肿瘤的鉴别诊断起重要作用。

图1　Pax-8在不同类型卵巢癌组织中的表达情况（EnVision，200×）

表1　卵巢原发性腺癌中Pax-8的表达与临床病理参数的关系（例）

表2　卵巢原发性腺癌与转移性腺癌中Pax-8的表达情况（例）

Zhao等［10］收集了68例确诊为卵巢癌转移的恶性腹水病例，联合运用Pax-8和WT-1两种免疫标志物，发现Pax-8阳性率为85%，WT-1阳性率为82%，Pax-8/WT-1两者的总阳性率为94%，笔者认为同时检测恶性腹水细胞蜡块中的Pax-8和WT-1的表达，可提高卵巢癌原发性检测的敏感性。Pax-8在鉴别上皮样间皮瘤与卵巢浆液性腺癌与其他肿瘤标志物相比，具有较高的敏感性和特异性［11-13］。

为研究Pax-8蛋白在卵巢原发性腺癌中表达的特异性，本研究同时分析了31例卵巢转移性腺癌中Pax-8蛋白的表达情况，结果显示Pax-8蛋白在常见的卵巢转移性腺癌中不表达，与原发性腺癌中的表达相比较，差异有高度统计学意义（P＜0.01），表明Pax-8蛋白在卵巢原发性腺癌中的表达具有很高的特异性。

因为苗勒系统的特殊性，Pax-8在卵巢腺癌鉴别诊断中有着重要的作用，特别是与进展期乳腺癌、恶性间皮瘤等的鉴别。Pax-8阳性支持卵巢原发，但Pax-8阴性不能完全排除卵巢来源。对于卵巢黏液性腺癌的诊断，临床病理诊断特别注意要与卵巢的转移性腺癌鉴别，以前常用的免疫组化鉴别指标包括：ER、PR、CK7、CK20、Villin、CDX-2、WT-1等。结合本研究结果，建议加做Pax-8检测，如果Pax-8阳性更支持卵巢原发性黏液性腺癌的诊断［14-15］。Pax-8对苗勒管源性肿瘤具有很高的敏感性及特异性，可作为其诊断及鉴别诊断有用的标志物［16-18］。

本研究结果显示，Pax-8在卵巢原发性腺癌中的表达具有较高的敏感性和特异性，尽管Pax-8的表达与肿瘤分化、FIGO分期及肿瘤复发/转移没有相关性，但在实际临床病理诊断工作中有一定的应用意义。对恶性腹水患者，Pax-8联合其他免疫标记对判断肿瘤的来源有一定的价值［19］，这也是本研究组今后研究的方向。沉默卵巢肿瘤细胞系中Pax-8的表达可有效促进肿瘤细胞的死亡［20］，提示Pax-8在卵巢肿瘤中扮演着重要的促癌作用，可能为卵巢癌的生物治疗提供新靶点。

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Expression of Pax-8 in ovarian adenocarcinoma and its significance

WANG Chunnian1CHEN Jie1XIA Zhaoxia1WU Xiaoying2
1.Ningbo Diagnostic Pathology Center，Zhejiang Province，Ningbo315031，China；2.Xiangya School of Medicine，Central South University，Hu'nan Province，Changsha410008，China

Objective To investigate the expression of Pax-8 in human ovarian adenocarcinoma and analyze the diagnostic values of Pax-8 expression.Methods From June 2011 to July 2015，in Ningbo Diagnostic Pathology Center，the paraffin blocks of ovarian adenocarcinoma were collected，52 cases were ovarian primary adenocarcinoma and 31 cases were metastatic adenocarcinoma.The expression of Pax-8 was measured by immunohistochemical technique. Results The positive expression rates of Pax-8 in ovarian cancer were 82.7%，the positive expression rates of Pax-8 in ovarian serous，mucinous，clear cell adenocarcinoma，endometrioid adenocarcinoma were 96.8%，100.0%，100.0%，33.3%respectively.There were no relationship between the expression of Pax-8 and pathological grades，clinical stage and tumor recurrence/metastasis（P＞0.05）.There was no positive expression of Pax-8 in ovarian metastatic adenocarcinoma，compared with ovarian primary，the differences were statistically significant（P＜0.01）.Conclusion The expression of Pax-8 in ovarian adenocarcinoma has show high sensibility and specificity，which may have a definite value in judging primary ovarian carcinoma.

Ovarian adenocarcinoma；Pax-8；Primary；Metastatic

R737.31

A

1673-7210（2015）12（b）-0068-03

2015-08-12本文编辑：苏畅）

国家自然科学基金项目（81172469）；浙江省宁波市自然科学基金项目（2013A610227）

汪春年（1977-），女，硕士，副主任医师；研究方向：妇科肿瘤、肝胆胰肿瘤。

吴晓英（1966-），女，教授，博士研究生导师；研究方向：妇科肿瘤。