免疫磁性分离技术在食源性疾病检测中的应用

程志杰

【摘  要】免疫磁性分离技术的基础为具有特性的病原抗体反应，是综合磁载体技术和免疫学的一项新技术，其特点表现为仪器设备便宜、强特异性、样品分离速度快、操作简单等，在病原体检测和细胞分离领域广泛应用，本文主要对免疫磁性分离技术在食源性疾病检测中的应用给予探讨，分析内容包括寄生虫检测、病毒检测、细菌检测等。

【关键词】食源性疾病檢测;免疫磁性分离;寄生虫;病毒;细菌

磁性微球属于磁性功能材料，其组成部分为磁性内核和高分子外科，磁性微球可以与多种物质发生偶联，比如核酸、抗原、抗体等，在反应体系中，可以对相应的核酸、抗原、抗体进行有效识别，进而实现高效分离与检测。免疫磁性技术的载体为抗体包被的磁珠，在反应介质中抗体与具有特异性的抗原进行充分结合，进而形成复合物抗原-抗体，在磁场作用下，此复合物可以实现定向移动，最终实现抗原分离。

一、在细菌检测中免疫磁性分离技术的应用分析

肠出血性大肠杆菌属于大肠埃希氏菌，主要引发的疾病有肠炎和出血性腹泻，其中代表菌株为O157H7血清型。世界卫生组织已经把E.coilO157H7列入28种传染病病原体之中，成为公共卫生监控和食品安全监控的重点工作。使用传统方法对E.coilO157H7进行分离时，不仅分离时间长，且存在较多的杂菌干扰，对检出率造成严重影响，其检测水平也只是停留在200cfu/g。而在某项研究中，采用斑点免疫层析法首先快速筛选增菌液，此方法具有定性快速和高灵敏度的特点，在使用抗E.coilO157H7抗体，对磁珠进行包被，使其在增菌液中捕获E.coilO157H7，对样品中的其他杂菌和残渣进行充分分离，具有较高的浓缩作用。基于斑点免疫层析法的快速筛选，大大降低了免疫磁性分离技术的工作量，且没有1例表现为假阴性，具有较高的灵敏度，检出率明显高于传统分离法，将分离工作整整缩减了一个工作日。在检测E.coilO157H7时，两种方法的联合使用，其优点表现为高灵敏度、省时、快速等，完全符合与现阶段的流行病学监测工作。在某项研究中，研究人员充分结合免疫脂质体荧光法和免疫磁珠，在8小时内，顺利完成整个分离过程，检出限度为1cfu/mL，准确率高达100%。

二、在病毒检测中免疫磁性分离技术的应用分析

病毒对人类健康具有严重危害性，其中最主要的食源性病毒就是诺如病毒，在不同年龄阶段的人群中均会引发急性腹泻，且诺如病毒流行较为广泛，是预防检测工作的重点。现阶段，在体外增殖中还没有适用性比较强的动物模型和细胞系，在临床样本诺如病毒的检测中，RT-PCR得到了广泛应用，而在诺如病毒感染中病毒的实际含量非常少，检测难度比较大，在使用RT-PCR之前，在对食物中诺如病毒进行浓缩和纯化时，往往需要多种操作，在此众多操作中，可能造成病毒的交叉感染和丢失。而在某项研究中，使用诺如病毒重组衣壳蛋白抗体对磁珠进行包被，首先对食物中的诺如病毒进行捕获和浓缩，在使用RT-PCR给予检测，在此检测工作中，免疫磁珠法的优点表现为耗时短、设备简单、操作简便，大大降低了RT-PCR中参杂的干扰物，完全适用于现阶段的食品样本检测。

三、寄生虫检测中免疫磁性分离技术的应用分析

隐孢子虫病所引发的疾病为腹泻，此原虫病具有人畜共患性。对于水体消毒剂，隐孢子虫所表现的抵抗力比较强，感染的引发只需要少量的卵囊就可以实现，经证实，在引发人类感染方面，包含的隐孢子虫有人隐孢子虫和微小隐孢子虫，因此，在检测此类病原体时，检测方法必须具有较高的灵敏度和特异性。在某样本中，对低浓度微小隐孢子虫卵囊进行检测时，充分结合了免疫荧光显微术和免疫磁性分离术，使检测结果具有较高的敏感性。在某项研究中，采用免疫磁性分离法检测水中隐孢子虫和贾第鞭毛虫的影响因素进行了较为全面和深入的总结，他们指出，待测样品中的颗粒物质和溶解性物质、卵囊和孢囊的浓度、育龄和活性等特征，以及磁珠添加比例、反应时间、反应体积等MS过程操作参数均会对MS回收率产生不同程度的影响。因此，通过适当增加前处理操作，对MS各步骤进行参数优化，并配合活性分析手段，能有效提高卵囊和孢囊检测过程中MS环节回收率的精确度、稳定性和灵敏度，对客观评价水质安全，控制隐孢子虫和贾第鞭毛虫污染具有十分重要的意义。

结束语

总之，在食源性疾病的检测中，免疫磁性分离技术的应用，可以对样品中的病原微生物进行有效收集和浓缩，在病原微生物富集方面优势显著，不仅灵敏度高，还为今后医学科研工作的发展奠定基础。

参考文献：

[1]张彤，胡洪营，宗祖胜.免疫磁性分离法检测水中隐孢子虫和贾第鞭毛虫的影响因素[J].环境与健康杂志，2014（8）.

[2]毛亚飞，张悟澄，潘劲草.磁珠-ELISA检测日本血吸虫循环虫卵抗原的研究[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2014（12）.