无菌原料药生产管理中无菌工艺验证的必要性及方法研究

吴桐+高峰+李昊

摘 要：阐述了无菌原料药生产管理中无菌工艺验证的必要性，并在此基础上，对无菌原料药生产中无菌工艺验证的方法进行了论述，以期为无菌原料药生产质量的提升提供参考和借鉴。

关键词：无菌原料药；无菌工艺；微生物；生物技术

中图分类号：TQ460 文献标识码：A DOI：10.15913/j.cnki.kjycx.2015.19.104

1 无菌工艺验证的必要性

最新版的《GPM实施指南》对无菌的定义为：不存在活的生物和微生物，FDA将百万分之一微生物污染率作为灭菌产品无菌的相对标准，这一标准在世界各国得到了广泛运用。所谓“无菌药品”，即法定药品标准中列有无菌检查项目的原料药，制造此类药品需要对可能发生的微生物潜在污染进行严格控制，而无菌工艺就是一种尽最大可能减少或消除潜在污染源的生产工艺。为了确保无菌原料药生产过程中采用无菌工艺的可行性，需要通过相应的方法进行工艺验证。这一过程被称为“无菌工艺验证”，即借助已经形成文件的各类证据，证明生产无菌原料的相关条件和设施，比如人员、材料、设备、方法和环境等符合《GPM实施指南》中的规定要求。原料药是各类制剂中的有效成分，是生产制剂时不可或缺的重要组成部分，一般为通过植物提取、生物技术制备或是化学合成的具有药用价值的粉末、结晶等物质。虽然病人无法直接服用原料药，但作为药品的主要成分，其是否符合无菌标准直接关系着药品的质量。因此，在无菌原料药的生产中，必须验证无菌工艺。

2 无菌工艺验证

2.1 无菌原料药生产的工艺流程

常规的无菌原料药的生产工艺流程如图1所示。

2.2 无菌工艺验证的有效方法

2.2.1 验证准备

在验证原料药的无菌工艺前，需要做好相应的准确工作，具体包括确认生产设施和生产工艺、清洗设备和灭菌等。其中，生产设施应易于消毒和清洁，从而可有效减少污染源，保证无菌生产的顺利实施，这是无菌工艺验证成功与否的关键要素。通常情况下，一旦产品暴露在空气中，则易导致无菌工艺验证失败。因此，验证前需要对产品进行百级层流罩防护，并尽可能避免工作人员接触生产设备和物料。此外，在正式验证前，必须对接触模拟介质的设备表面进行清洗灭菌处理，还要防止灭菌后再次污染。如果生产的药品具有较强的抗菌性，则该项工作更加重要。如果灭菌不彻底，则极有可能引起模拟介质污染，进而导致验证失败。

2.2.2 无菌工艺的验证方法

无菌工艺的验证方法分为以下2步：①优选模拟介质和灭菌处理。在无菌工艺的验证过程中，模拟介质的选择至关重要。模拟介质应具备的特征包括不存在抑菌作用、有较好的溶解度且不影响培养基的质量、不会对设备造成腐蚀且对人体无害、对环境无污染等。目前，常用的模拟介质主要有PEG4000、乳糖和甘露醇等。选好介质后，应对其进行灭菌处理，因为模拟介质的无菌性会对工艺验证结果造成较大的影响。如果无法确保介质的无菌性，或是在验证前介质受到污染，则会对验证结果的可信性造成影响。因此，在使用模拟介质前，必须进行灭菌处理，可选用的方法为γ射线灭菌。②培养基的选择和灭菌。通常情况下，可根据微生物选择培养基。由于在无菌工艺验证过程中并不清楚系统内微生物的种类，所以，选择多种培养基进行无菌测试的难度较大。因此，可按照实际的生产工艺和环境选择适用于绝大多数微生物的培养基。实践证明，在众多培养基中，大豆酪蛋白消化物的效果较好，这是因为绝大部分无菌原料药的生产都需要与空气接触，感染厌氧菌的概率相对较小，被感染的微生物以需氧菌或真菌为主，因此，可将大豆酪蛋白消化物作为首选培养基。培养基灭菌也可采用γ射线灭菌，同时，要在灭菌处理之后进行生长促进试验。以大豆酪蛋白消化物培养基为例，试验后培养基内应出现较为明显的所接种微生物生长的现象。

2.2.3 工艺验证的具体过程

工艺验证的具体过程分为以下3步：①应对操作规程加以确认，并对相关人员进行培训，从而确保验证中的每一项操作都有标准可依、操作人员熟练掌握有关操作流程。当操作规程确认完毕且人员培训完成后，还应对仪器仪表进行校正，如果仪表不准确，则会导致验证结果出现偏差，因此，必须保证仪表的准确性。仪表校正应由具备资质的单位进行，且校正过程应符合国家相关标准。②确定工艺条件。无菌原料药的生产具有设备多、管路长和生产工艺复杂等特点，因此，应按照具体的特点选择模拟介质，尽可能地减少物料外露，并在开口位置处设置呼吸器或百级层流空气保护。③合理控制操作时限。无菌原料药生产中的每一项操作都应在规定的操作时限内完成，这样能防止经过灭菌的物品再次污染。通常情况下，操作时限越长，污染的概率就越大。因此，在工艺验证中，要尽可能地将操作时限调整至最长，如果在此时限下验证结果仍然可靠，则在短于该时限的条件下操作均可行。结果评价应符合相关标准中的要求，制剂的污染水平<0.1%为可接受的标准，但因无菌原料药生产中的包装单位相对较大，导致得到的总分装容器数量较少，进而使抽样测试结果无法满足统计学的条件。因此，在验证过程中，至少连续三批产品全部合格后，才可确定采用的无菌生产工艺符合无菌要求。

3 结束语

综上所述，由于原料药是药品的重要组成部分，因此，必须在无菌原料药的生产管理中重视无菌工艺的验证工作，这样可确保生产出来的原料药达到无菌标准中的要求，从而保证药品质量。

参考文献

[1]邓菲.喷雾干燥法生产无菌原料药的质量风险与控制[J].河北工业科技，2012（9）：88-91.

[2]张全钧.无菌原料药生产质量与实施GMP的研究[J].中国药学杂志，2012（12）：102-104.

Study on the Necessity and Method of Validation of Aseptic Process

for Production Management in the Production Management of Sterile APIs

Wu Tong， Gao Feng， Li Hao

Abstract： This paper expounds the necessity of the Validation of aseptic process for production management in the production management of sterile APIs， and discusses the method to verify the Validation of aseptic process for production management in the production of sterile APIs， in order to provide reference and reference for the improvement of the quality of sterile APIs.

Key words： aseptic raw material medicine； aseptic process； microorganism； biological technology

〔编辑：张思楠〕