玉树牦牛O型、Asial型口蹄疫疫苗免疫抗体效价分析

贺顺忠，宋仁德，张青兰，牛永娟， 尕么江永，李家奎

(1.青海玉树州畜牧兽医工作站,青海 玉树 815000；2.国家牛肉牦牛产业技术体系 玉树综合试验站，青海 玉树 815000；3.国家牛肉牦牛产业技术体系 疾病控制研究室,西藏 林芝 860000；4.华中农业大学动物学院，湖北 武汉 430070)

玉树牦牛O型、Asial型口蹄疫疫苗免疫抗体效价分析

贺顺忠1,2，宋仁德1,2，张青兰1,2，牛永娟1,2， 尕么江永1,2，李家奎3,4

(1.青海玉树州畜牧兽医工作站,青海 玉树 815000；2.国家牛肉牦牛产业技术体系 玉树综合试验站，青海 玉树 815000；3.国家牛肉牦牛产业技术体系 疾病控制研究室,西藏 林芝 860000；4.华中农业大学动物学院，湖北 武汉 430070)

[目的]为预防控制牦牛口蹄疫病提供参考，对玉树部分县牦牛口蹄疫疫苗免疫状况进行了抗体水平调查。[方法]实验采用O型、Asial型口蹄疫抗体检测液相阻断ELISA法对306头牦牛血清进行O型、Asial型口蹄疫二联疫苗抗体水平检测。[结果]表明：囊谦、称多、杂多、治多四县牦牛口蹄疫O型、Asial型疫苗抗体具有50.00%以上保护力的比例分别为：90%、86.33%。玉树地区口蹄疫免疫状况良好，但各县之间免疫情况存在较大差异，治多、杂多两县口蹄疫抗体水平较低。

牦牛；口蹄疫；液相阻断ELISA试剂盒；免疫疫苗；抗体检测；玉树

口蹄疫(FMD ) 是由口蹄疫病毒引起的偶蹄动物的急性、热性、高度接触性人畜共患传染病,也是能够进行远距离快速传播疫病,主要感染对象为牛、羊、猪等偶蹄家畜及野生偶蹄动物。在我国又被称为“口疮”、“蹄癀”、“脱靴症”[1]。该病的主要特征是口腔黏膜、舌面、鼻镜、乳头、蹄叉及附蹄周边皮肤形成或发生水疱,水疱易破溃,液体溢出形成烂斑等。严重危害家畜的生产力和畜产品质量，给畜牧业生产造成较大损失，并威胁着国际贸易、国家声誉和人类食品卫生安全，因而受到人们的普遍关注。目前我国牦牛产区对该病最有效的防治措施就是对易感动物进行春秋两季强制免疫，但牦牛口蹄疫仍然时有发生，而免疫效果主要依靠免疫动物产生的抗体水平来评价，为了对预防控制牦牛口蹄疫病提供参考，对玉树部分县牦牛口蹄疫疫苗免疫状况进行了抗体效价检测。

1　材料与方法

1.1待检血清

在玉树藏族自治州囊谦县、称多县、杂多县和治多县采集牛O型、Asial型口蹄疫双价苗接种后1个月的牦牛血清共计306份(表1)，-20℃保存，检测前自然解冻。

1.2诊断试剂

牛O型、Asial型口蹄疫抗体检测液相阻断ELISA试剂盒检测试剂盒为中国农业科学院兰州兽医研究所生产。

1.3结果判定标准

牛O型、Asial型血清抗体与保护力的关系为：抗体效价以≥1∶128的滴度为标准，效价≥1∶128,99%以上保护；效价≤1∶16不保护；效价在1∶22～1∶90之间，50%保护。

表1　牦牛血清采集地及数量

2　检测结果

玉树四县O型、Asial型FMD抗体检测血清数及效价分布见表2，四县O型、Asial型FMD抗体保护效价百分比分布见表3。结果表明，玉树地区牦牛口蹄疫O型、Asial型疫苗抗体具有50%以上保护力的比例分别为90.00%、86.33%；玉树地区整体免疫情况良好。各县O型疫苗的保护力均比Asial型疫苗略高。囊谦县、称多县O型、Asial型免疫情况均良好；杂多县、治多县保护力相对较低。

表2　O型、Asial型FMD抗体检测血清数及效价分布

注：“O/1”中O代表口蹄疫O型疫苗检测；Ⅰ为口蹄疫Asial型疫苗检测。

表3　O型、Asial型FMD抗体保护效价百分比分布

注：“-”代表数据缺失。

3　讨论

(1)免疫接种的目的是保护易感动物,预防口蹄疫的有效手段是免疫接种。理论上讲，根据现行的口蹄疫疫苗的免疫效力,注射密度达到80%就能起到阻止流行的作用。但在具体操作过程中，存在免疫间隔期长、部分牲畜免疫后期抗体效价达不到抵御外界病毒侵袭的水平等问题。可通过提高动物免疫密度，保证免疫质量来有效防止动物疫病的发生，保障畜牧业健康发展。本实验结果显示，玉树地区牦牛口蹄疫疫苗免疫效果整体良好，但杂多、治多两县免疫抗体水平较低，应加强牦牛口蹄疫免疫工作。

(2)通过免疫接种提高畜群整体抗体水平是预防口蹄疫的主要手段之一，抗体水平检测是对免疫效果的一种直观评估。陈国林[2]在海晏县对80份牦牛口蹄疫O型、Asial型疫苗抗体用试管凝集法进行检测，结果具有50%以上保护力的比例分别为85.50%、96.25%，本次检测口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体和O型抗体达到50%以上保护的分别为90.00%和86.13%，说明玉树各县牦牛口蹄疫免疫预防效果较理想，亚洲Ⅰ型抗体略高于O型抗体，可能与疫苗制造过程中有效成分配备有关。

(3)在玉树牧区，牦牛以放牧饲养为主，牦牛习性近于野生动物，防疫过程中牛保定难度大，免疫质量和密度难以保证。应加大动物预防基础设施建设，大力推广牛羊免疫注射栏，以提高免疫质量和免疫密度。

(4)免疫抗体水平高低与牦牛的日常饲养管理水平、健康状况、疫苗保存条件以及防疫人员业务能力和实际操作能力有关。

(5)诊断与检测是利用技术手段,准确掌握口蹄疫流行时免疫状况的科学方法,与防疫政策、 措施的制定提供依据,因而十分重要，玉树地区须加强诊断与监测工作。

[1]力拜尔阿木提.口蹄疫的防控研究进展[J].中国兽医杂志，2011，47(4)：61-63.

[2]陈国林.海晏县牦牛布氏杆菌病的血清学检测[J].青海畜牧兽医杂志，2010，40(1)：22.

Potency Analysis on the Vaccine Immune Antibody of Yushu Yak O type and Asial's type Foot-and-Mouth Disease

HE Shun-zhong1,2, SONG Ren-de1,2, ZHANG Qing-lan1,2, NIU Yong-juan1,2,GA-ME Jiangyong1,2, LI Jia-kui3,4

(1.YushuPrefectureAnimalHusbandryandVeterinaryWorkstations,Yushu,Qinghai;2.YushuComprehensiveExperimentalStationofNationalYakandBeefIndustrialTechnologySystem,Yushu,Qinghai, 815000,China;3.DiseaseControlLaboratoryofNationalYakandBeefIndustrialTechnologySystem,Linzhi, 860000;4.CollegeofAnimal,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan, 430070)

【Objective】The aim of this study was to provide references for preventing and controlling yak foot-and-mouth disease.【Method】The immune status of foot-and-mouth disease vaccine in some counties of Yushu was investigated. The O type and Asial type foot-and-mouth disease antibodies detection liquid phase blocking ELISA method was used to detect the serum antibody level of type O and type Asial foot-and-mouth disease vaccine of 306 yaks from Nangqian、Chenduo、Zaduo、Zhiduo counties.【Result】The result shown that in Nangqian, Chenduo, Zaduo, Zhiduo counties, the ratio of yak type O and type Asial foot-and-mouth disease vaccine antibodies whose protection over 50.00% was: 90%, 86.33%.【Conclusion】Foot-and-mouth disease was in good control in Yushu area, but there were big differences between immunity condition in different counties, and foot-and-mouth disease antibody level was low in Zhiduo and Zaduo.

yak; foot-and-mouth disease; liquid phase blocking ELISA Kit; immune vaccine; antibody detection; Yushu

2015-04-21修改日期:2015-05-10

现代农业(肉牛牦牛)产业技术体系建设专项(CARS-38)

贺顺忠(1981-)，男，青海互助人,兽医师，主要从事草地放牧家畜疫病防控工作。

宋仁德(1966-)，男，推广研究员，博士，songrende@yahoo.com.cn。

S823

A

1001-9111(2015)05-0042-02