蓝耳阴性猪转阳性疫苗免疫试验

魏恒慧　刘冬梅山东省蒙阴县畜牧兽医局，山东蒙阴276200

蓝耳阴性猪转阳性疫苗免疫试验

魏恒慧刘冬梅
山东省蒙阴县畜牧兽医局，山东蒙阴276200

本研究探索了蓝耳阴性种猪分别免疫VR-2332经典株和JXA1高致病毒株蓝耳疫苗后的抗体水平变化（S/P值）。结果表明，两者差异不明显。同时了解了两者在统一更换免疫TJM-F92株疫苗后的抗体水平变化。结果显示，之前免疫VR-2332毒株的，抗体快速上升；而之前免疫JXA1毒株的，无免疫效果体现。

阴性转阳性；VR-2332株；JXA1株；TJM-F92株

虽然蓝耳ELISA抗体检测的S/P值不能反映疫苗保护力，但对于蓝耳疫苗免疫以及疫病检测仍有一定参考及指导价值。2013年5月笔者所在猪场引入部分蓝耳阴性原种后备猪，考虑当前国内猪场普遍存在蓝耳病的大环境，同时也为了掌握蓝耳疫苗免疫后抗体水平变化情况，设计了蓝耳阴性转阳性疫苗免疫试验，为确定猪场蓝耳疫苗的免疫效果，尤其是疫苗毒株的选择提供参考建议。

1　材料与方法

1.1材料

1）试验动物。山东泰安某规模化猪场2013年5月10日从威海赛博迪原种猪场引进12头蓝耳阴性后备猪，平均体重90 kg，其中包括2头公猪。进猪前提前派人驻场选猪，并于4月5日、4月27日及5月3日分别采血化验，采用爱德士蓝耳抗体检测试剂盒进行检测，检测结果S/P均为0。

2）疫苗选用。本研究所用疫苗由猪场提供，采用以VR-2332株作为疫苗毒株的某进口疫苗和以JXA1株为疫苗毒株的某国产疫苗，分组进行免疫。

3）检测试剂与仪器。蓝耳病毒抗体检测试剂盒购自北京爱德士元亨生物科技有限公司，美国IDEXX公司生产。酶标仪采用Thermo MK3。

1.2方法

1）蓝耳阴性转阳性试验。进场后从5月16日开始（当天采完血后进行蓝耳疫苗免疫试验），每隔1周采血做抗体检测，持续跟踪蓝耳抗体水平变化（表1）。

2）更换不同毒株疫苗试验。二免过后，随着抗体呈缓慢下降趋势，在10月11日时，对2个试验组均采用以TJM-F92株为疫苗毒株的国产疫苗进行蓝耳免疫。每隔1周采血做抗体检测，持续跟踪蓝耳抗体水平变化。

3）试验后备猪临床观察。每天观察试验后备猪的精神状态、食欲、粪便等有无异常。

4）样品阳性或阴性判断标准。当S/P≤0.4，蓝耳抗体阴性（Neg）；S/P＞0.4，抗体阳性（Pos）。

表1　蓝耳阴性猪转阳性试验方案

2　结果与分析

2.1蓝耳阴性转阳性试验

经过抗体检测、数据整理，试验猪组内及组外蓝耳抗体水平对比结果如图1～3（个别猪某段时间S/P值有缺失），取组内猪的S/P平均值来代表当时整组的抗体水平。

2个试验组均在5月16日、6月25日进行蓝耳疫苗免疫，从图1、图2两试验组抗体检测曲线图上看，首次免疫后抗体爬升速度较慢，4周后才达到相对统一、稳定水平。其次，二次免疫并没有起到很好的提升抗体水平的作用，S/P值依旧在1.5上下浮动。随后呈缓慢下降趋势，在10月10日时临近阴阳性临界值。

同时，2个试验组抗体水平差异不大。虽然图3中在7月25日-8月22日这段时间免疫B组抗体水平要低于A组，这和B组1663、2064后备猪抗体水平持续偏低有直接关系。

2.2更换不同毒株疫苗试验

通过图4发现，之前防疫VR-2332毒株的1周后抗体上升，而之前防疫JXA1毒株疫苗的抗体依然持续下降，只是在10月31日时出现1次不正常的突升。

图1　试验A组各猪只蓝耳抗体变化曲线图

图2　试验B组蓝耳抗体水平变化曲线图

图3　试验A、B组蓝耳抗体水平对比曲线图

图4　更换T JM-F 9 2株疫苗后试验猪蓝耳抗体水平曲线图

2.3试验猪临床健康状况

在整个试验过程中，包括中间有免疫细小病毒、乙脑、猪瘟等其他疫苗，后备猪的精神状态、食欲、粪便等都无异常。而且意外的是，1878、1646、1258、2064、1663在8月初、1663在9月初产仔。按日期推算，这几头后备猪在进场时就已配种怀孕（在原场种猪群采用生态圈饲养，且公母混养）。虽然经受长途运输、定期采血、疫苗免疫等各种应激，从产仔及仔猪生长情况来看，还比较正常。

3　结果与讨论

1）在阴性转阳性试验中，首次免疫后抗体爬升速度很慢，3～4周才有体现。二次免疫没有体现出抗体提升的效果。当然，也可能没有二次免疫的话，免疫效果更差。

2）在阴性转阳性二次免疫过程中，2个实验组整体抗体水平差异不大。有一段时间有差异，也是和个别试验猪“不合群”的抗体表现有直接原因。

3）在两试验组同时更换TJM-F92株疫苗进行免疫时，差异非常明显。理论上JXA1株和TJM-F92株都属于高致病性蓝耳毒株，核苷酸序列同源性很高，但在试验中并没有很好的体现，没有起到免疫记忆效果。而之前免疫VR-2332毒株的，在更换TJM-F92株疫苗免疫后抗体快速上升，确实很意外。

4）就试验结果而言，结合蓝耳疫苗免疫安全性的问题（高致病性毒株疫苗安全性差），是否可以考虑采用经典毒株VR-2332株代替TJM-F92株的疫苗进行蓝耳免疫。至于其他经典毒株能否代替TJM-F92株以及VR-2332株能否代替其他高致病性蓝耳毒株，本文试验未涉及，不得而知。

2015-06-05

魏恒慧，女，1978年生，助理兽医师。