注射用曲札茋苷与常用输液配伍稳定性研究*

唐嘉悦，方 芳，陈云建△

（1.云南中医学院，云南昆明650500；2.昆明制药集团股份有限公司，云南昆明650100）

曲札茋苷是从蓼科植物拉萨大黄（Rheum lhasaense A. J. Li et P. K. Hsiao）的干燥根或根茎中提取出的有效成分之一。化学名为3，5，3′，4′-四羟基茋-3-O-β-葡萄糖苷，属二苯乙烯苷类化合物。近年研究表明二苯乙烯苷类化合物具有抗氧化清除自由基[1-2]、抗肿瘤[3]、降血脂[4-6]、抗动脉粥样硬化[7-9]等生物活性。本文将模拟临床用法，对注射用曲札茋苷与0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液在4 种条件下的配伍稳定性进行考察[10-15]。

1 仪器与试药

1.1 仪器

UltiMate 3 000 型液相色谱仪（美国戴安公司），BP221S 型电子天平（sartrous 公司），FE20 型pH 计（梅特勒-托利多公司），KBF240 型光照箱（德国Binder 公司），YB-2 型澄明度检测仪（天大天发科技有限公司）。

1.2 试药

注射用曲札茋苷（昆明制药集团股份有限公司，规格：20mg/瓶，批号：21021031-02）；0.9%氯化钠注射液（昆明南疆制药有限公司，批号：B121022D2）；5%葡萄糖注射液（昆明南疆制药有限公司，批号：B121122）；10%葡萄糖注射液（昆明南疆制药有限公司，批号：C121006）；曲札茋苷对照品（昆明制药集团股份有限公司，纯度：99.5%）；甲醇（色谱纯，SIGMA，批号：S93191）；所有用水均为注射用水。

2 方法和结果

2.1 配伍液的配制

模拟临床用法，各取注射用曲札茋苷2 支（约相当于曲札茋苷40mg）用适量0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液溶解后，再注入至100mL0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液中摇匀。取配伍后的溶液分别密闭，放置于室温、低温2～8℃避光、室温避光、室温强光照（4 500lx±500lx） 条件下，于0，2，4，6，8h 进行考察。

2.2 外观

取配伍后的溶液，按考察时间点取样，置于澄明度检测仪下检测其澄明度，溶液应澄清。溶液颜色依照中国药典2010 版一部附录XI A 第一法检测，其溶液颜色应低于黄色4 号标准比色液。

2.3 降解产物

取配伍后的溶液，按考察时间点取样，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液1mL 置于100mL量瓶中加入75%甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。依照含量测定方法中的色谱条件进行检测，考察药液放置过程中主药的降解产物。

2.4 pH 值

取配伍好的溶液，按考察时间点取样，依照中国药典2010 年第一版附录VII G 进行检测。

2.5 含量

2.5.1 溶液的配制

2.5.1.1 对照品溶液的配制

精密称取20mg 曲札茋苷对照品，置于50mL量瓶中，加入适量75%甲醇，溶解，稀释，定容，摇匀；精密量取1mL 置10mL 量瓶中，加入75%甲醇定容后摇匀。

2.5.1.2 供试品溶液的配制

按考察时间点取样，精密量取配伍液1mL 置于10mL 量瓶中，加入75%甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.5.2 色谱条件

色谱柱：Cosmosil C18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈（A）：0.1%磷酸（B），梯度洗脱0～25min，15%～30%A，25～30min，30%～40%A，30～35min，40%～15%A，35～40min，保持15%A 不变；流速：1.0mL/min；检测波长：319nm；进样量：10μL。理论塔板数按曲札茋苷计算应不低于8 000。曲札茋苷的保留时间为12.5min，色谱图如图1。

2.5.3 方法学验证

2.5.3.1 线性关系考察

精密称取曲札茋苷对照品适量，分别稀释成浓度为0.495，0.990，1.98，7.92，15.84，19.80，39.60，99.0，198.0，396.0μg/mL 的溶液。精密量取10μL进高效液相色谱仪进行测定，以对照品的浓度（μg/mL）为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，计算回归方程，得到线性回归方程：Y=43.164x+2.7561，r=0.999 9（n=10）结果表明曲札茋苷在0.495μg/mL～396μg/mL 范围内线性关系良好。

2.5.3.2 精密度实验

精密称取注射用曲札茋苷6 份，制备供试品溶液，记录色谱图，测定峰面积。结果：注射用曲札茋苷峰面积的相对标准偏差（RSD）为0.034%（n=6）。

2.5.3.3 稳定性实验

精密称取注射用曲札茋苷供试品及曲札茋苷对照品适量，分别配制成供试品溶液及对照品溶液，避光放置。分别于0，2，8，14，24，38h 用高效液相色谱仪进行测定，考察对照品和供试品溶液的稳定性。结果：注射用曲札茋苷供试品溶液和曲札茋苷对照品溶液的峰面积的相对标准偏差（RSD）分别为0.276%、0.576%，表明其在室温避光条件放置38h 稳定。

2.5.3.4 重复性实验

由同一分析人员精密称取注射用曲札茋苷供试品6 份，依照含量测定项下测定，求各份供试品含量及含量的相对标准偏差，结果平行操作测定的6 份供试品溶液含量的相对标准偏差（RSD）为1.50%（n=6）。

2.5.3.5 回收率实验

精密称取曲札茋苷对照品约10mg 置于100mL量瓶中，溶解，稀释，定容作为对照品储备液。精密称取注射用曲札茋苷供试品约120mg（约相当于曲札茋苷20mg），置于100mL 量瓶中，溶解，稀释，定容作为供试品储备液。分别精密量取供试品储备液9 份，每份1mL 置10mL 量瓶中，每3 份分别精密加入对照品储备液1mL、2mL、5mL，稀释定容。配制成30，40，50μg/mL 3 个水平的溶液，共9 份。计算加样回收率分别为100.41%，100.90%，100.64%，RSD 值分别为1.01%，1.03%，0.98%.

图1 注射用曲札茋苷色谱图（曲札茋苷主峰保留时间：12.413min）

2.6 配伍稳定性实验结果

2.6.1 外观及pH 考察

取配伍后的溶液，分别置于室温、低温2～8℃避光、室温避光、室温强光照（4 500lx±500lx）条件下，并于0，2，4，6，8h 分别观察其外观并测定其pH。结果表明：注射用曲札茋苷与0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液配伍后在室温、低温2～8℃避光、室温避光条件下外观均为浅黄色澄清液体，pH 均无显著性变化，在强光照室温条件下，外观也为浅黄色澄清液体，pH 有明显下降，见表1。

表1 注射用曲札茋苷与3 种输液在4 种条件下8h 内pH 值

2.6.2 含量测定

将配伍后的溶液，分别置于室温、低温2～8℃避光、室温避光、室温强光照（4 500lx±500lx）条件下，并于0，2，4，6，8h 分别测定其含量。结果表明：注射用曲札茋苷与0.9%氯化钠注射液、10%葡萄糖注射液、5%葡萄糖注射液配伍后在室温、低温2～8℃避光、室温避光条件下含量均无显著性变化，在强光照室温条件下，含量有明显降低，见表2。

表2 注射用曲札茋苷与3 种输液在4 种条件下8h 内含量测定结果

2.6.3 降解产物考察

取配伍后的溶液分别置于室温、低温2～8℃避光、室温避光、室温强光照（4 500lx±500lx）条件下，并于0，2，4，6，8h 分别测定其降解产物。结果表明：注射用曲札茋苷与0.9%氯化钠注射液、10%葡萄糖注射液、5%葡萄糖注射液配伍后在低温2～8℃避光、室温避光条件下降解产物均无显著性变化，在室温条件下降解产物略有增加。在强光照室温条件下，降解产物有明显增，结果见表3。

表3 注射用曲札茋苷与3 种输液在4 种条件下8h 内降解产物测定结果

3 讨论

①结果表明：注射用曲札茋苷与0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液配伍后在室温、低温2～8℃避光、室温避光条件下8h 内含量、降解产物、pH 值、外观均无显著性变化。可见其在这3 种条件下与0.9%氯化钠注射液，5%葡萄糖注射液，10%葡萄糖注射液配伍稳定，为临床用药提供了理论依据。

②注射用曲札茋苷与0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液在室温强光照条件下8h 内含量、pH 均有明显下降，降解产物有明显增多，证明其在光照条件下不稳定，因此在临床用药时应注意避光。

[1] 吕丽爽，汤坚，何其傥. 何首乌中二苯乙烯苷的制备及抗氧化机理研究[D]. 无锡：江南大学，2006.

[2] 刘厚淳，陈万生. 何首乌水溶性成分2，3，5，4-四羟基二苯乙烯2-O-β-D 葡萄糖苷体外抗氧化作用研究[J]. 药学实践杂志，2000，18（4）：232 -234.

[3] 孙向红，孙玉维，李红，等. 何首乌主要成分大黄素、大黄酸和二苯乙烯苷对肝细胞、肝癌细胞的影响[J]. 现代中西医结合杂志，2010，11（1）：234-236.

[4] 韩晓，吴成爱，王伟，等. 何首乌二苯乙烯苷降血脂作用机理研究[J]. 中华中医药学刊，2008，8（11）：818-822.

[5] 王春英，张兰桐，袁志芳，等. 何首乌醋酸乙酯提取部位与二苯乙烯苷的调血脂作用[J].中草药，2008，39（1）：78-83.

[6] 相聪坤，王蕊，袁志芳. 何首乌二苯乙烯苷类提取物对高脂血症大鼠血脂代谢的影响及其抗氧化作用[J]. 中国药业，2009，24（18）：19-20.

[7] 刘庆，彭鹏，熊国祚. 二苯乙烯苷抑制血管平滑细胞增殖和迁移的研究进展[J]. 临床合理用药杂志，2014，7（8）：178-180.

[8] 崔慧辉，田英，龙石银.二苯乙烯苷抗动脉粥样硬化的作用和机制[J].现代生物医学进展，2009，20（19）：3968-3971.

[9] 张燕堂，张颖，商战平. 二苯乙烯苷对动脉粥样硬化作用的研究[J]. 中国实用医药，2011，12（6）：241-243.

[10] 薛咏梅，孙贇，王文静，等. 云南不同产地夜交藤中的二苯乙烯苷的含量测定[J]. 云南中医学院学报，2012，35（2）：18-20.

[11] 徐雅贞，杨兆祥，张伟. 紫外分光光度法测定曲札茋苷的解离常数[J]. 云南中医学院学报，2012，35（3）：43-46.

[12] 张隽，王振军. 灯盏花素粉针与4 种输液配伍的稳定性考察[J]. 医药沙龙，2006，30（12）：566-568.

[13] Serajuddin AT, Thakur AB，Ghoshal RN, et al. Selection of solid dosage form composition through drug excipient compatibility testing [J]. Journal of Pharmaceutical Sciences 1999，American Chemical Society，1999，30（7）：696-704.

[14] 陈冰冰，余澄清，李俊伟，等. 注射用头孢孟多酯钠与常用输液的配伍试验[J]. 黑龙江医药，2009（4）：540-542.

[15] 张洪峰，陈 晨，王 乐，等. 清开灵注射液配伍注射用头孢西丁钠的稳定性研究[J]. 现代药物与临床，2014，29（2）：189-191.