白果内酯耐缺氧作用研究

熊国营 张凌云 李晓君

白果内酯耐缺氧作用研究

熊国营 张凌云 李晓君

目的 研究白果内酯对小鼠耐缺氧作用。方法 分别建立常压耐缺氧和急性脑缺血小鼠模型，研究高、低剂量的白果内酯对其存活时间的影响。结果 白果内酯能显著延长常压耐缺氧小鼠和急性脑缺血小鼠的存活时间，与空白对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；高剂量白果内酯组与阳性对照组比较，差异无统计学意义。结论 白果内酯对缺氧小鼠具有保护作用。

白果内酯；小鼠；耐缺氧；作用研究

银杏叶的提取物银杏内酯是一种具有较强的生物活性的萜类化合物，其中包括白果内酯和银杏内酯A、B、C、M和J，白果内酯是其中唯一的倍半萜物质。早在2001年，张予阳等[1]报道称银杏内酯能有效降低急性脑缺血小鼠的死亡率，延长小鼠的死亡时间；降低局灶性脑缺血大鼠梗死范围，对脑缺血具有保护作用。唐远鹏等[2]报道白果内酯可以有效降低血压，减慢心率；具有良好的抗心肌缺血，保护心肌作用，以及对神经系统的保护作用等。而关于白果内酯对耐缺氧的研究却未见报道。本研究分别建立常压耐缺氧和急性脑缺血小鼠模型，旨在探究白果内酯的耐缺氧作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 昆明种小鼠80只，体质量18～30 g，由鹰潭市人民医院铁路分院实验动物中心提供。

1.1.2 实验药物 白果内酯(合肥创新医药技术有限公司，批号：20100115)；复方丹参片(北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂，批号：11021185)。

1.2 方法

1.2.1 白果内酯对小鼠常压耐缺氧的影响 取小鼠40只，随机均分为4组（n=10），分别为空白组(A组)、阳性对照组(B组)、白果内酯低剂量组(C组)和白果内酯高剂量组(D组)。4组均采用灌胃给药，给药容积均为20 μL/g。A组给予生理盐水；B组给予390 mg/kg的复方丹参片；C组给予2.5 mg/kg的白果内酯；D组给予7 mg/kg的白果内酯。1次/d，连续5 d。末次给药60 min后，将各组小鼠分别放入盛有5 g钠石灰的300 mL的磨口瓶中，瓶口涂抹凡士林并加盖密封，观察小鼠体征特点，记录各组中每只小鼠的存活时间，以翻正反射消失和呼吸停止为死亡指征。

1.2.2 白果内酯对小鼠急性脑缺血的影响 取小鼠40只，分组及给药方法同1.2.1，以末次给药30 min后，用剪刀沿小鼠耳后将其头部迅速剪下，立即计时，观察各组每只小鼠断头后张口次数以及距最后一次张口时间。

1.3 统计学方法 采用SPSS 18.0软件对本研究中的数据进行处理，计量资料采用“x±s”表示，组间比较采用t检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 白果内酯对常压耐缺氧小鼠的影响 高、低剂量的白果内酯和复方丹参片均显著延长常压耐缺氧小鼠的存活时间，与空白组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；高剂量白果内酯组与阳性对照组比较，差异无统计学意义，但均长于低剂量组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 白果内酯对常压耐缺氧小鼠的影响(x±s)

2.2 白果内酯对急性脑缺血小鼠的影响 高剂量的白果内酯和阳性对照组组显著增加断头小鼠的张口次数，延长小鼠的存活时间，与空白组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；低剂量的白果内酯较空白组指标有增加，但差异无统计学意义。见表2。

表2 白果内酯对急性脑缺血小鼠的影响(x±s)

3 讨论

本研究建立小鼠物理缺氧模型和机体损伤缺氧模型，即常压耐缺氧和急性脑缺血模型。常压耐缺氧主要反映的是小鼠脑和心缺氧[3]，本研究显示，高低剂量的白果内酯显著延长常压耐缺氧小鼠的存活时间，与空白组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；高剂量白果内酯组与复方丹参片效果相当，表明白果内酯可显著改善心和脑缺氧。在急性脑缺血小鼠模型中，高剂量白果内酯显著增加断头小鼠的张口次数，延长小鼠的存活时间，与复方丹参片效果相当，与空白组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。表明白果内酯可以显著降低脑耗氧量，对断头脑缺氧具有保护作用。

机体缺氧表现出的是一种紧张刺激，可以引起机体产生各种应激反应，从而影响机体正常代谢以及使各种功能发生异常变化，导致机体心、脑等重要器官的损害和各种疾病的发生[4]。刘勇林等[5]发现白果内酯显著提高SD大鼠血清中的氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)活性，降低抗氧化物丙二醛(MDA)的活性，舒张血管，降低大鼠动脉压。高伟敏等[6]观察发现银杏叶提取物(含白果内酯、黄酮苷和银杏酯)对兔心肌缺血再灌注损伤具有保护作用，研究显示银杏叶提取物显著抑制脂质过氧化反应，减少心肌组织MDA活性和血清磷酸激酶活性，抑制心肌组织SOD的消耗，对心肌细胞具有保护作用。苟怀宇等[7]研究银杏叶提取物对异丙肾上腺诱导的大鼠心肌肥厚的影响，研究表明经银杏叶提取物治疗后明显降低MDA含量，升高SOD、GSP-Px以及cNOS的活性，与异丙肾上腺模型组相比，差异有统计学意义（P＜0.05），对诱导的心肌肥厚发生有预防作用。综合以上研究结果，推断白果内酯的可能机制为调节缺氧机体的氧化和抗氧化动态平衡，减少机体应激反应。此外，邹凯华等[8]研究发现白果内酯能抵抗缺氧引起的血管内皮细胞中的三磷酸腺苷(ATP)含量的降低，这可能与增强细胞呼吸功能有关；且体外实验表明，白果内酯增加对肝分离出来的线粒体的呼吸控制率，推断其可能的机理是在机体极低氧气情况下，白果内酯能保存线粒体，重新生成

ATP来为机体提供功能。

本研究建立了小鼠缺氧模型，探究了白果内酯的耐缺氧作用，填补了国内外对白果内酯这一药理研究的空白，进一步拓展了白果内酯的应用范围，为其开发和利用提供了一个新的方向，也使其产生更大的经济效益、社会效益以及生态效益。

[1] 张予阳，于庆海，游松，等.银杏内酯对小鼠和大鼠脑缺血的保护作用[J].中国药理学通报，2001，17(6):667-669.

[2] 唐远鹏，曾靖，黄起壬.白果内酯药理作用的研究[J].赣南医学院学报，2015，35(1):153-155.

[3] 李芳，杜丽东，妥海燕，等.敦煌疗风虚瘦弱方对小鼠急性缺氧的保护及抗休克作用[J].中医研究，2015，28(4):61-64.

[4] 王浩，李玉琴，高永峰，等.白花丹参不同炮制品水提物抗小鼠心肌缺血缺氧的作用[J].中国老年学杂志，2014，34(15):4276-4278.

[5] 刘勇林，张成标，李保民，等.白果内酯对大鼠动脉血压影响的研究[J].陕西中医，2011，32(4):491-492.

[6] 高伟敏，吴素焕，檀艳丽，等.银杏叶提取物对心肌缺血再灌注损伤的保护作用[J].河北职工医学院学报，2008，25(4):8-16.

[7] 苟怀宇，陈艳秋，黄晶，等.银杏叶提取物对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚的影响[J].重庆医科大学学报，2010，35(2):224-226.

[8] 邹凯华.白果内酯-银杏叶制剂有效成分研究现状[J].上海医药，2008，29(8):365-367.

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.36.005

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江西 335000 鹰潭市人民医院铁路分院药剂科 (熊国营 李晓君) 330000 南昌市第一医院药剂科 (张凌云)