胃泌素释放肽前体在小细胞肺癌诊断及治疗中应用

黄梅香+梁艺华+任宁毅+叶俭

[摘 要] 目的：探讨胃泌素释放肽前体（ProGRP31-98）在小细胞肺癌（SCLC）临床治疗中的价值。方法：收集肺部肿瘤患者199例，健康对照人群84例，以ELISA方法检测血清ProGRP31-98水平，并与NSE、CYFRA21-1、CEA进行联合检测并分析其诊断SCLC敏感度和特异度。结果：结合病理及影像技术确诊肺癌患者142例，其中鳞癌52例，腺癌40例，未分化癌1例，小细胞癌49例，其他良性病变者57例；49例SCLC患者中，血清ProGRP31-98中位值为610.94 pg/mL，明显高于非小细胞肺癌（NSCLC）组及健康对照组，差异均有统计学意义（P<0.01）；49例SCLC中广泛期患者ProGRP31-98水平高于局限期患者，二者中位值分别为959.83pg/mL和320.12pg/mL（P<0.01）；ProGRP31-98诊断敏感性为81.63%，特异性为94.62%， ProGRP31-98+NSE+CYFRA21-1+CEA联合检测的敏感性为91.84%，特异性为95.57%，约登指数为87.41，四个指标联检敏感性特异性高于单独检测，但与ProGRP13-98+NSE比较，差异无统计学意义。结论：血清ProGRP31-98检测可作为SCLC诊断指标，其水平能为SCLC治疗效果、复发监测等提供数据；与NSE联合检测可进一步提高敏感性。

[关键词] 胃泌素释放肽前体；神经元特异性烯醇化酶；小细胞肺癌

中图分类号：R734.2 文献标识码： A 文章编号：2095-5200（2015）03-082-03

城市工业化，吸烟普遍化，使空气雾霾日益严重，肺癌已成为我国首位恶性肿瘤死亡原因。肺癌主要分为小细胞肺癌（SCLC）和非小细胞肺癌（NSCLC），前者约占肺癌的15%-25%，是一种恶性化程度高，侵袭性生长较快，易发生广泛性坏死和淋巴结转移的恶性肿瘤，大部分患者就诊时已是晚期阶段，预后较差，五年生存率极低。正确鉴别二者尤为重要，因为这2种类型的癌症具有不同的预后：早期NSCLC可通过手术治愈，而SCLC则需要化疗和放疗。目前的影像学手段很难发现小的、散在肿瘤病灶上的SCLC，而肿瘤标记物（TM）在现代医学领域中已发挥重要作用，其对肺癌的辅助诊断、分型、分期、预后、疗效等均具有重要意义[1]，1982年首次报道神经元特异性烯醇化酶（NSE）可作为SCLC标记物[2]，其应用于临床诊断已多年，但在局限性SCLC诊断中，常出现阳性率过低，标本易受溶血、脂血影响。1978年McDonald等发现了胃泌素释放肽（GRP）[3]，其属于人体胃肠激素，稳定性差，难检测，而胃泌素释放肽前体ProGRP（31-98）[4]则具有半衰期较长、更稳定、可以进行体外检测的特点，其在SCLC中过度表达，SCLC患者中血液ProGRP水平明显升高，在正常上皮中不表达或表达非常低，在良性肺疾病和上皮来源的肿瘤中低水平表达，本文就ProGRP（31-98）在小细胞肺癌诊断及治疗的临床应用进行分析。

1 材料与方法

1.1 研究对象

收集肺肿瘤科住院患者199例，男137例，女62例，年龄为21～69岁；确诊肺癌患者142例，其中NSCLC93例（鳞癌52例，腺癌40例，未分化癌1例），SCLC小细胞癌49例（LD-SCLC组28人，ED-SCLC组21人），其他良性肺部病变患者57例；健康对照人群84例，男69例，女15例，年龄20～70岁；以上各组均排除肾功能衰竭等重大疾病等影响，各组间性别年龄差异不具统计学意义（P>0.05）。

1.2 标本处理

测定者用生化不抗凝真空采血管于清晨抽空腹静脉血3mL，静置30min后离心3000r/min转15min后分离血清后进行检测，室内温度湿度在控，试验前做室内质控，结果在控，CV值控制在10%以内，所有标本无溶血、脂血。

1.3 试剂及仪器

试剂为瑞典康乃格诊断有限公司96人份CanAg proGRP、CEA、NSE、CYFRA21-1 EIA试剂盒，所有操作按SOP文件进行。厂家建议临床参考范围分别为：ProGRP<50 pg/mL；NSE<13ng/mL；CEA<5 ng/mL；CYFRA21-1<3.3 ng/mL。微板振荡器为EYM-BIO水平振荡仪，振荡强度应从弱到强。纵向振动约200次/min， 摆动700-900次/min。洗板机为新波EYM-BIO洗板机，设定自动循环清洗6次，每次浸泡时间为15s。酶标仪为雷杜RT-6000酶标仪，双波 长405/620 nm， 可读 吸 光度 范 围 0～3.0。

1.4 统计学方法

采用SPSS17.0统计分析软件对数据进行录入、统计和分析，采用相应设定量资料的t检验、χ2 检验，P>0.05为差异无统计学意义，P<0.05则认为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组间血清ProGRP31-98、NSE水平对比

49例SCLC患者中，血清ProGRP31-98中位值为610.94 pg/mL，其中 ED-SCLC组ProGRP水平中位值为959.83 pg/mL，LD-SCLC组、NSCLC组、肺良性病变组、健康组分别为320.12pg/mL、30.17pg/mL、13.94pg/mL、13.81 pg/mL，经非参数检验，各组间血清ProGRP、NSE水平差异具有统计学意义（P<0.05），如下表1。

2.2 各组间血清ProGRP13-98及NSE检测水平阳性率分析

NSCLC组与SCLC组间血清ProGRP13-98及NSE检测水平阳性率分析可见，NSCLC组 CYFRA21-1阳性率较高，而SCLC组ProGRP13-98的阳性率为83.67%，NSE阳性率为71.4%，经比较具有显著性差异（P<0.05），如下表2。

2.3 ProGRP13-98、NSE、CYFRA21-1、CEA对检测SCLC的敏感性和特异性分析

NSE，ProGR13-98，ProGRP13-98+NSE与ProGRP13-98+NSE+CEA+CYFRA21-1组对SCLC组敏感性和特异性见表3，四个指标联检敏感性特异性高于单独检测，但与ProGRP13-98+NSE比较，差异无统计学意义。

2.4 SCLC患者临床治疗中ProGRP31-98水平分析

49例SCLC患者经治疗37例完全缓解者治疗后为34.29 pg/mL（），与治疗前比较ProGRP31-98水平明显下降（P<0.01）， 5例无变化者治疗前449.84 pg/mL，治疗后452.23 pg/mL。治疗前后差异无统计学意义，7例病情进展者由治疗前的522.05 pg/mL提高到831.95 pg/mL，ProGRP31-98水平明显高于治疗前（P<0.01）。

3 讨论

按目前国际分类，可将SCLC分为局限期（Ⅰ期和Ⅱ期）和广泛期（Ⅲ期和Ⅳ期），大部分的SCLC病患者就诊时已是广泛期，能早发现的肿瘤标记物中，ProGRP近年来倍受关注。胃泌素释放肽（GRP）是一种由27个氨基酸组成的类似蛙皮素肽类物质，存在于胎儿及新生儿肺组织和原发性肺癌中，特别高表达于SCLC[5]组织，但由于GRP在血浆中半衰期很短，限制了其临床应用，而GRP前体（Pro-Gastrin-Releasing Peptide）31-98片段含量稳定，经过证明能代表GRP的水平，适用于早期临床检测及治疗追踪监测，如上文结果：ED-SCLC组ProGRP水平中位值为959.83 pg/mL，而LD-SCLC组为320.12pg/mL，两组间水平差异具有统计学意义（P<0.05）；除在肺癌患者组织中会有高表达外，ProGRP亦在神经内分泌系统肿瘤中有所增高。目前，日本等国家已将ProGRP作为常规的体检项目运用于临床，用于吸烟者等高危人群普查。

本次实验中，SCLC组ProGRP31-98+NSE+ CYFRA21-1+CEA联合检测的敏感性为91.84%，特异性为95.57%，约登指数为87.41，四者联合检测有效提高诊断率。血清ProGRP31-98检测除可作为SCLC确诊指标外，还能用于监测SCLC治疗效果、复发和预后情况，是复发监测敏感性最高的肿瘤标志物之一，在治疗过程中，其下降水平与治疗疗效呈正相关，并与影像学监测有密切联系[6-7]。治疗后ProGRP水平保持稳定或显著升高，提示治疗无效或预示肺癌复发，临床可再制定方案；同时，作为肺癌预后评估的重要指标，ProGRP13-98水平高则预示愈后不良；相关研究表明，与CEA、CYFRA 21-1、NSE、SCC等其他肺癌相关肿瘤标志物相比，ProGRP13-98占有优势[8]，与NSE、CYFRA21-1、CEA联合检测可进一步提高敏感性[9-13]。本研究提示四个指标联检敏感性特异性高于单独检测，但与ProGRP13-98+NSE比较差异无统计学意义。

综上所述，由于小细胞肺癌组织来源及病程发展过程的复杂性，单一肿瘤标志物的测定影响因素较多，因此临床使用有一定局限性，选择合适的肿瘤标志物进行早期联合诊断，于病程发展的追踪、疗效的评估、复发及转移的监测有诸多益处，以ProGRP31-98的高敏感度和高特异度，再加上NSE联合检测是较为理想的组合。

参 考 文 献

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