百菌清在猕猴桃和土壤中残留动态

黄成名 程军勇　郑莉　张海玲　苏彩晴　付高峰

摘 要： 建立气相色谱法测定猕猴桃和土壤中百菌清残留的方法，方法的检出限为0005 mg·kg-1，通过对百菌清在猕猴桃和土壤中降解动态研究，表明百菌清在猕猴桃和土壤中的降解半衰期为574 d和776 d，施药后第35 d，猕猴桃中百菌清未检出，土壤中百菌清残留量为0012 mg·kg-1，推荐百菌清在猕猴桃上使用的安全间隔期为35 d。

关键词： 百菌清；猕猴桃；土壤；安全间隔期

中图分类号：S482.2+6；S663.4 文献标识码：A 文章编号：1004-3020（2015）05-0027-03

在农药、肥料使用上对时间、数量上把握不准，导致猕猴桃品质差，商品价值低[1，2]。百菌清是深圳诺普信农化股份有限公司推出的一种高效低毒广谱的杀菌剂，可用于防治果树、蔬菜等多种病害。利用百菌清防治猕猴桃的病害，对于提高猕猴桃产量和品质具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验材料为18 a生‘武植三号和‘魁蜜。试验树树势基本一致，坐果情况相近。供试药剂为75%百菌清可湿性粉剂（深圳诺普信农化股份有限公司提供）。仪器设备主要有Agilent6890N气相色谱仪（美国Agilent 公司，微电子捕获检测器（μ-ECD）），配化学工作站和7683B自动进样器和DB-1701毛细管色谱柱；旋转蒸发仪（瑞士 BUCHI公司）；涡流混合器、电子天平、精密移液枪、氮吹仪、固相萃取柱（氟罗里硅土柱，Agilent，6 mL/500 mg）；试剂主要有百菌清标准品（纯度98%，）色谱纯乙腈、色谱纯正己烷、色谱纯丙酮，淋洗液：正己烷∶丙酮（9∶1，V/V）。

1.2 试验方法

1.2.1 取样方法

75%百菌清可湿性粉剂在猕猴桃中的消解动态试验，试验小区设施药区和不施药区（空白对照）处理，每处理3个小区，每个小区面积不少于60 m2，施药剂量为推荐剂量的1.5倍（332 g·hm-2），兑水20 L，施药时间：病害发生初期（现蕾期）喷雾施药。75%百菌清可湿性粉剂在土壤中的消解动态试验取未种植的空地（20～30 m2），去除土表附着物，按消解试验相同浓度以332 g·hm-2剂量均匀喷雾（使土表湿透），喷药后0（2 h），1，3，7，14，21，28，35，45 d分别采样。分别按时间采集猕猴桃和土壤样品。每小区按对角线法随机采集猕猴桃样品不少于1 kg（8～10个）；土壤钻取0～10 cm土层，每小区不少于10个点，采样量不少于05 kg。写好标签和采样日期，贮存在-20 ℃冰箱中保存。

1.2.2 色谱条件

色谱柱：DB-1701毛细管柱30 m×032 mm×025 μm；色谱柱温度：160 ℃（保持4 min）15 ℃/min250 ℃（保持15 min）；ECD检测器温度：290 ℃；进样口温度：240 ℃；载气高纯氮（纯度9999%）：20 mL·min-1；尾吹气（高纯氮）：30 mL·min-1；进样量：10 μL。

1.2.3 样品处理方法

称取猕猴桃样品250 g，土壤样品100 g准确加入50 mL乙腈溶液，猕猴桃样品高速均质2 min，土壤样品超声30 min，静置15 min， 准确吸取乙腈层10 mL于圆底烧瓶中，50 ℃水浴旋转蒸发干，然后加入1 mL淋洗液溶解，待净化。

用5 mL正己烷预洗，当溶剂液面流至吸附填料表面时，立即加入样品提取液，用10 mL离心管收集洗脱液，用8 mL正己烷∶丙酮（9∶1，V/V）分两次淋洗固相萃取柱，合并收集洗脱液，用氮吹仪40 ℃下吹干，用正己烷定容至20 mL，供气相色谱仪检测[3]。

1.2.4 标准曲线的制作

将1000 mg·L-1的百菌清标准溶液分别用正己烷分别稀释配得0005，001，002，010，050，100 mg·L-1系列标准溶液，在1.2.2气相色谱条件下进行测定，百菌清标准品浓度在0005～10 mg·L-1范围成线性，线性方程为y=310 8019 x-2 1416，R2= 0992 1，其中y为百菌清相应的峰面积，x为百菌清标准品溶液浓度（mg·L-1）。

1.2.5 最小检出量

在上述条件下，百菌清的最小检出量为50×10-12 g。

1.2.6 最低检测浓度

在上述色谱条件和分析方法百菌清猕猴桃、土壤的最低检出浓度为0005 mg·kg-1。

1.2.7 相对保留时间

上述色谱条件下，百菌清保留时间约为514 min。

2 结果与分析

2.1 猕猴桃和土壤色谱测定结果

在1.2.2色谱条件下，百菌清标准品（005 mg·L-1）、猕猴桃空白样品（CK）、猕猴桃样品（施药后第5 d）、土壤空白样品（CK）、土壤样品（施药后第5 d）的色谱图，分别见图1～图5。

2.2 百菌清在猕猴桃和土壤中的降解动态

从试验结果可知，百菌清在猕猴桃和土壤中的残留量随着时间的延长而降低，喷施百菌清的当天（施药后2 h），猕猴桃中百菌清残留量为3974 mg·kg-1，土壤中百菌清残留量为0442 mg·kg-1。百菌清在猕猴桃和土壤中的半衰期，即百菌清药物残留量变成初始一半所用的时间，猕猴桃中为574 d，土壤中为776 d，喷施百菌清后第35 d，猕猴桃中百菌清残留量低于检测限（0002 mg·kg-1），表示已全部消解无残留。土壤中百菌清残留量为0012 mg·kg-1，消解率为97.3%，仅有微量的残留。猕猴桃中百菌清残留量与消解率相关系数为0984 4，土壤中百菌清残留量与消解率相关系数为0963 5，均呈较强的正相关关系。

3 结论与讨论

（1）对不同的试样前处理操作进行对比试验，对各种提取净化方法，建立了采用气相色谱法测定猕猴桃和土壤中百菌清的检测方法，结果表明，该方法提取效率、净化效果均满足方法回收率和仪器检测的要求[4]。

（2）通过对百菌清在猕猴桃和土壤中降解动态研究结果表明，百菌清在猕猴桃中的半衰期为574 d，百菌清在土壤中的半衰期为7.76 d，喷施百菌清后第35 d，猕猴桃中百菌清残留量低于检测限0.005（mg·kg-1），表示消解无残留，为丘陵岗地安全有效喷施杀菌剂提供理论参考。

（3）结合百菌清在猕猴桃中的降解动态检测结果，为保障猕猴桃食用安全和合理用药，在正常剂量用药下，推荐35 d为百菌清在猕猴桃上使用的安全间隔期。

（4）从三峡植物园的试验来看，猕猴桃果实和土壤百菌清残留量是较低的，在安全范围内。下一阶段，将扩大百菌清的使用区域，提高检测水平，降低药物残留，确保消费安全仍是亟待解决的重要问题，以提高猕猴桃产品的市场份额。

参 考 文 献

[1]谢志兵，鲁旭东.CPPU对猕猴桃果实生长的影响[J].农业与技术，2003，（3）：6365.

[2] 钟彩虹，李大卫，龚俊杰，等.湖北省猕猴桃产业发展调查与研究[J].湖北农业科学，2012，（12）：24962501.

[3] 金雁，姚家彪，付海滨，等.气相色谱法快速测定蔬菜、水果中多种有机磷农药残留[J].中国卫生检验杂志，2007，（7）：11531154.

[4] 梅文泉，佴注，黎其万，等.蔬菜中多种有机磷农药残留量的气相色谱测定[J].云南农业大学学报，2005，（1）：107110.

（责任编辑：郑京津）