鼻咽癌中miR-BARTs的研究进展

潘林江，叶志华，黄素宁，陈 罡

(广西医科大学第一附属医院a.放疗科； b.病理科，广西 南宁530021)

鼻咽癌中miR-BARTs的研究进展

潘林江a，叶志华b，黄素宁a，陈 罡b

(广西医科大学第一附属医院a.放疗科； b.病理科，广西 南宁530021)

微小RNA(miRNAs)是一类具有调控功能的内源性非编码单链小分子RNA，长约18～24个核苷酸，与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)的发生发展、诊断以及预后、转归有关。BamH1 A右向转录(BamH1 A rightward transcripts，BARTs)是EB病毒(EBV)中一组经转录后选择性多剪接的基因产物,存在于EBV所有潜伏状态的miRNA，共22种(miR-BART1—22),并表达于NPC等EBV感染相关的恶性肿瘤。阐明miR-BARTs在NPC的作用机制对指导临床治疗有重要意义。

鼻咽癌； BamH1 A； 右向转录； EB病毒； 基因调控

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是我国南方地区和东南亚最常见的恶性肿瘤之一。在我国NPC总发病率为3.61/10万，粗死亡率为1.99/10万，且复发转移率较高，严重危害人类健康；NPC的发生与遗传易感性、环境因素和EB病毒(EBV)感染有关[1]。微小RNA(microRNA，miRNA)是一类具有调控功能的非编码蛋白质的单链小分子RNA，能调控病毒基因和宿主细胞基因。EBV是首个被发现能够编码miRNA的人类病毒[2]。有研究[3]发现，EBV编码的BamH1 A 右向转录(BamH1 A rightward transcripts，BARTs)在鼻咽癌的发生发展中起调控作用。本文就NPC中miR-BARTs的基因调控机制作一综述。

1 EBV与NPC

EBV在NPC的发生发展中起重要作用。一方面，EBV本身可通过表达潜伏膜蛋白-1(latent membrane protein-1，LMP-1)影响细胞周期使NPC细胞永生化；另一方面，LMP-1的表达使细胞骨架相关蛋白Ezrin上调，从而引起NPC CNE1细胞侵袭和转移能力增强。另外，EBV本身亦可通过改变宿主细胞结构使染色体高度浓缩，可能有利于病毒的复制[4]。EBV链的缺失能改变LMP-1序列，从而引起CD4+T细胞抗原决定簇的缺失[5]，可能引起EBV源性的肿瘤细胞免疫逃逸，导致EBV的潜伏感染，致瘤性增强。

2 miR-BARTs简介

BARTs最初是在研究C15 NPC异种移植瘤的cDNA文库中被发现，其广泛存在于EBV感染的NPC患者中。目前miR-BARTs共22种(miR-BART1—22)，是一类长度约18～24个核苷酸，具有调控功能的非编码蛋白质的单链小分子RNA，可存在于EBV的所有潜伏状态[6]。有研究[7]发现，miR-BARTs通过降解靶mRNA或抑制其转录后翻译发挥对病毒自身基因和宿主细胞基因的表达，促进肿瘤细胞的生长和抑制肿瘤细胞凋亡。miR-BARTs可通过下调EBV基因表达从而使肿瘤获得免疫逃逸并潜伏生长[8-9]。miR-BARTs也可通过调控EBV基因以及宿主细胞基因的表达，在NPC的发生发展中发挥作用。

3 miR-BARTs在NPC中的调节机制

3.1 miR-BARTs在调节EBV基因表达中的作用

miR-BART2-5p与Bam H1 A片段左向的第5个阅读框编码(Bam H1 A fragment containing the fifth left open reading from frame(BALF5)转录产物高度互补结合，通过裂解结合区域，最终下调BALF5的表达[10]。BALF5作为EBV-DNA聚合酶基因编码病毒DNA复制所需重要蛋白BALF5蛋白，提示BALF5的表达降低从而导致病毒数量减少，可能有利于EBV进入潜伏状态，使NPC躲避宿主的免疫攻击，从而导致NPC的发生发展。

miR-BARTs与EBV基因的3′UTRs结合可下调LMP1[6]和潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein，LMP2A)[11]的表达，其信号通路尚不明确，目前可调节LMP表达的miR-BARTs见表1。LMP1是肿瘤坏死因子受体家族的一个功能同源体，具有瘤基因功能的蛋白质[12]，可促进癌细胞生长增殖，促进NPC的侵袭和转移等，而其高表达可以抑制肿瘤细胞生长[13]。LMP2A在EBV潜伏感染及转化细胞过程中发挥重要作用，EBV潜伏感染的B细胞中均检测到LMP2A的表达，LMP2A具有潜在的T细胞激活表位，能介导宿主杀伤性T细胞作用的发挥[14]。因此可认为miR-BARTs通过上调LMP1和LMP2A表达可抑制EBV致癌性。

表1 miR-BARTs调节EBV基因的靶点及作用

3.2 miR-BARTs在调节其他基因表达中的作用

miR-BARTs可通过调节细胞周期相关基因的表达，影响细胞增殖和凋亡正常的相关信号通路，从而抑制细胞凋亡和诱导肿瘤免疫逃逸。p53正向凋亡调控因子(p53-up regulated modulator of apoptosis，PUMA)，为首个被报道的miR-BARTs靶点[16]。PUMA属于Bcl2家族中BH3-only的一种促凋亡蛋白，通过调节线粒体中细胞色素C的释放启动凋亡[17]。miR-BART5通过与PUMA基因的3′UTR结合，在转录后水平负向地调节PUMA的表达，从而抑制NPC细胞的凋亡。有研究[16]证实，凋亡药物的敏感性在缺少miR-BART5或PUMA异常表达的EBV阳性NPC细胞系中明显增强。BH3-only蛋白Bim是miR-BART1簇的作用靶点，miR-BART1簇必须共同联合作用，才能发挥调节作用，阻断PUMA介导的细胞凋亡[18]。

Lin等[19]发现miR-BART20-5p可通过与靶mRNA的3′UTR结合下调转录因子TBX21的表达。通过抑制TBX21的活性可间接抑制p53在NK/T淋巴瘤细胞株中的作用，提示miR-BART20-5p可以阻断p53依赖的细胞凋亡，但是miR-BART20-5p在上皮癌中低表达。EBV miR-BART2-5p可以下调MICB基因而促使肿瘤细胞免疫逃逸；MICB为NK细胞的配体，表达于细胞表面，其表达下调可能是肿瘤细胞逃脱NK细胞攻击的原因[20]。固有免疫相关基因importin7(IPO7)是潜在的[21-22]，IPO7基因可通过编码重要的受体蛋白，运输转录因子进入细胞核[23]，提示可能通过调节固有免疫使肿瘤细胞获得免疫逃逸。

另外，miR-BARTs可以广泛下调一些Wnt抑制分子，使肿瘤发生率增高，如WIF1、APC、NLK[24]。miR-BART3-5p通过下调肿瘤抑制基因DICE1的表达，促进NPC发生发展[25]。另有研究[26]发现，miR-BART6-5p可以抑制人Dicer的表达。Dicer是合成miRNA所需的一种重要的酶，提示miR-BART6-5p可抑制miRNA表达，并通过减少抑制相关的miRNA合成，从而可能促进NPC肿瘤生长，见表2。

表2 miR-BARTs调节宿主细胞的靶点及作用

4 总结与展望

近些年来，随着miRNA-BARTs及其靶基因和相关信号通路的研究不断深入，miRNA-BARTs在NPC发生发展、侵袭和转移中的作用得以揭示。miRNA-BARTs能精确地调节自身的基因表达，形成有利于自身繁衍和潜伏的调节机制；通过下调宿主细胞的mRNA表达，达到有效的感染致病力。但miRNA-BARTs在NPC中的作用途径和调控机制还有待阐明。miRNA-BARTs以及它们的作用靶点与NPC的关系及其具体的调控机制有待进一步研究证实，miRNA-BARTs的研究将为NPC的预防、早期诊断和治疗提供新的靶点，为广大NPC患者带来福音。

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(责任编辑：钟荣梅)

Research Progress in miR-BARTs in Nasopharyngeal Carcinoma

PAN Lin-jianga，YE Zhi-huab，HUANG Su-ninga，CHEN Gangb

(a.DepartmentofRadiotherapy； b.DepartmentofPathology,theFirstAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversity,Nanning530021,China)

MicroRNAs(miRNAs) are a class of endogenous small non-coding single-stranded 18-24 nucleotide RNAs that play important roles in gene regulation.It has been reported that miRNAs play a vital role in the occurrence,development,diagnosis and prognosis of nasopharyngeal carcinoma(NPC).BamH1-A rightward transcripts(BARTs),including 22 viral miRNAs,are located in long alternative spliced Epstein-Barr virus(EBV) transcripts and expressed in EBV-associated malignant tumors.It is of great clinical significance to illuminate the mechanism of action of miR-BARTs in NPC.

nasopharyngeal carcinoma; BamH1 A; rightward transcript; EB virus; gene regulation

2014-10-10

潘林江(1966—)，男，学士，副教授，主要从事肿瘤放疗的基础及临床研究。

陈罡，教授，E-mail：chen_gang_triones@163.com。

R739.63

A

1009-8194(2015)05-0096-03

10.13764/j.cnki.lcsy.2015.05.037