不稳定型心绞痛患者血清HMGB1 的水平及临床意义

张岳雯 王小敏 刘长江 宁佳 蔡连锁 刘玉茹

不稳定型心绞痛是临床上常见的冠心病类型，属于急性冠脉综合征的范畴，主要机制是由于冠状动脉粥样斑块形成或其破裂出血，导致冠状动脉闭塞或狭窄，而出现临床表现。目前研究认为，炎性因子与冠心病冠状动脉病变程度明显相关，与动脉粥样硬化发生、发展关系密切，高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)为真核生物细胞核内的结合蛋白，是一种炎症介质在动脉粥样硬化和损伤血管的发生过程中起主要作用，白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)为常见的炎症反应介质，本研究通过检测不同类型冠心病患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平及其相关性，以探讨HMGB1 在不稳定型心绞痛患者中的变化及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 70 例冠心病心绞痛患者均为2014年3 月至2014 年6 月在我院医院治疗，经冠状动脉造影、冠脉CTA 等检查确诊为冠心病的患者。70 例冠心病心绞痛患者作为CHD 组:男43 例，女27 例;年龄45 ～83 岁，平均年龄(61.7 ±11.2)岁。其中34 例表现为稳定型心绞痛作为SAP 组:男20 例，女14 例;年龄46 ～80 岁，平均年龄(59.8 ±11.6)岁;病程3 个月～20 年;合并高血压病14 例，陈旧性心肌梗死10 例，脑血管病7 例，糖尿病9 例。36 例表现为不稳定型心绞痛作为UAP 组:男23 例，女13 例;年龄45 ～83 岁，平均年龄(61.6 ±11.7)岁，病程5 个月～18 年;合并高血压病15 例，陈旧性心肌梗死8 例，脑血管病9例，糖尿病11 例。选取同期50 例健康体检者作为对照组，男31 例，女19 例;年龄49 ～80 岁，平均年龄(61.2 ±10.5)岁;经询问病史、体格检查、心电图及其他实验室检查无异常。3 组患者间年龄、性别比、吸烟史、饮酒史及血脂、血糖、高血压等并发疾病情况比较，差异无统计学意义(P ＞0.05)，具有可比性。

1.2 诊断及排除标准 所有冠心病心绞痛患者诊断标准参照《不稳定性心绞痛和非ST 段抬高心肌梗死诊断与治疗指南》［1］并行冠脉造影确诊，至少一支心外膜下冠状动脉或其主要分支直径狭窄超过50%。心电图检查符合:心绞痛发作时心电图检查有缺血性改变或于静息心电图有明显缺血改变及运动试验心电图阳性。排除患者存在外周血管疾病、慢性心力衰竭、肾脏及肝脏疾病、血液病、甲状腺疾病、恶性肿瘤、自身免疫性疾病以及近期发热、感染性疾病、血栓、近期(1 个月内)手术史及经皮冠脉介入治疗、结缔组织性疾病等病史。

1.3 检测方法 对照组于清晨，冠心病心绞痛患者于入院次日清晨，空腹采集肘静脉血4 ml 注入一次性未加抗凝剂的真空洁净玻璃管内，在37℃水浴箱中静置1 h 左右以3 000 r/min 离心10 min 分离血清，取上清液，置于－ 20℃冰箱待测。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α);试剂盒由美国R＆D 公司提供，按照试剂盒说明步骤进行操作。

1.4 治疗方法 所有冠心病心绞痛患者均给予常规治疗，如卧位、吸氧、心电监护、抗血小板聚集、减少心肌耗氧、硝酸甘油扩冠等，并给予β-受体阻滞剂、钙拮抗剂以及他汀类药等，治疗4 周后观察指标变化情况。

1.5 统计学分析 应用SPSS 13.0 统计软件，计量资料以±s 表示，组间比较应用t 检验，计数资料组间比较应用χ2检验，相关性分析采用Spearman 秩相关分析，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CHD 组与对照组血清HMGB1 和IL-6、TNF-α水平比较情况 CHD 组患者血清HMGB1、IL-6、TNFα 水平较对照组明显增高，差异有统计学意义(P ＜0.05);其中UAP 组患者血清HMGB1、IL-6、TNF-α 水平与SAP 组及对照组之间相比较，差异有统计学意义(P ＜0.05);SAP 组患者血清HMGB1、IL-6、TNF-α 水平与对照组之间比较，差异有统计学意义(P ＜0.05)。见表1。

表1 冠心病心绞痛患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平比较± s

表1 冠心病心绞痛患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平比较± s

注:与对照组比较，* P ＜0.05;与SAP 组比较，#P ＜0.05

组别 HMGB1(μg/L) IL-6(ng/L) TNF-α(ng/L)对照组(n =50)30.51 ±8.17 5.46 ±1.97 0.87 ±0.21 CHD 组(n =70) 62.18 ±18.20* 17.65 ±3.17* 1.96 ±0.25*UAP 组(n =36) 79.45 ±12.5* # 23.37 ±4.85* # 3.12 ±0.31* #SAP 组(n =34) 47.62 ±9.49* 11.12 ±3.14* 1.43 ±0.22*

2.2 治疗后CHD 组与对照组血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平比较情况 治疗后患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平与治疗前比较均有明显下降，均具有显著性差异(P ＜0.05)，但UAP 组患者HMGB1 和IL-6、TNF-α 与对照组比较仍明显增高，差异有统计学意义(P ＜0.05)。见表2。

表2 冠心病心绞痛患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 水平比较 ± s

注:组间比较，* P ＜0.05;与对照组比较，#P ＜0.05

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2.3 CHD 患者血清HMGB1 和IL-6、TNF-α 相关性CHD 患者血清HMGBl 与IL-6、TNF-α 水平经相关性分析，呈正相关性(r=0.387，r=0.306;均P ＜0.05)，UAP 组患者血清HMGBl 与IL-6、TNF-α 水平经相关性分析，呈正相关性(r=0.461，r=0.328;均P ＜0.05)，但SAP 组患者血清HMGBl 与IL-6、TNF-α 水平经相关性分析，无相关性(r=0.142，r=0.127;均P ＞0.05)。

3 讨论

冠心病是由冠状动脉病变所引起的心脏病，多为冠状动脉粥样硬化所致，其有较高的发病率及病死率。不稳定型心绞痛是常见的冠心病类型，介于稳定型心绞痛、急性心肌梗死及猝死之间的急性冠脉综合征。研究表明，炎性反应与冠状动脉病变程度密切相关，炎性反应是动脉粥样硬化(AS)发生、发展过程中主要的机制，可引起粥样斑块不稳定，导致内皮细胞活化，使炎性因子及白细胞黏附分子的表达增多，从而使血小板聚集、斑块不稳定甚至破裂，从而导致冠状动脉闭塞或狭窄或血栓形成［2，3］。

HMGBl 基因定位于染色体13q12 带，相对分子量约为30 kDa，广泛分布于真核生物细胞核内的结合蛋白，是一种炎性介质，参与了脓毒血症的发生、发展，且其在急性肺炎、关节炎、自身免疫性疾病等疾病中起着主要作用［4］。HMGBl 释放途径可以从单核-巨噬细胞中主动分泌或从坏死细胞中被动释放而启动炎症反应，其在动脉粥样硬化方面起重要的调节作用，Oozawa等［5］研究发现，HMGBl 在人类动脉粥样硬化斑块内表达明显增高，HMGB1 可能参与动脉粥样硬化发病机制并且起关键作用。李曼等［6］研究发现HMGBl与冠状动脉粥样硬化关系密切。Umahara 等［7，8］研究表明，血管内皮细胞和泡沫细胞中存在大量的HMGBl，当细胞受损和坏死时其可被大量释放，刺激平滑肌细胞增殖、移行，参与动脉粥样硬化以及血管成形后再狭窄等过程。Souza 等［9］研究发现随着冠心病的严重程度不断增加，而HMGBl 浓度的增高也越明显，提示HMGBl 与冠心病严重程度及和死亡率关系密切。本研究结果显示，冠心病患者血清HMGBl 水平较对照组明显升高，不稳定型心绞痛患者血清HMGBl 水平较稳定型心绞痛明显升高，表明随着冠心病患者病情严重程度增加，HMGBl 浓度呈升高趋势。

IL-6 也被称作前炎性细胞因子，作为炎性反应的调节者，在血管损伤和急性心肌缺血中起主要作用，常常通过细胞及体液免疫介导炎症和防御。IL-6 可能导致各种不同病因的CHF 患者心肌损伤及功能障碍的进展，在多种心血管疾病病理生理过程中起核心作用。IL-6 可以促使巨噬细胞分泌单核细胞趋化蛋白，使单核细胞进入血管内皮下参与斑块形成;也可使肝细胞产生血浆纤溶酶原激活物抑制物(PAI)及急性期反应蛋白，导致冠状动脉血栓形成［10］。Sarrafzadegan 等［11］研究发现不稳定心绞痛患者血清中IL-6 水平较稳定型心绞痛患者明显升高，表明IL-6 在缺血性心脏疾病的发生、发展有关，研究还发现IL-6 表达水平与心血管事件的发生、发展及疾病的预后密切相关［12，13］，Wang 等［14］研究认为IL-6 是冠状动脉硬化斑块中的炎症标记物，与动脉粥样硬化和斑块破裂的发生密切相关，不稳定型心绞痛血清中的IL-6 表达水平较稳定型心绞痛显著升高，IL-6 的水平与斑块的稳定性具有相关性。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作用于血管内皮细胞，损伤内皮细胞或导致血管功能紊乱，使血管损伤和血栓形成，通过两种途径作用于血管内皮细胞:一是直接损伤内皮细胞，使血中胆固醇易于在管壁内沉积从而形成动脉粥样硬化斑块;二是通过促使产生血小板源性生长因子促进血栓形成［15］。Li 等［16］研究发现，不稳定型心绞痛血清中TNF-α 表达水平与冠状动脉粥样硬化斑块纤维帽的厚度呈负相关，胡玉华等［17］研究，不稳定型心绞痛患者CRP、TNF-α 表达水平较稳定型心绞痛患者显著升高，其表达能够在冠心病患者的诊断与预后判断中发挥积极作用。本研究结果显示，冠心病患者血清IL-6、TNF-α 水平较对照组明显升高，不稳定型心绞痛患者血清IL-6、TNF-α 水平较稳定心绞痛明显升高，表明随着冠心病患者病情严重程度增加，IL-6、TNF-α 浓度呈升高趋势，冠心病患者通过治疗后，血清HMGBl 与IL-6、TNF-α 水平较治疗前明显降低，但不稳定型心绞痛患者血清HMGBl 与IL-6、TNF-α 水平仍明显高于正常水平。Lin 等［18］研究发现，通过采用抗HMGBl 抗体可以抑制HMGBl 介导的IL-6、TNF-α 合成，但不能阻断TNF-α 诱导巨噬细胞释放IL-6，本研究通过相关性分析进一步发现，不稳定型心绞痛患者血清HMGBl 水平与IL-6、TNF-α 水平均具有正相关性。

综上所述，血清HMGB1 参与了不稳定型心绞痛的发生、发展，可能通过与IL-6、TNF-α 协同作用有关，其升高的程度可以作为冠性病病情严重的判断指标，有助于不稳定型心绞痛的病情判断及治疗效果评估。

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