正交设计优选小建中片提取工艺

颜晓玲 ，金杨巧 ，戴 娟，熊恩智，季巧遇

(1. 江西中医药大学，江西 南昌 330006；2.江中药业股份有限公司，江西 南昌 330006)



正交设计优选小建中片提取工艺

颜晓玲1，金杨巧1，戴 娟1，熊恩智1，季巧遇2*

(1. 江西中医药大学，江西 南昌 330006；2.江中药业股份有限公司，江西 南昌 330006)

目的：优化选取小建中片的最佳提取工艺。方法：采用L9(34)正交试验法，以芍药苷含量、甘草苷含量及干膏得率为考察指标，通过统计学分析优选小建中片的最佳提取工艺。结果：小建中片的最优提取工艺为药材加8倍量水，提取3次，每次1h。结论：该提取工艺稳定可行，适合工业化生产，为小建中片的研制提供了科学依据。

小建中片；正交试验；提取工艺

小建中片由白芍、桂枝、生姜、大枣和炙甘草五种中药组成，具有温中补虚、缓急止痛之功效，常用于脾胃虚寒、脘腹疼痛、喜温喜按、嘈杂吞酸、食少心悸及腹泻与便秘交替症状的慢性结肠炎，胃及十二指肠溃疡见上述症状者的治疗[1]。本实验采用L9(34)正交设计优化提取工艺，以有效成分含量及干膏得率为考察指标，进行统计学分析，确定最佳提取工艺，为后期小建中片的研制提供科学依据。

1 仪器及试药

101A-2 干燥箱(上海市实验仪器总厂)；Agilent 1200型高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司)；AB204-N型精密分析天平(METTLER TOLEDO上海衡器有限公司)；芍药苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号为：110736-201337)；甘草苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号为：111610-201106)；实验药材均购自安徽亳州市中信中药饮片厂，经鉴定合格；含量测定所用试剂为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 芍药苷和甘草苷含量测定[2-3]

2.1.1 色谱条件 色谱柱：AgilentSB-C18(250mm×4.6mm,5μm)；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液=16∶84；检测波长：230nm；流速为1.0mL/min；柱温：室温；进样量：5μL。

2.1.2 对照品溶液制备 精密称取芍药苷对照品、甘草苷对照品适量，加甲醇溶解制成含芍药苷0.574 4mg/mL和甘草苷0.291 6mg/mL的混合对照品溶液。

2.1.3 供试品溶液制备 精密量取样品溶液1mL，加甲醇15mL，超声提取30min(4 500Hz)，滤过，滤液加甲醇定容至25mL容量瓶中，即得。

2.1.4 线性关系考察 精密吸取上述对照品溶液 5μL，注入液相色谱仪，按“2.1.1”项下色谱条件，测定芍药苷和甘草苷含量。结果显示，芍药苷和甘草苷的回归方程分别为：Y芍药苷=345.48X-331.06，r=0.999 8(n=6)，Y甘草苷=343.71X-321.21，r=0.999 9(n=6)，表明芍药苷在5.744～287.3μg范围内、甘草苷在2.916～145.8μg范围内与其峰面积积分呈现良好的线性关系。

2.2 干膏得率测定

精密量取10mL浓缩液，置已干燥至恒重的蒸发皿中水浴蒸干，置于105℃烘箱中干燥3h，迅速取出，置于干燥器中冷却30min，称重，计算干膏得率。

2.3 考察因素及水平确定[4]

结合预实验情况、工业化生产条件和文献报道，确定考察的因素为加水量、提取时间、提取次数，同时各因素选择3个水平。见表1。

表1 小建中片提取工艺考察因素及水平

2.4 正交设计小建中片提取

按处方量称取药材9份，分别按正交试验表2进行水提，药液滤过，滤液减压浓缩，定容至210mL，取样测定芍药苷含量、甘草苷含量和干膏得率。综合评分=0.4×芍药苷含量+0.3×甘草苷含量+0.3×干膏得率。结果显示，各因素影响大小依次为C>B>A，其中提取次数对实验有显著性影响，选择最优水平；加水量和提取时间无显著性影响，结合工业化生产条件，选择次优水平。以A2B2C3为最佳，即加8倍量水，提取3次，每次1h。结果见表2、表3。

2.5 验证试验

按处方量称取药材，共3份，按照选取的最优工艺条件提取，减压浓缩至210mL，按“2.1”“2.2”项下操作，测定药液中的芍药苷含量、甘草苷含量和干膏得率。结果显示，验证试验结果与正交试验结果接近，即该工艺稳定可行。结果见表4。

表2 L9(34)正交试验设计结果

表3 综合评分方差分析

表4 工艺验证试验结果

3 讨论

小建中片中的有效成分为芍药苷和甘草苷，因此本实验以有效成分含量和干膏得率为考察指标，采用正交实验设计法优选小建中片的最佳提取工艺，得到最优的工艺条件为加8倍量水，提取3次，每次1h。经过实验验证所选取的提取工艺稳定可行，可操作性高，为后期小建中片各方面的研制工作提供了依据。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:人民卫生出版社,2010:508.

[2] 王巍,党长萍.HPLC法测定小建中颗粒中芍药苷的含量[J].黑龙江医药,2008,21(4):18-19.

[3] 傅勇,李旭,虞金宝.HPLC法同时测定红花逍遥片芍药苷及甘草苷含量[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(24):152-154.

[4] 李晓云,叶小利,牛小花,等.正交设计优选钩藤碱的提取工艺[J].亚太传统医药,2009,5(1):49-50.

(责任编辑：尹晨茹)

Optimization of Extraction of Xiaojianzhong Tablets by Orthogonal Test

Yan Xiaoing1,Ji Qiaoyu2*,Dai Juan1,Jing Yangqiao1,Xiong Enzhi1

(1.Jiangxi Universty of Jealitioal Chinese Medicine,Nanchang 33006,China;2.Jiangzong Phaemaceutical Limited by Share Ltd.,Nanchang 33006,China)

Objective:To optimize the optimal extraction process of Xiao jianzhong Tablets. Methods:The orthogonal test of L9(34)was employed to optimize the extraction process of Xiao jianzhong tablets with the content of paeoniflorin and liquiritin, leaves the paste rate as index. Results:The best extraction condition of Xiao jianzhong Tablets was 8 times of quantity water, decoction 3 times, each time for 1 hour. Conclusion:the optimum extraction process is stable, feasible, suitable for industrial production and it can provide the references for Xiao jianzhong Tablets for its further investigation.

Orthogonal Test; Extraction Process; Xiaojianzhong Tablets

2015-01-28

颜晓玲(1989-)，女，江西中医药大学硕士研究生，研究方向为药物制剂研发。

季巧遇(1967-)，女，江中药业股份有限公司副教授，研究方向为中药新制剂研发。

R284.2

A

1673-2197(2015)12-0022-02

10.11954/ytctyy.201512009