血必净对烧伤合并急性肾损伤中的临疗效及部分机制探析

黄玉平 陈志忠 陈 红

(南京军区福州总医院第地一附属医院<九五医院>，福州，351100)



血必净对烧伤合并急性肾损伤中的临疗效及部分机制探析

黄玉平 陈志忠 陈 红

(南京军区福州总医院第地一附属医院<九五医院>，福州，351100)

目的:观察血必净对烧伤合并急性肾损伤的临床作用,并探析相关作用机制。方法:对本院2012年9月至2015年9月85例不同程度烧伤患者资料进行回顾性分析,根据不同是否使用血必净将85例患者分为治疗组(使用血必净)39例,余下46例设为常规组(未使用血必净),同时将25例健康体检者设为对照组,分别采集3组尿液和血液,检测尿KIM-1及NAG水平及血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平。结果:1)与健康对照组相比,烧伤合并肾损伤患者BUN及Cr明显升高,具有统计学意义(P<0.05)。治疗组和常规组,治疗前BUN及Cr比较无统计学意义(P>0.05),经过治疗后治疗组BUN及Cr下降的趋势较常规组明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。2)治疗前相比，治疗后治疗组和常规治疗组患者尿KIM-1及NAG水平均有明显下降(P<0.01)，其中治疗组上述指标均显著低于常规治疗组(P<0.05)。3)尿KIM-1与BUN、Cr均呈正相关关系;尿NAG与BUN、Cr亦呈正相关关系,尿KIM-1与尿NAG也具有正相关性,结论:血必净对烧伤患者合并急性肾损伤具有理想疗效,其机制可能与降低尿KIM-1和NAG的表达有关。

烧伤;急性肾损伤;肾损伤因子-1;N-乙酰-β-葡萄糖苷酶；血必净注射液

急性肾衰竭是严重烧伤的并发症并导致死亡率增加的重要因素之一[1],根据急性肾损伤国际组织(AKIN)诊断标准对AKI的诊断标准:48 h内Cr水平升高≥0.3mg/dl(≥26.5 μmol/L)或超过基础值的1.5倍及以上,且明确或经推断上述情况发生在7 d之内或持续6 h尿量<0.5 mL/(kg·h)[2]。由于影响Cr结果因素较多,为了缓解烧伤患者的症状,早期发现及早干预以延缓甚至逆转肾功能损害尤为重要。KIM-1是近年来发现的一种新的跨膜糖蛋白,在正常肝、肾、脾微量表达,而在缺血及肾毒性损伤后的肾去分化近曲小管上皮细胞中表达显著增强[3-4]。NAG是肾小管损害的指标,也是小管功能改变的指标,研究发现尿NAG比其他指标有更高的特异性及敏感性[5-6]。

血必净由赤芍、川芎、丹参、红花及当归五种中药组合而成,具有活血化瘀、疏通经络、溃散毒邪,据目前研究可知血必净具有明显抗内毒素作用,临床中我们发现血必净对烧伤合并肾损伤患者具有明显的肾功能保护作用,可明显降低患者的Cr水平,有文献认为血必净作用途径与多种细胞因子相关,因此我们提出设想:血必净发挥肾保护疗效是否通过KIM-1及NAG进行桥接？本文将检测不同程度烧伤患者尿中KIM-1和NAG水平,进一步研究血必净治疗AKI的疗效及部分机制。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2012年10月至2014年9月在我院就诊的85例烧伤合并AKI的患者的资料进行回顾性分析,根据不同是否使用血必净将85例患者分为治疗组(使用血必净)39例,余下46例设为常规组(未使用血必净),其中男46例,女39例,平均年龄(35.8±6.7)岁。同时将25例健康体检者设为对照组,其中男15例,女10例,平均年龄(36.3±6.4)岁,均无肝、肾、心血管、血液及内分泌系统病史。2组患者在性别、年龄等一般情况方面差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 纳入标准及排除标准 纳入标准:1)烫伤原因均为热水烫伤火焰烧伤;2)烧伤后至入院时间不超过6 h;3)年龄在12～60岁。排除标准:1)化学试剂等烧伤;2)烧伤后入院时间超过6 h;3)年龄小于12岁或大于60岁;4)既往有心脏病、肝肾功能不全者;5)入院前接受血必净治疗者。

1.3 治疗方法 2组治疗组患者均接受常规抗感染、清创、营养支持、补液等处理,治疗组患者在常规处理方案基础上加用血必净注射液(天津红日药业股份有限公司,批号为06072101)50 mL+0.9%氯化钠注射液100 mL,静脉滴注,3次/d,连续使用7 d。

1.4 方法

1.4.1 标本采集 患者入院收集尿液(中间段)10 mL,以1 500 r/min离心10 min,取上清2 mL置于EP管中,保存于-20 ℃,集中测定KIM-1和NAG。同时采集血液做血常规检查,主要检查指标为血BUN、SCr、WBC、ALT、AST等。

1.4.2 检测方法 收集健康对照组,治疗组及常规组患者治疗前及治疗后连续24 h尿液,在4 ℃ 14 000 prn条件下离心5 min,用高压枪头吸取离心后的上清液,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测,人肾损伤分子-1酶联免疫分析试剂盒(上海联硕生物科技有限公司,货号BS-1140),N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)ELISA检测试剂盒(上海酶联实业有限公司,货号ELISA-05271),操作步骤严格按照说明书进行,试剂盒由广州达安基因股份有限公司提供,显色后采用492 nm波长,TMB反应产物检测需要450 nm波长。检测时一定要首先进行空白孔系统调零,用测定标本孔的吸收值与一组阴性标本测定孔平均值的比值(P/N)表示。以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

2 结果

2.1 血生化指标 治疗组患者、对照组的BUN值分别为(4.94±1.96)mmoI/L和(4.24±0.78)mmoI/L,Cr值分别为(105.88±21.93)μmoI/L及(18.73±5.62)μmoI/L,结果显示,与健康对照组相比,烧伤合并肾损伤患者BUN及Cr明显升高,具有统计学意义(P<0.05)。治疗组和常规组,治疗前BUN及Cr比较无统计学意义(P>0.05),经过治疗后治疗组BUN及Cr下降的趋势较常规组明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结果见表1。

表1 各组BUN、Cr测定结果

注:*表示与健康对照组比较P<0.05;△表示与常规组治疗后比较P<0.05。

2.2 尿KIM-1和NAG水平 对不同治疗组患者24 h尿液中KIM-1和NAG进行ELISA检测结果显示:2组治疗组患者治疗前尿液中中KIM-1和NAG表达无明显差异,但与健康对照组相比,治疗组患者治疗前的KIM-1(43.20±8.89)pg/mL vs(16.81±3.01)pg/mL,|t|=5.24,P=0.002 4<0.05)、NAG(102.99±20.39)pg/mL vs(42.91±6.49) pg/mL,|t|=4.67,p=0.001 1<0.05),表达均明显增加;经过血必净注射液治疗后治疗组的KIM-1(25.59±4.79)pg/mL vs(43.20±8.89)pg/mL,|t|=8.92,P=0.000 9<0.001)、NAG(49.33±9.67)pg/mL vs(102.99±20.39)pg/mL,|t|=6.67,P=0.000 8<0.001),表达显著低于治疗前,也低于常规组治疗后(P<0.05)见图1及图2。

图1 不同治疗组患者24 h尿液中KIM-1对比

图2 不同治疗组患者24 h尿液中NAG对比

2.3 烧伤合并肾损伤患者尿KIM-1和NAG与BUN、Cr相关性分析 尿KIM-1与BUN、Cr均呈正相关关系;尿NAG与BUN、Cr亦呈正相关关系,尿KIM-1与尿NAG也具有正相关性,结果见表2及图1。

3 讨论

随着血必净在90年代的问世,更为凸显活血化瘀法在治疗烧伤及其合并症的优势,血必净是经典方血府逐瘀汤的现代合成,其主要成分是赤芍、川芎、丹参、红花及当归,均具有显著的活血化瘀之功。肾脏是严重烧伤后并发的多器官衰竭的主要受损靶器官之一,病理学认为烧伤后由于微血管的血流变学发生变化、舒缩功能减弱、血管通透性增高,以及炎性反应、烧伤引起的休克所致的重要器官的缺血等原因,均可引起AKI。Colpaert K[7-10]等认为由于烧伤后自身产生的毒素如肌红蛋白等、肾毒性物质以及机体急性代谢障碍、感染和氧自由基损伤等引起肾脏损伤,导致急性肾衰竭。现代药理学发现[11-13]:活血化瘀的中药能够通过减弱血小板的黏附聚集功能,抑制成纤维细胞合成胶原而明显改善微循环,可以通过改变通过改变毛细血管的通透性,减少促炎递质的分泌,促进炎性物质的吸收,于此同时,活血化瘀类中药可通过增强网状内皮细胞吞噬和吸附炎性反应因子的能力而发挥修复受损组织的功能。因此血必净可以通过改善微循环、清除烧伤后产生的毒害物质,降低烧伤所致的病理性损伤,从而对机体的肾脏发挥保护作用。

表2 烧伤合并肾损伤患者KIM-1和NAG与BUN、Cr相关性分析

注：*在0.05水平(双侧)上显著相关;**在0.01水平(双侧)上显著相关。

图3 尿KIM-1与NAG相关性分析

一般情况下,肾功能检查基本以Cr、BUN以及尿液为主,但由于肾脏具有强大的贮备功能,这些常用的指标升高的较晚,不能充分诊断患者的肾功能损伤情况。近几年研究发现[14-15],在病理组织学发现肾毒性改变之前尿KIM-1即表现出高表达,顺铂、叶酸造影剂等引起急性肾小管坏死发现均能使KIM-1的表达升高,这些研究表明,KIM作为肾小管近曲小管上皮细胞的一种跨膜蛋白,可能更早的参与到肾脏损伤与修复中,更有利于早期诊断AKI,其应用价值优于BUN和Cr。NAG作为近年来研究比较多的一个检测肾脏病变的酶,是一种细胞内溶酶体酶,以肾近曲小管含量最高,正常情况下一般不易被肾小管滤过,当近曲小管上皮细胞受损时,溶酶体破裂释放NAG,是反映肾小管损害的特异性敏感指标[15-16]。本研究表明,在烧伤合并肾损伤患者中,NAG水平明显上升。因此我们认为尿液中KIM-1及NAG对于肾功能的评估具有较强的敏感性,我们在实验中发现烧伤合并肾损伤患者尿液中KIM-1及NAG均明显高于健康对照组,经过治疗干预后患者KIM-1及NAG在尿液中的浓度均有所下降,其中使用血必净的治疗组下降的趋势较常规组明显。因此我们认为血必净可明显抑制烧伤导致的瀑布样效应,抑制炎性反应递质的产生,抑制异常增加的血管通透性,修复受损的组织细胞及器官。

研究中我们对KIM-1和NAG与BUN、Cr进行了相关性分析,结果表明,KIM-1和NAG与BUN、Cr呈正相关,对KIM-1和NAG也做了相关性分析,二者之间的相关性系数达0.796,P<0.01,提示两者可以联合使用作为急性肾损伤早期的评估指标,且血必净对烧伤患者合并急性肾损伤具有理想疗效,其机制可能与降低尿KIM-1和NAG的表达有关。

[1]Lopes JA,JorgeS,NevesFC,et al.Acute renal failure in severelyburned patients[J].Resuscitation,2007,73(2):318.

[2]Van Biesen W,Vanholder R,Lameire N.Defining acute renal failure:RIFLE and beyond[J].Clin J Am SocNephrol,2006,1(6):1314-1319.

[3]Vaidya VS,Ramirez V,IchimuraT,et al.Urinary kidney injurymolecule-1:a sensitive quantitative biomarker for early detectionof kidney tubular injury[J].Am JPhysiol Renal Physiol,2009,290(2):517-529.

[4]van TimmerenMM,van den HeuvelMC,BaillyV,et al.Tubularkidney injury molecule-1(KIM-1)in human renal disease[J].JPathol,2007,212(2):209-217.

[5]Gilbert RE,CooperME.Thetubuloinerstitum in progressive diabetic kidney disease:more than all afermath of glomemlar injury[J].KidneyInt,1999,56(5):1627-1637.

[6]姜疆,刘毅.严重烧伤后肾功能与损伤机制的研究进展[J].临床军医杂志,2007,35(3):456-459.

[7]Colpaert K,Hoste E A.Acute kidney injury in burns:a story of volume and inflammation[J].Crit Care,2008,12(6):192.

[8]Palmieri T,Lavrentieva A,Greenhalgh DG.Acute kidney injury in critically ill burn patients.Risk factors,progression and impact on mortality[J].Burns,2010,36(2):205-211.

[9]Coca SG,Bauling P,Schifftner T,et al.Contribution of acute kidney injury toward morbidity and mortality in burns:a contemporary analysis[J].Am J Kidney Dis,2007,49(4):517-523.

[10]蔡晓燕,林联铎,冯裕董,等.急性肾损伤RIFLE与AKIN标准在重度烧伤患者中的对比研究[J].实用医学杂志,2013,29(19):3191-3193.

[11]詹冰,朱家潭.束斌.等,血必净注舯液对严重烧伤患者脏器功能的影响[J].中国中西医结合急救杂志,2007,14(1):14-16.

[12]吴月艳.血必净对严重烧伤患者凝血功能的保护作用[J].中国现代药物应用,2011,5(5):113-114.

[13]陈明,陈謇璇,黄勇波.血越净注射淀联合抗生素治疗外科感染性疾病46例[J].中国药业,2010,19(9):63-65.

[14]Palmieri T,Lavrentieva A,Greenhalgh DG.Acute kidney injury incritically ill burn patients.Risk factors,progression and impact onmortality[J].Burns，2010,36(2):205-211.

[15]Waikar SS,Bonventre JV.Biomarkers for the diagnosis of acutekidney injury[J].Nephron ClinPract,2008,109(4):c192-197.

(2015-08-16收稿 责任编辑：王明)

Curative Effect and Mechanism of Xuebijing Injection on Burn Injury Complicated with Acute Kidney Injury

Huang Yuping, Chen Zhizhong, Chen Hong

(FirstAffiliatedHospitaltoFuzhouGeneralHospitalofNanjingMilitaryCommand,Nanjing351100,China)

Objective:To observe the curative effect and mechanism of Xuebijing injection in burn injury complicated with acute kidney injury.Methods:A total of 85 patients(enrolled during September 2012 to September 2015) with different degrees of burning were retrospectively analyzed, and were divided into observation group(used Xuebijing injection, 39 cases) and conventional group (unused Xuebijing injection, 49 cases). Also, 25 healthy people were set as control group. To collect urine and blood, detect urine KIM-1, NAG levels and blood urea nitrogen (BUN), and creatinine (Cr) levels in the three groups.Results:1) compared with healthy group, BUN and Cr increased significantly in patients with burning injury complicated with renal injury, (P<0.05). Before treatment, BUN and Cr were of no statistical difference in the observation group and conventional group, (P>0.05). After treatment, the downward trend of BUN and Cr in the observation group were more obvious than than of the healthy group, and the differences were with statistically significance (P<0.05). 2) after treatment, urinary KIM-1 and NAG levels were significantly decreased in the observation group and conventional group(P<0.01), and the indexes of observation group were significantly lower than that of the conventional treatment group (P<0.05); 3) urine KIM-1 were both positive correlated with BUN and Cr, and also, urine NAG had positive correlation with BUN and Cr, and urine NAG also had positive correlation with urine KIM-1.Conclusion:Xuebijing injection has an ideal curative effect for patients with burns and acute kidney injury. This might be related to its inhibition on the expression of urine NAG and KIM-1.

Burns; Acute kidney injury; Kidney injury molecule-1; N-acetyl-beta-glycosidase; Xuebijing injection

国家自然科学基金项目(编号:30973690)

黄玉平(1984.1—),女,大学本科,医师,研究方向:常见肾脏疾病的治疗,E-mail:124343112@qq.com

R278;R259

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2015.12.015