血液中分离出大肠弯曲菌1例

李世花，刘行超，曾桂芬，肖慧玲，莫 姗，彭 芬

(中国人民解放军第一八一医院检验科 541002)



·案例分析·

血液中分离出大肠弯曲菌1例

李世花，刘行超△，曾桂芬，肖慧玲，莫 姗，彭 芬

(中国人民解放军第一八一医院检验科 541002)

大肠弯曲菌； 药敏试验； 耐药性

弯曲菌广泛分布于各种温血动物体内，其中以家禽、家畜、野禽的带菌量多，人主要通过食用被其污染的食物及其制品和水源患病[1]。弯曲菌病是一种引起以急性腹泻为主要症状的感染性疾病，也可引起肠道外感染，表现为全身中毒症状，如高热、皮肤黏膜淤斑等，出现败血症[2-3]。弯曲菌病在出现发热之前，甚至在没有进行抗生素治疗的情况下，病情常可能出现缓解[4]。近年来，弯曲菌感染率在世界各地普遍呈上升趋势，对公共卫生安全构成严重威胁，其中引起人类致病最多的是空肠弯曲菌和大肠弯曲菌，由大肠弯曲菌引起的人类血液感染的报道甚少，桂林地区未见报道。本科室于2014年9月从1例肝硬化失代偿期发热的乙肝患者血液中分离培养出1株大肠弯曲菌，进行形态学和生化鉴定，并进行相关药敏分析，现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 患者，男性，42岁，农民。入院前无诱因解黄色稀水样便，每日3次，无黏液、脓血及里急后重感。入院诊断：慢性乙肝，肝硬化失代偿期，发热原因待查。入院查体：体温39.8 ℃，慢性肝病面容，下腹部压痛，腹部、双下肢可见散在米粒大小出血点，压之不褪色，肝脾肋下触及不满意，移动性浊音阳性，肠鸣音稍活跃，双下肢中度凹陷性浮肿。红细胞计数2.63×1012/L,白细胞计数8.02×109/L,淋巴细胞计数0.12×109/L、中性粒细胞计数0.85×109/L,总蛋白56.5 g/L,清蛋白20.0 g/L,C反应蛋白35.56 mg/L。CT示肝硬化、脾大、腹水大量。腹水李凡他试验阳性，一般细菌培养无细菌生长。无菌采集静脉血行细菌培养。

1.2 仪器与试剂 法国梅里埃BacT/ALERT 3D全自动血培养仪及配套成人需氧血培养瓶(批号1038156)；法国梅里埃VITEK2 Compact及配套NH试卡(20140924A)；BA、MAC、CA、MH平皿购自郑州安图生物；药敏纸片购自英国Oxoid公司。

1.3 方法 无菌采集静脉血进行培养，46 h阳性报警，取阳性培养物行革兰染色，同时转种后于25、37、42 ℃ CO2罐中培养24～72 h。取菌落进行革兰染色、生化鉴定及琼脂扩散法药敏，各纸片间中心距离、距平皿外缘距离均按美国临床和实验室标准协会第四版规定。

2 结 果

2.1 分离培养 弯曲菌为微需氧菌，生长条件较苛刻，最佳气体环境为含5% O2、10% CO2及85% N2。25 ℃环境下无菌生长，42 ℃环境下血平板上可见灰白、光滑、湿润、扁平边缘不整齐的沿接种线蔓延生长的菌落，37 ℃环境下菌落生长较42 ℃生长慢。镜下见革兰阴性杆菌，菌体细长弯曲，呈多形性：逗点形、弧形、S形、海鸥展翅形等。取陈旧培养物行革兰染色可见部分菌体呈现球形及长丝形。

2.2 生化试验 该菌氧化酶、触酶、硝酸盐还原试验阳性，硫化氢试验、尿素酶试验阴性，水解醋酸吲哚酚，不水解马尿酸，不发酵糖类。

2.3 鉴定及药敏 鉴定结果为大肠弯曲菌，编码为0600002120，鉴定率为99%。药敏结果：对庆大霉素、红霉素、四环素、克林霉素、头孢他啶、头孢噻肟、头孢哌酮、环丙沙星、左氧氟沙星耐药，仅对氨苄青霉素、复方磺胺甲噁唑、氯霉素敏感。

3 讨 论

弯曲菌病为动物源性疾病，感染的动物通常无明显症状，但可长期向外界排菌，从而引起人类感染[5]。发展中国家由于卫生条件有限，水源性传播最多见，河水、溪水、山泉、井水中均可分离出弯曲菌。阳成波等[6]曾报道南京市场销售的鸡肉、牛奶、牛奶制品及井水存在不同程度空肠弯曲菌感染，如果加工不当或饮食习惯不卫生，会对消费者的健康构成潜在威胁。

据美国国家食品网的监测，弯曲菌是发病率最高的病原菌，是全球范围内胃肠炎的主要病因，世界卫生组织已将弯曲菌肠炎列为最常见的肠道传染病之一。林玫等[7]已研究证实广西腹泻患者中弯曲菌已成为重要的病原菌之一。本病例患者曾无诱因解黄色稀水样便，每日3次，机体免疫功能严重受损，体质较差(清蛋白低下)，常有发热现象，未进行抗感染治疗体温也可正常。说明本病例患者感染大肠弯曲菌与免疫功能低下密切相关，与肝病无直接因果关系。

近年来，弯曲菌对抗生素的耐药性明显增加。其中耐氟喹诺酮类弯曲菌增加尤为明显，弯曲菌对氨苄西林普遍耐受。20世纪70年代初，国内外均报道红霉素、庆大霉素对弯曲菌有很强的抑菌活性，并一致公认红霉素为治疗弯曲菌肠炎首选药物。20世纪80年代，仅阿根廷报道了一株耐红霉素弯曲菌[8]。随着抗生素的使用，不同国家不同地区弯曲菌对红霉素出现了不同程度耐药，而现在，南美、亚洲、非洲等许多国家均发现耐红霉素菌株，且数量增长迅速。许海燕等[9]曾报道空肠弯曲菌对氨基糖苷类、大环内酯类、青霉素类抗生素较为敏感，而对头孢菌素类、喹诺酮类、磺胺类和四环素类抗生素产生了较强的耐药性。侯凤琴等[10]经研究报道弯曲菌对头孢类、复方磺胺甲噁唑、四环素、喹诺酮类的耐药率较高，对红霉素、氯霉素、克林霉素耐药率低于10%。本病例中分离培养的大肠弯曲菌药敏试验与以上两则报道有所差异，说明弯曲菌的药物敏感性不断变化，且存在地域间差异，这提示临床应用抗生素防治弯曲菌病时，必须结合药敏试验结果选择高敏药物或联合用药才能起到预期的效果。

随着家庭饲养宠物的增加，人与动物的亲近及人类食用多种生肉制品，都大大增加了人感染弯曲菌的风险。弯曲菌广泛存在于自然界，大肠弯曲菌和空肠弯曲菌引起的感染多为散发，偶有爆发的报道[11]。弯曲菌病起病隐匿、症状不典型，往往由于检验水平有限，诊断不明确导致误诊或延误治疗。探索弯曲菌的快速检测方法及对不同来源的菌株进行亲缘性分析，识别爆发流行，为疾病的诊断、控制以及弯曲菌病分子流行病学研究具有十分重要的意义。各国(特别是发展中国家)建立和完善对弯曲菌的监测系统，加强各国之间的技术交流与合作也迫在眉睫。

[1]朱冬梅,刘书亮,彭珍,等.肉鸡源弯曲菌的分离、多重PCR鉴定及其耐药性分析[J].中国人兽共患病学报,2014,30(4):390-396.

[2]侯水平,陈守义.胎儿弯曲菌的感染现状、检测方法和分子分型的研究进展[J].中国人兽共患病学报,2014,30(1):85-88.

[3]倪语星,尚红.临床微生物学检验[M].5版.北京:人民卫生出版社,2013:178-180.

[4]吴蜀豫,张立实,冉陆.弯曲菌及弯曲菌病的流行现状[J].中国食品卫生杂志,2004,16(1):58-61.

[5]黄金林,许海燕,张弓，等.江苏奶牛空肠弯曲菌和结肠弯曲菌流行状况及耐药性分析[J].中国人兽共患病学报,2007,23(10):1016-1020.

[6]阳成波,蒋原,黄克和,等.PCR法和培养法调查食品和水中空肠弯曲菌的比较研究[J].中国人兽共患病杂志,2003,19(1):91-94.

[7]林玫,周凌云,王鸣柳,等.广西空肠弯曲菌和结肠弯曲菌流行病学调查[J].中国人兽共患病学报,2012,28(11):1143-1147.

[8]吴忠亮.空肠弯曲杆菌感染分布研究[D].上海:上海交通大学,2007.

[9]许海燕,黄金林,包广宇,等.扬州市区腹泻人群空肠弯曲菌和结肠弯曲菌流行状况及耐药性分析[J].中国人兽共患病学报,2008,24(1):58-62.

[10]侯凤琴,沈宝铨,孙新婷.200株弯曲菌对抗生素敏感性研究[J].中华医学感染杂志,2001,11(6):406-408.

[11]龚俊,刘树林.空肠弯曲菌与大肠弯曲菌基因分型研究进展[J].中华微生物学和免疫学杂志,2004,24(5):414-418.

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.15.069

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1672-9455(2015)15-2295-02

2015-03-15

2015-05-20)

△通讯作者,E-mail：lxch555@163.com。