子痫前期患者HLA-G水平在胎盘组织、血清中表达的临床价值分析

河北省邯郸市第二医院(邯郸056001)

李 萍 柴静波 姬白嫣

子痫前期患者HLA-G水平在胎盘组织、血清中表达的临床价值分析

河北省邯郸市第二医院(邯郸056001)

李 萍 柴静波 姬白嫣

目的：探讨子痫前期患者胎盘组织及血清中人类白细胞抗原G(HLA-G)的表达及其临床意义。方法：选取子痫前期产妇102例，正常妊娠妇女60例作为对照(正常妊娠组)，采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组胎盘组织HLA-G mRNA及血清中可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)水平。结果：正常妊娠组胎盘HLA-G mRNA相对表达量明显高于轻度子痫前期组和重度子痫前期组(P<0.05)；正常妊娠组血清sHLA-G 浓度明显高于轻度子痫前期组和重度子痫前期组(P<0.05)；轻度子痫前期组和重度子痫前期组胎盘HLA-G mRNA相对表达量、血清sHLA-G 浓度比较差异无统计学意义(P>0.05)；子痫前期患者血清sHLA-G 浓度与胎盘HLA-G mRNA表达呈正相关(P<0.05)。结论：子痫前期患者胎盘组织HLA-G mRNA表达以及血清sHLA-G 浓度明显减少，且血清sHLA-G 浓度与胎盘组织HLA-G mRNA表达水平有相关性，可能与子痫前期的发生和病理生理过程有关。

子痫前期为妊娠期高血压疾病的较为严重的一种类型，主要通过损伤孕妇的心血管系统、泌尿系统以及微血管内皮，从而导致严重的临床症状[1]。部分学者认为绒毛膜外滋养细胞的侵袭性下降可能显著参与到了子痫前期的发生发展过程[1, 2]，而人类白细胞抗原G作为HLA-I类分子，通过诱导母体与胎儿的免疫耐受参与到了妊娠期高血压疾病的发生发展过程[3]。本研究探讨在我院住院分娩的102例子痫前期产妇相关胎盘组织、血清中HLA-G表达水平的差异，来揭示HLA-G在子痫前期发生发展中的作用，报道如下。

资料与方法

1 一般资料 选取2013年2月至2015年3月在我院住院分娩的子痫前期产妇，纳入标准：①诊断符合谢幸、苟文丽主编的第8版《妇产科学》中的标准；②均为单胎初产；③产妇及家属知情同意，并签署同意书。本次研究共纳入子痫前期患者102例，其中轻度子痫前期组63例，重度子痫前期组39例，同时选取正常妊娠妇女60例作为对照(正常妊娠组)，年龄为21～32岁，平均年龄27.01±5.18岁，孕次(次)为1～3，平均次数为1.48±0.52。3组孕妇一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

2 方 法

2.1 标本采集：采集孕妇肘部静脉血，室温放置30min，待血液凝固后4摄氏度3000r/min离心10 min，分离出血清，-70摄氏度保存，3d内测定相关HLA-G值；胎盘组织排出后5min内采集近脐带根部的胎盘组织1.5×1.5×1.5cm大小组织，生理盐水漂洗3次，每次5min，立即放入液氮中。

2.2 酶联免疫吸附法:(ELISA)采用江苏吴生生物科技有限公司生产的ELISA试剂盒测定HLA-G，选用MULTISKANMK3酶标仪测定450nm吸收光度值(thermo公司)。

2.3 实时荧光定量PCR(real-time PCR):采用南京凯基生物科技有限公司生产的RNA提取试剂盒提取组织RNA(研磨法)，采用takara试剂(南京凯基生物科技有限公司)盒逆转录为cDNA(引物体系2ul)，采用takaraSYBN荧光定量PCR试剂盒(SYBN master mix QPCR 南京凯基生物科技有限公司)扩增mRNA。

结 果

1 各组胎盘组织HLA-G mRNA表达情况 正常妊娠组胎盘HLA-G mRNA相对表达量为0.69±0.14，明显高于轻度子痫前期组和重度子痫前期组，差异有统计学意义(P<0.05)，轻度子痫前期组和重度子痫前期组胎盘HLA-G mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)

2 各组血清sHLA-G 浓度情况 正常妊娠组血清sHLA-G 浓度为50.13±5.39ng/ml，明显高于轻度子痫前期组和重度子痫前期组的29.01±9.20ng/ml和27.18±8.49ng/ml，差异有统计学意义(P<0.05)；而轻度子痫前期组和重度子痫前期组血清sHLA-G 浓度比较差异无统计学意义(P>0.05)

3 子痫前期患者血清sHLA-G 浓度与胎盘HLA-G mRNA表达关系 子痫前期患者血清sHLA-G 浓度与胎盘HLA-G mRNA表达呈正相关(r=0.924，P<0.05)

讨 论

近年来越来越多的基础理论研究特别是病理妊娠理论的发展证实，绒毛膜外滋养细胞作为具有显著侵袭性的细胞亚群，显著参与到了妊娠期高血压疾病的发生发展过程中[3, 4]。一般认为，母体成功而健康的妊娠过程依赖于母体与胎儿免疫系统相互耐受，而部分学者认为绒毛膜外滋养细胞显著诱导了母体与胎儿间的免疫耐受过程[5]。部分绒毛膜内细胞以及绒毛膜外滋养细胞通过参与侵袭蜕膜组织以及浅肌层，从而引起肌层纤维组织呈现疏松改变、促进弓状血管扩张，引起螺旋动脉血管内皮以及肌层的重塑性改变，从而显著改善妊娠特别是妊娠中晚期孕妇因血流灌注增加导致的血流动力学异常。而人类白细胞抗原HLA-I类分子HLA-G主要表达于绒毛膜外滋养细胞中，部分学者认为其通过参与侵袭蜕膜组织以及子宫浅肌层，来参与到妊娠中晚期血流动力学的改善中。

本研究发现，正常妊娠组胎盘HLA-G mRNA相对表达量明显高于轻度子痫前期组和重度子痫前期组，而不同程度的子痫前期患者胎盘中HLA-G mRNA的表达并无差异。子痫前期患者胎盘中HLA-G mRNA显著下降，胎盘中血管数量以及平均血管直径均显著减小，同时合体滋养细胞结节增多，胎盘间质出现显著的纤维化变性生长纤维素性坏死，绒毛膜小动脉特别是螺旋动脉以及弓状血管密度显著降低。另外，对于正常孕妇以及子痫前期患者血清sHLA-G 浓度进行研究后发现，正常妊娠组血清sHLA-G 浓度为50.13±5.39ng/ml，明显高于轻度子痫前期组和重度子痫前期组，进一步提示了sHLA-G以及胎盘组织中HLA-G可能显著参与到了子痫前期的发生发展过程中。另外，本研究发现子痫前期患者血清sHLA-G 浓度与胎盘HLA-G mRNA表达呈正相关，表明胎盘组织中HLA-G的表达与循环血中sHLA-G的含量具有较好的一致性变化趋势，进一步提示了胎盘组织可能通过外分泌sHLA-G来刺激高表达CD56的自然杀伤细胞(NK)膜表面的KIR2DL4抑制性受体，进而参与到妊娠期胎盘组织特别是相应血管的生理性改变。

总之，子痫前期患者胎盘组织HLA-G mRNA表达以及血清sHLA-G 浓度明显减少，且血清sHLA-G 浓度与胎盘组织HLA-G mRNA表达水平有相关性，提示HLA-G可能与子痫前期的发生和病理生理过程有关。

[1] 马艳娟，刘 陶，王 慧，等. HLA-G在子痫前期患者血清及胎盘中的表达及意义[J]. 实用妇产科杂志,2014,23(06):452-456.

[2] 谢莹莺，耿排力，吕同德，等. 高原地区子痫前期患者胎盘及血清HLA-G表达水平及临床意义[J]. 青海医学院学报,2012,25(01):35-38.

[3] 彭 洁，唐 卉. 子痫前期患者血清和胎盘组织中IL-24、HLA-G蛋白的表达及意义[J]. 中国妇幼保健,2014,45(33):5478-5480.

[4] 王雅萍，徐友娣，严檬洁. 可溶性人类白细胞抗原G与重度子痫前期的相关性研究[J]. 临床与病理杂志,2014,15(05):498-501.

[5] 顾雪敏，古 航，陈 雄. 蜕膜组织中树突状细胞DEC-205及HLA-G的表达与子痫前期的关系研究[J]. 中国现代医学杂志,2013,17(10):36-41.

(收稿：2015-08-06)

子痫 @人类白细胞抗原 胎盘

R714.2

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.12.036