SLeX和CK19表达与甲状腺乳头状癌浸润转移的关系

SLeX和CK19表达与甲状腺乳头状癌浸润转移的关系

尚培中1，柳勇1，张星光2，张进权3，南润玲1，谷化平1

(1.中国人民解放军第251医院普通外科，河北 张家口 075000；2.中国人民解放军北京军区总医院内分泌科，北京 100700；3.河北省蔚县人民医院外科，河北 蔚县 075700)

摘要：目的探讨SLeX和CK19蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及其与癌组织浸润转移的关系。方法应用免疫组化染色EliVisionTM plus两步法检测127例甲状腺乳头状癌组织和30例癌旁甲状腺组织中SLeX和CK19蛋白的表达状况。结果甲状腺乳头状癌组织SLeX和CK19总体阳性表达率分别为70.1%和96.1%，显著高于癌旁甲状腺组织(P<0.05)；存在浸润和伴有淋巴结转移者，SLeX和CK19阳性表达率显著高于无浸润和无淋巴结转移者(P<0.05)；SLeX与CK19表达具有一定正相关性(r=0.30)。结论SLeX和CK19在甲状腺乳头状癌组织中多数呈强阳性表达，两者与癌组织浸润转移密切相关。

关键词：甲状腺肿瘤；SLeX；CK19；转移

中图分类号：R 736.1

基金项目：河北省高等学校科学技术研究青年

作者简介：杜华阳(1990-)，男，河北威县人，河北北方学院影像学本科2012级学生。

Expressions of SLeX and CK19 in Papillary Thyroid Carcinoma

and Their Relationships with Invasion and Metastasis

SHANG Pei-zhong1，LIU Yong1，ZHANG Xing-guang2，et al

(1.Department of General Surgery，the 251st Hospital of Chinese PLA，Zhangjiakou 075000，Hebei China；

2.Department of Endocrinology，the Military General Hospital of Beijing PLA，Beijing 100700，China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the relationships of SLeX and CK19 protein expressions with the potential of invasion and metastasis in papillary thyroid carcinoma. MethodsThe expression of SLeX and CK19 protein in 127 cases of papillary thyroid carcinoma and 30 cases of para-tumorous tissue were studied by EliVisionTM plus two-step immunohistochemical method.ResultsThe positive rates of SLeX and CK19 protein in papillary thyroid carcinoma were 70.1% and 96.1% respectively,both were significantly higher than that in para-tumorous tissue(P<0.05).The positive rates of SLeX and CK19 protein expression in the patients with tumor invasion and lymphatic metastasiswas were significantly higher than that without tumor invasion and lymphatic metastasis(P<0.05).There was a positive correlation between SLeX and CK19 protein expression(r=0.30).ConclusionThere is strong positive expression of SLeX and CK19 protein in papillary thyroid carcinoma.Both were closely correlated with the invasive and metastasic potential.

Key words:thyroid neoplasms；SLeX；CK19；metastasis

临床病理学证实，甲状腺乳头状癌早期即可发生区域淋巴结转移，首次手术时大约60.5%的患者即已发生淋巴结转移。细胞黏附分子SLeX(sialyl Lewis X)属Lewis血型决定簇Ⅱ型抗原，近年研究表明，它可通过配体分子介导与内皮细胞的黏附作用促进癌细胞转移。细胞角蛋白(cytokeratin，CK19)是组成细胞骨架的蛋白质之一，被认为是鉴别甲状腺良恶性病变重要的标志物之一。我们采用免疫组化染色EliVisionTMplus两步法检测了127例甲状腺乳头状癌组织SLeX和CK19的表达，探讨它们与甲状腺乳头状癌浸润与转移的关系。

1资料与方法

1.1　一般资料

2009-03—2014-10月于中国人民解放军第251医院行手术治疗的甲状腺乳头状癌患者127例，其中男42例，女85例；年龄17～75岁，平均(38.5±12.1)岁。根据高频彩超等影像学检查、术中探查以及术后病理检查等，综合判定浸润和淋巴结转移状况。个体化选择甲状腺切除范围，酌情施行选择性颈淋巴结清除术或功能性颈淋巴结清除术。本组病例中，存在包膜、腺体外组织或血管浸润者77例，无浸润者50例。伴有区域淋巴结转移者72例，无转移者55例。选取距离癌组织2 cm的同侧或对侧癌旁甲状腺组织(取自上述甲状腺乳头状癌患者)30例作对照。所有病例术前均未曾口服甲状腺素片、131I等相关制剂治疗。

1.2　方法

免疫组化染色采用EliVisionTMplus两步法，按试剂盒说明书进行实验操作。鼠抗人SLeX和CK19单克隆抗体、EliVision试剂盒和DAB显色剂均购自福州迈新生物技术开发有限公司。标本均经体积分数为10%甲醛固定24 h，石蜡包埋、4μm厚连续切片。以诊断明确的甲状腺乳头状癌组织作为阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。细胞质和细胞膜出现棕黄色颗粒者为阳性，①按染色强度及显色癌细胞比例分为-、+、++共3级，按有无细胞显色及深浅程度评分:无显色0分，棕黄色1分，棕褐色2分；②按显色癌细胞所占比例记分:<30% 1分，31%～70% 2分，>71% 3分。每例肿瘤积分=①+②，按积分高低分：0分阴性(-)，1～3分弱阳性(+)，4～6分强阳性(++)。

1.3　统计学方法

实验数据应用SPSS 17.0统计软件进行χ2检验及相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1　SLeX和CK19的表达

癌组织中SLeX总体阳性表达率为70.1%(89/127)，其中强阳性表达率为37.8%(48/127)，弱阳性表达率为32.3%(41/127)，阴性表达率为29.9%(38/127)；癌旁甲状腺组织中SLeX总体阳性表达率为6.7%(2/30)，其中强阳性表达率为0(0/30)，弱阳性表达率为6.7%(2/30)，阴性表达率为93.3%(28/30)。癌组织与癌旁甲状腺组织比较，总体阳性表达率(χ2=40.048)、强阳性表达率(χ2=16.332)、弱阳性表达率(χ2=8.008)之间差异均有统计学意义(P<0.05)。

癌组织中CK19总体阳性表达率为96.1%(122/127)，其中强阳性表达率为79.5%(101/127)，弱阳性表达率为16.5%(21/127)，阴性表达率为3.9%(5/127)；癌旁甲状腺组织中CK19总体阳性表达率为16.7%(5/30)，其中强阳性表达率为3.3%(1/30)，弱阳性表达率为13.3%(4/30)，阴性表达率为83.3%(25/30)。癌组织与癌旁甲状腺组织比较，总体阳性表达率(χ2=98.969)、强阳性表达率(χ2=61.902)之间差异均有统计学意义(P<0.05)，而弱阳性表达率(χ2=0.186)之间差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2　SLeX和CK19蛋白表达与浸润转移的关系

存在包膜、腺体外组织或血管浸润与无浸润的患者比较，SLeX阳性表达率分别为84.4%(65/77)和48.0%(24/50)，差异有统计学意义(χ2=19.172，P<0.05)；CK19阳性表达率分别为100%(77/77)和90.0%(45/50)，差异亦有统计学意义(χ2=8.016，P<0.05)。伴有区域淋巴结转移与无转移的患者比较，SLeX阳性表达率分别为88.9%(64/72)和45.5%(25/55)，差异有统计学意义(χ2=28.054，P<0.05)；CK19阳性表达率分别为100%(72/72)和90.9%(50/55)，差异亦有统计学意义(χ2=6.814，P<0.05)。

2.3　SLeX和CK19表达的相互关系

SLeX阳性表达的89例中CK19均为阳性表达(100%)，SLeX阴性表达的38例中CK19阳性表达33例(86.8%)。甲状腺乳头状癌组织中SLeX与CK19表达具有一定正相关性(r=0.30)。

3讨论

甲状腺乳头状癌是4种甲状腺癌中最常见的临床病理类型，其发病率近年来上升较快，约占甲状腺癌的70%～80%以上。尽管大多数患者癌组织分化较好，病程较长，但近年研究发现，不少患者癌组织仍具有较高的局部浸润性和区域淋巴结转移率，在6组淋巴结中，中央组(Ⅵ区)淋巴结是最常发生转移的部位。因此，采用肿瘤标志物研究甲状腺乳头状癌组织及其转移淋巴结中的表达状况，有助于加强对癌组织生物学特性，尤其是浸润能力和转移潜能的判断，对评估患者预后、随访中及时发现复发、指导临床施行再次手术等综合治疗具有一定意义。

由细胞表面的黏附分子所介导的细胞或细胞外基质的相互作用，是恶性肿瘤形成、浸润和转移的生物学基础，越来越引起学界重视。作为一类细胞黏附分子，SLeX是常用的肿瘤标志物单唾液酸神经节糖苷脂CA19-9(sialyl Lewis A)的同分异构体，主要由半乳糖(Gal)、岩藻糖(Fuc)、N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)、N-乙酰半乳糖胺(GlcNAc)及N-乙酰神经氨酸(NeuAc)5个分子组成。近年研究表明，SLeX与配体分子选择素(selectin)结合，通过Lewis-Selectin转移途径，参与介导癌细胞与血管内皮细胞的黏附作用，是癌细胞浸润及转移过程中的重要途径之一[3-4]。本研究结果表明，SLeX在甲状腺乳头状癌组织中的总体阳性表达率、强阳性表达率和弱阳性表达率均显著高于癌旁甲状腺组织，存在包膜、腺体外组织或血管浸润和伴有淋巴结转移者，其阳性表达率均显著高于无浸润和无淋巴结转移者。表明SLeX与甲状腺乳头状癌的恶性发展、浸润、转移密切相关，其高水平表达的癌肿浸润性强，转移率高，生存率低。

CK19是一种分化特异的蛋白质，近年研究表明，它可区别乳头状癌和乳头状增生，对滤泡型乳头状癌和其他滤泡性病变亦有鉴别意义[5-6]。本研究结果表明，CK19在甲状腺乳头状癌组织中的总体阳性表达率和强阳性表达率均显著高于癌旁甲状腺组织，而弱阳性表达率差异无统计学意义。表明CK19几乎在所有的甲状腺乳头状癌中均呈阳性表达，且大多数是强阳性，在癌旁甲状腺组织中表达大多数为阴性、弱阳性，两者之间的不同表达，说明CK19在甲状腺良恶性病变的鉴别诊断中具有较高的应用价值。与SLeX结果一样，存在包膜、腺体外组织或血管浸润和伴有淋巴结转移者，其阳性表达率均显著高于无浸润和无淋巴结转移者，表明CK19表达在甲状腺乳头状癌的恶性发展过程中发挥了一定作用。本研究还观察到，无论经典型还是滤泡型乳头状癌，基本都是强阳性表达，在癌周围组织中一些散在的受浸润腺体亦多呈强阳性，与背景组织明显不同，提示CK19阳性表达不仅是甲状腺乳头状癌诊断的重要依据，也是滤泡增生恶变的重要标志，在甲状腺细针穿刺细胞涂片时，有助于减少把乳头状增生过诊断为乳头状癌，或把乳头状癌低诊断为乳头状增生。

在观察SLeX和CK19表达的相互关系中发现，两者具有一定的正相关性，提示两者在甲状腺乳头状癌的恶性发展过程中可能具有协同调节作用。深入探讨它们在甲状腺乳头状癌浸润、转移过程中的作用机制，必将有助于更全面了解癌肿的临床病理进展。

参考文献：

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[2]王铁山,李艳红.分化型甲状腺癌的外科治疗.河北北方学院学报：自然科学版,2011,27(4):77-78,80.

[3]尚培中,张金江,贾国洪,等.基质金属蛋白酶-2和唾液酸化Lewis-X在乳腺癌中的表达及其意义[J/CD].中华乳腺病杂志(电子版),2008,2(2):177-183.

[4]尚培中,王兵,万立,等.SLeX和p16在甲状腺乳头状癌中的表达及其意义.中华内分泌外科杂志,2009,3(3):151-153.

[5]南润玲,尚培中,谷化平,等.半乳糖凝集素3、细胞角蛋白19及甲状腺过氧化物酶在甲状腺乳头状癌中的表达及意义[J/CD].中华临床医师杂志(电子版),2013,7(6):2381-2384.

[6]王士娜,王星,王翠芳.甲状腺微小乳头状癌的临床病理特征及诊断标志物的应用.中国医科大学学报,2014,43(11):1051-1053.

[责任编辑：李蓟龙英文编辑：谢利峰]

指导教师：李秀娟(1979-)，女，河北涿鹿人，讲师，医学硕士，研究方向：食管癌发病机制的研究。