饲料酸化剂对水貂小肠绒毛形态、营养物质消化率和N、P环境排放的影响

王凯英，鲍 坤，徐 超，王夕国，岳志刚，李光玉

(中国农业科学院特产研究所，吉林 132109)

饲料酸化剂对水貂小肠绒毛形态、营养物质消化率和N、P环境排放的影响

王凯英，鲍 坤，徐 超，王夕国，岳志刚，李光玉*

(中国农业科学院特产研究所，吉林 132109)

本试验旨在通过不同水平磷酸、柠檬酸、乳酸对水貂营养物质消化率、小肠绒毛形态及N、P环境排放量的比较，筛选适宜水貂使用的酸化剂种类及其水平。将健康、体重相近的雄性育成短毛黑水貂100只，随机分成10组，每组10只。对照组饲喂基础鲜料，Ⅱ～Ⅹ组分别在鲜料中添加0.4%、0.6%、0.8%磷酸；0.5%、1.0%、1.5%柠檬酸；0.5%、1.0%、1.5%乳酸。结果表明，各组间干物质采食量(DMI)及干物质(DM)、粗蛋白(CP)、钙消化率无显著差异(P>0.05)，但随酸化剂添加而升高的趋势明显；Ⅰ、Ⅳ组粗脂肪(EE)消化率显著高于Ⅴ、Ⅸ、Ⅹ组(P<0.05)；Ⅷ、Ⅸ组磷消化率极显著优于其他各组(P<0.01)，Ⅸ组磷消化率最高；各组间水貂小肠绒毛高度差异不显著(P>0.05)，Ⅷ组小肠绒毛平均高度最大，是最小的Ⅲ组的145.8%，是对照组的120.3%；不同处理组水貂小肠绒毛表面积差异不显著(P>0.05)，但Ⅷ组小肠绒毛平均表面积最大，是最小的Ⅲ组的160.24%，是对照组的131.77%；各组间水貂小肠绒毛密度差异不显著(P>0.05)；各组间水貂N环境排放量无显著差异(P>0.05)，但添加酸化剂N环境排放量下降趋势明显，对照组比最低的Ⅷ组高34.02%；对P环境排放量影响极显著(P<0.001)，Ⅷ组最低，比对照组低57.33%。综上表明：饲料酸化剂促进小肠绒毛发育、改善水貂营养物质消化率、降低环境氮、磷排放量作用明显，本研究范围内0.5%乳酸效果较好。

酸化剂；水貂；小肠绒毛；消化利用率；N、P排放量

酸性环境是饲料组分在动物体内被充分消化吸收、有益菌群合理生长、病原微生物受到有效抑制的必要条件，在饲料中添加酸化剂能有效调节动物胃内pH。研究表明，饲料酸化剂可改善日粮适口性，增加采食量和提高营养物质利用率，降低N、P环境排放量，促进小肠绒毛发育[1-8]。该技术在猪、鸡等畜禽上的研究和应用已十分普遍，但因为水貂驯养历史较家畜短，所以该技术是否适用，以及适宜酸化剂的种类和剂量有待进一步研究。

本试验就磷酸、柠檬酸、乳酸对水貂小肠绒毛平均高度、密度和小肠绒毛平均表面积等形态指数和营养物质消化率及N、P环境排放量的影响进行研究，筛选适宜的酸化剂种类和水平，为饲料酸化技术在水貂养殖业的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验时间和地点

饲养试验于2011年8月11日-12月5日在中国农业科学院特产研究所毛皮动物实验基地进行。

1.2 试验动物

选择健康、体重相近、90日龄的雄性短毛黑水貂(Mustlavison)100只，体重平均为(1 160.14±130.71)g，随机分成10组，每组10头，各组间体重差异不显著(P>0.05)，单笼饲养。

1.3 试验设计和日粮配制

以膨化玉米、海杂鱼、鸡肝、鸡腺胃、食盐、预混料等配制基础日粮，配方见表1。基础日粮为对照组，基础日粮添加酸化剂配制其余各组日粮，分别为0.4%、0.6%、0.8%磷酸(Ⅱ～Ⅳ组)，0.5%、1.0%、1.5%柠檬酸(Ⅴ～Ⅶ组)，0.5%、1.0%、1.5%乳酸(Ⅷ～Ⅹ组)。

表1 试验水貂基础日粮配方和营养水平

Table 1 Composition and nutrient levels of basal diet %

饲料原料Composition含量Content营养水平Nutrientlevels含量Content膨化玉米面Extrudedcorn14.0代谢能/(MJ·kg-1)ME13.24海杂鱼Oddfish63.0干物质DM31.29鸡肝Chickenliver9.0粗蛋白CP35.42鸡腺胃Chickenglandularstomach12.5粗脂肪EE14.87食盐NaCl0.5钙Ca2.09预混料Mineralandvitaminpremix1.0磷P1.24总计Total100.0

每千克预混料含有:VA 100万IU， VD 3 200万 IU，VE 6 000 IU，VB1600 mg，VB2800 mg，VB6300 mg，VB1212 mg，VK3100 mg，VC 40 000 mg，烟酸4 000 mg，泛酸1 200 mg，生物素20 mg，叶酸80 mg，胆碱30 000 mg，Fe 8 200 mg，Cu 800 mg，Mn 1 200 mg，Zn 5 200 mg，I 50 mg，Se 20 mg，Co 800 mg

Contained the following per kg of premix： VA 1 000 000 IU， VD 32 000 000 IU，VE 6 000 IU，VB1600 mg，VB2800 mg，VB6300 mg，VB1212 mg，VK3100 mg，VC 40 000 mg，niacin acid 4 000 mg，pantothenic acid 1 200 mg，biotin 20 mg，folic acid 80 mg，choline 30 000 mg，Fe 8 200 mg，Cu 800 mg，Mn 1 200 mg，Zn 5 200 mg，I 50 mg，Se 20 mg，Co 800 mg

1.4 饲养管理

试验动物由专人饲养，每日配好鲜料后30 min 内饲喂，投料时间为08：00和15：00，自由采食、保证饮水。

1.5 样品采集

1.5.1 饲料采集 各处理饲料配好后30 min内采集料样本并测定pH。1.5.2 采食量记录 从8月17日起每隔7 d精确称量水貂投料量和剩料量1次，记录每头水貂采食量。1.5.3 营养物质消化代谢试验 于10月9-11日进行消化试验，采用全收粪法收集水貂粪便，并对水貂营养物质采食量、粪便排泄量等精确计量，饲料、粪便、尿液样本处理后保存备用。

1.5.4 小肠样本采集 12月5日结合取皮在水貂进食8 h后，处死水貂后迅速取出十二指肠、空肠，进行肠双侧结扎，进行水貂小肠、空肠无菌性采集，剪去2～3 cm一段空肠，生理盐水清洗后放入10%甲醛溶液浸泡固定，用于制备空肠组织切片。

1.6 测定指标及方法

应用pH计精确测定水貂饲料、胃及肠道内容物pH；应用恒温烘箱对采集的饲料样本进行65 ℃烘干，粉碎备用；干物质、粗蛋白、粗脂肪、钙、磷等营养物质含量按GB/T 14924.9-2001方法测定。空肠组织经24 h固定后进行脱水、包埋、切片、染色、封片处理，在显微镜下观察，计量小肠绒毛高度，应用专用软件分析小肠绒毛密度和小肠绒毛表面积。

1.7 数据整理和分析

数据用Excel2010进行整理，用SAS软件中的DUCAN程序进行方差分析和多重比较。

2 结 果

2.1 不同酸化剂处理对水貂饲料、胃及肠道内容物pH的影响

基础料为对照组，基础料中添加不同水平磷酸、柠檬酸、乳酸，配制Ⅱ～Ⅹ组日粮，饲料配好30 min内应用pH计精确测定饲料pH，结合屠宰试验，在水貂进食8 h后进行胃、肠道内容物的无菌采集，液氮保存，30 min内应用pH计精确测定pH，结果如表2所示，各组鲜料pH差异极显著(P<0.01)，Ⅶ组最低；各组水貂胃内容物pH差异极显著(P<0.01)，Ⅳ组最低；各组水貂肠内容物pH差异不显著(P>0.05)，Ⅷ组最低。

表2 各处理日粮、水貂胃液、肠液pH

Table 2 pH of diet，gastric juice and intestines juice

项目Item处理Treatment含量(加粗的为磷酸)/%Content00.4/0.50.6/1.00.8/1.5R-MSEP值P-value饲料pHDietpH磷酸6.49±0.01A5.72±0.01C5.50±0.01E5.34±0.03F柠檬酸6.49±0.01A5.69±0.01D5.11±0.01I4.57±0.01J乳酸6.49±0.01A5.89±0.03B5.20±0.01G5.14±0.02H0.0140.0001胃液pHGastricjuicepH磷酸4.48±0.31AB3.79±0.44BCDE3.54±0.37DE3.49±0.50E柠檬酸4.48±0.31AB4.89±0.94A4.36±1.02ABCD3.75±0.25BCDE乳酸4.48±0.31AB3.98±0.16BCDE4.39±.073ABC3.59±0.34CDE0.5770.0009肠液pHIntestinesjuicepH磷酸6.64±0.166.69±0.186.73±0.176.62±0.15柠檬酸6.64±0.166.81±0.286.67±0.176.64±0.29乳酸6.64±0.166.42±0.136.78±0.376.62±0.260.2260.380

同一行数值标相同字母或不标表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)，下表(图)同

In the same row，values with the same letter superscripts or no superscripts mean no significant difference (P0.05)，values with different small letter superscripts mean significant difference(P<0.05)，different capital letter superscripts mean significant difference(P<0.01).The same as below

2.2 不同酸化剂处理对水貂小肠绒毛形态的影响

由表3可知，鲜料中添加磷酸、柠檬酸、乳酸对水貂小肠绒毛高度、小肠绒毛平均表面积和小肠绒毛密度无显著影响(P>0.05)，但添加酸化剂后水貂小肠绒毛高度、表面积、分布密度有明显增加趋势，0.5%乳酸处理组绒毛高度、绒毛平均表面积最高，分别是对照组的120.3%和131.76%；0.6%磷酸处理组小肠绒毛密度最高，是对照组的133.42%。

表3 不同处理水貂小肠绒毛形态

Table 3 Effect of different treatments on intestinal villus morphology in furring mink

处理Treatment含量/%Content绒毛高度/μmVillusheight绒毛表面积/μm2Villusarea绒毛密度/(根·μm-2)Villusdensity对照组Control819.2±239.18316211±891663.92±0.81磷酸Phosphoricacid0.4806.0±63.27336263±473214.48±0.430.6676.0±243.50260023±1274905.23±2.350.8834.8±94.70337431±610154.62±0.54柠檬酸Citricacid0.5799.3±158.99306716±962083.20±1.911.0705.3±268.06286012±1394703.65±0.321.5820.8±111.38343458±1008824.16±0.49乳酸Lacticacid0.5985.5±159.88416653±700854.22±0.471.0800.2±99.65302930±637723.77±0.491.5954.0±226.63375943±1329764.43±0.39R-MSE180.529.781.06P值P-value0.670.760.57

2.3 不同酸化剂处理对水貂营养物质采食及消化率的影响

由表4可知，磷酸、柠檬酸、乳酸对水貂干物质采食量(DMI)、干物质消化率(DMD)、粗蛋白消化率(CPD)、钙消化率影响均不显著(P>0.05)；粗脂肪消化率(EED)随着酸化剂添加而下降趋势明显，Ⅰ、Ⅳ脂肪消化率显著高于Ⅱ、Ⅸ、Ⅹ组，其中Ⅳ组最高(P<0.05)；磷消化率随饲料酸化剂添加上升趋势明显，其中Ⅷ、Ⅸ磷消化率极显著高于其他各组(P<0.01)，Ⅸ组最高；除脂肪消化率外添加饲料酸化剂组与对照组相比，各指数均有明显上升趋势。

2.4 不同酸化剂处理对水貂养殖N、P环境排放的影响

由表5可知，各组水貂N环境排放量差异不显著(P>0.05)，但饲料酸化剂处理组N环境排放量下降趋势明显，最高的对照组比最低的Ⅷ组高34.02%；对P环境排放量影响极显著(P<0.001)，添加0.5%乳酸组环境P排放量最低，比对照组低57.33%。

3 讨 论

3.1 饲料酸化剂对水貂小肠绒毛形态的影响

小肠是动物吸收养分的主要部位，小肠绒毛形态直接影响着营养物质消化和吸收，特别是小肠绒毛高度、表面积和分布密度直接影响小肠吸收面积。成熟细胞才有吸收功能，而绒毛高度、平均表面积、分布密度与绒毛上皮细胞数量呈显著正相关[9-10]，因此绒毛长、表面积大时，成熟细胞多，养分吸收能力强[11]。本试验表明，饲料酸化剂对水貂小肠绒毛高度、密度、平均表面积都有影响，促进小肠绒毛发育作用明显。因为适宜水平的酸化剂能够抑制有害细菌生长，激活并使消化酶保持较高活性，提高肠道中氨基酸和小肽类物质浓度，促进小肠绒毛表面细胞的发育。这和前人的研究结果[12-15]是一致的。

3.2 饲料酸化剂对水貂营养物质消化利用的影响

3.2.1 饲料酸化剂对水貂干物质采食量的影响 干物质采食量是动物自身状态(即日龄、性别、生理时期、饥饿情况、环境条件等)与饲料特性(能量浓度、含水率、适口性等)共同作用的结果。本试验中，各组水貂性别相同、出生日期相近、所处生理时期相同、体重无显著差异(P>0.05)， 都是处于自由采食状态，由相同基础料添加种类和不同水平酸化剂配制日粮。统计结果表明，各组水貂DMI无显著差异(P>0.05)，可知本试验范围内各组添加酸化剂对

表4 水貂采食量及营养物质消化率

Table 4 Effect of different treatments on nutrient digestibility in furring mink %

项目Item处理Treatment含量(加粗的为磷酸)/%Content00.4/0.50.6/1.00.8/1.5R-MSEP值P-value干物质采食量/(g·d-1)DMI磷酸119.76±27.01103.13±12.01107.75±6.15112.82±13.31柠檬酸119.76±27.01115.41±21.74127.31±12.68104.02±19.31乳酸119.76±27.01115.61±28.44119.76±27.01122.33±9.5817.520.31干物质消化率/%DMD磷酸76.95±2.3474.84±4.7276.85±2.5879.46±1.07柠檬酸76.95±2.3476.48±5.2677.24±3.1278.30±5.95乳酸76.95±2.3478.89±3.0177.20±1.4476.87±4.053.720.74粗蛋白消化率/%CPD磷酸85.08±1.4584.94±2.1086.58±2.5487.44±2.64柠檬酸85.08±1.4586.50±2.6487.18±2.3786.71±3.04乳酸85.08±1.4586.47±2.1786.22±2.1886.89±2.172.240.72粗脂肪消化率/%EED磷酸95.76±0.24a94.57±2.53abc95.18±0.58ab95.79±0.72a柠檬酸95.76±0.24a92.08±4.58c95.08±0.66ab95.03±1.73ab乳酸95.76±0.24a93.71±1.15abc92.79±2.34bc92.92±0.92bc2.020.02钙消化吸收率/%Cadigestibility磷酸28.59±16.3528.05±17.5525.53±15.8619.93±2.85柠檬酸28.59±16.3534.15±21.4637.96±25.1729.52±13.42乳酸28.59±16.3548.97±11.6534.59±11.0734.36±16.0116.090.25磷消化吸收率/%Pdigestibility磷酸41.01±4.37C49.69±6.98BC54.67±22.69BC49.95±7.78BC柠檬酸41.01±4.37C53.97±6.39BC58.43±15.31B58.79±9.03B乳酸41.01±4.37C73.56±11.14A78.58±18.24A56.13±5.65C10.070.0001

表5 水貂氮、磷环境排放量

Table 5 Effect of different treatments on N，P Excretion of growing mink g·d-1

项目Item处理Treatment含量(加粗的为磷酸)/%Content00.4/0.50.6/1.00.8/1.5R-MSEP值P-valueN环境排放量Nexcretion磷酸1.30±0.251.14±0.251.02±0.091.12±0.25柠檬酸1.30±0.251.13±0.201.15±0.251.08±0.25乳酸1.30±0.250.97±0.141.24±0.230.97±0.160.2040.23P环境排放量Pexcretion磷酸0.75±0.15A0.62±0.11ABC0.64±0.10ABC0.68±0.12AB柠檬酸0.75±0.15A0.61±0.08ABC0.53±0.14BC0.50±0.16BCD乳酸0.75±0.15A0.32±0.05D0.49±0.24CD0.61±0.09AB0.1340.001

水貂日粮适口性影响不显著(P>0.05)，这和王凯英等[16]研究结果是一致的。水貂DMI随着酸化剂添加水平先升高后下降趋势明显，表明在适宜范围内，酸化剂能够促进水貂采食，超过适宜范围饲料pH过低就会影响适口性，引起DMI下降。

3.2.2 饲料酸化剂对水貂CP、EE、Ca、P消化率的影响 CP、EE、Ca、P是对水貂重要的营养物质，其消化吸收除与营养物质自身特征(化合形式、日粮中浓度和相互比例等)相关外，还与消化液浓度、pH、特定消化酶活性有关。本试验基础日粮相同，组间日粮营养物质浓度和相互比例均无差异，日粮中酸化剂添加类别及水平不同对消化液分泌量、浓度、pH影响不同，这就使得消化酶活性有所变化，如表2，组间日粮和胃液pH差异显著(P<0.05)，所以CP、Ca、P 等消化吸收与pH有直接关系的营养物质的消化利用率，随酸化剂添加而提高趋势明显，这与R.Genitsen等在仔猪、肉鸡和水貂上的研究结果[17-20]是一致的，即：酸化剂通过调节消化道pH，调控消化酶活性，促进动物体内中间代谢和蛋白质合成，同时适宜的pH又促进了饲料中矿物元素从螯合等状态转化为易吸收的离子状态，促进了钙、磷、铜、锌矿物质营养的吸收，当酸化剂超过一定水平后，Ca、P消化率又呈下降趋势，这是因为当可吸收性Ca、P含量超过需要时，其吸收率就会下降，这也是机体调节机制的体现；EE的消化率和体内脂肪酶活性关系紧密，脂肪酶在偏碱性的环境条件下活性较高，随着pH下降，脂肪酶活性下降[21]，本试验中处理组脂肪消化率低于对照组就是这一原因，与王凯英等研究结果一致[16]。

3.3 饲料酸化剂对水貂N、P环境排放量的影响

N、P是畜牧养殖废弃物的主要污染成分，多源自粪、尿。水貂是肉食性毛皮动物，其饲料中动物成分达55%～65%，其粪、尿N、P含量较高，造成很大环境压力。试验组N环境排放量普遍小于对照组，这是因为适宜水平的饲料酸化剂对水貂消化道微生物有调节作用，能提高消化酶活性，提高营养物质消化率，同时酸化剂能够促进动物体内中间代谢和蛋白质合成，所以从粪、尿排出的N、P总量减少，起到了保护环境、健康养殖的作用。Ⅳ组比Ⅷ、Ⅹ组蛋白质消化率高，N环境排放量却比Ⅷ、Ⅹ组高，是因为乳酸直接参与是营养代谢，有促进营养物质，特别是蛋白质合成代谢的作用。但是随着酸化剂添加量不断增加，水貂饲料、消化道pH随着降低，超过临界值后消化道菌群数量、消化酶活性及营养物质代谢都会受到影响，引起营养物质消化吸收率下降、代谢率升高、存留率下降，环境排放量增加。可见无论磷酸、柠檬酸还是乳酸作为饲料酸化剂均有其适宜区间，在适宜区间筛选适宜水平应用是技术关键。

4 结 论

水貂鲜料中添加适宜水平的磷酸、柠檬酸、乳酸均能促进小肠绒毛生长发育，提高干物质采食量和营养物质的消化吸收率，极大地降低了N、P环境排放量。本试验范围内以0.5%乳酸组综合效果最佳。

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(编辑 郭云雁)

Effect of Acidifier on Intestinal Villus Morphology，Nutrient Digestibility，N，P Excretion of Growing Mink

WANG Kai-ying，BAO Kun，XU Chao，WANG Xi-guo，YUE Zhi-gang，LI Guang-yu*

(InstituteofSpecialWildEconomicAnimalandPlantSciences，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Jilin132109，China)

The experiment was carried out to investigate the effect of acidifiers with different levels in the same basal diet on intestinal villus morphology，nutrient digestibility and N，P excretion in growing mink.One hundred black male minks were randomly allotted into 10 treatment groups.Every group consisted of 10 minks.The control was fed conventional fresh diet，the testing groups were added acidifier，phosphoric acid 0.4%(Ⅱ)，0.6% (Ⅲ) and 0.8%(Ⅳ)，citric acid 0.5%(Ⅴ)，1.0%(Ⅵ) and 1.5%(Ⅶ)，lactic acid 0.5%(Ⅷ)，1.0%(Ⅸ) and 1.5%(Ⅹ)，respectively.The results indicated that there were no significantly difference (P>0.05) in the DMI and digestibility of DM，CP and Ca among groups，but there were clearly increasing tendencies for these with acidifiers adding.The EE digestibility in groupⅠ and Ⅳ were significantly higher than that in group Ⅴ，Ⅸ，Ⅹ(P<0.05).The P digestibility in group Ⅷ and Ⅸ were higher than that in other groups(P<0.01)，and Ⅸ group was the best.The height of intestinal villus was similar(P>0.05) among groups，and Ⅷ group was the highest，it was 145.8% and 120.3% compared to group Ⅲ and Ⅰ.The average surface area of intestinal villus had not significantly different(P>0.05) among groups，however，it in Ⅷ group were 160.24% and 131.77% respectively to group Ⅲ and Ⅰ.There were no significantly different (P>0.05) in the density of intestinal villus；The N excrention was similar(P>0.05) among groups and the decrease tendencies with acidifiers addition was clearly，the group Ⅰ was higher 34.02% than group Ⅷ.The quantity of P excrention was significantly different (P<0.001)，group Ⅷ was the lowest and fewer 57.33% than group Ⅰ.The results showed that it can significantly improve the activity of nutrient digestion and intestinal villus morphology and decrease N，P excretion，by adding 0.5% of lactic acid during hair growth period in mink diets.

acidifier；mink；intestinal villus morphology；nutrient digestibility；N，P excretion

10.11843/j.issn.0366-6964.2015.04.022

2014-04-30

国家公益性行业(农业)科研专项(200903014)；吉林省科技发展计划重点项目(20110230)

王凯英(1975-)，男，副研究员，硕士，主要从事经济动物营养与生物学研究，E-mail：tcswky@126.com

*通信作者：李光玉，研究员，主要从事经济动物营养与饲养研究，E-mail：tcslgy@126.com

S839；S815

A

0366-6964(2015)04-0665-07