关于非整倍体细胞DNA倍体测定在宫颈上皮内瘤变分级中的临床应用体会

黄纯　郑申莉　彭海燕

摘要：宫颈上皮内瘤变是与宫颈癌密切相关的一组癌前病变，一般多有HPV感染，HPV将其DNA片段整合到宫颈细胞核内DNA上，可引起染色体数量的改变，形成非整倍体细胞，CIN宫颈细胞多有DNA非整倍体改变。通过DNA图像分析，来判断细胞核内染色体倍体数量及发布来判断宫颈上皮内瘤变（CIN）的严重程度。组织病理学诊断的CIN1、CIN2、CIN3/CIS和宫颈癌病历中，出现非整倍体细胞分别为66%、70%、89%和88%.非整倍体细胞越多，非整倍体细胞峰越多，病变程度越重，预后越差。本文阐述CIN分级与DNA非整倍体细胞的关系在临床中筛查和治疗的体会。

关键词：宫颈上皮内瘤变；宫颈癌；非整倍体细胞；DNA倍体

1 材料与方法

1.1取材、制片及染色 2012年1月～2014年5月，对44238名城镇及农村妇女进行了子宫颈DNA检查。参与检查的妇女的年龄在25～35岁，平均年龄（37.5±5.0）岁，排除无完整宫颈及行宫颈治疗的。用宫颈刷在阴道扩张器直视下取材。宫颈样本收集后，经化学及物理处理，使细胞平铺在玻片上，每例制成两张薄层细胞片，其中一片进行巴氏染色做常规细胞学诊断，另外一片进行FeulgenDNA染色做DNA定量测定。

1.2细胞学诊断 巴氏染色片经两位有经验的细胞病理医师阅片。根据Bethesda诊断分别为5组：良好；ASCUS；LSIL；HSIL/CIS；鳞状上皮癌。全自动DNA倍体分析仪对Feulgen染色片中的每一个细胞进行123个核特征扫描分析，自动将细胞分类并测出其细胞核内DNA含量。出现细胞核DNA倍数>5c细胞片，诊断为倍体异常细胞即阳性片，若无>5c细胞者，为阴性片。常规细胞学异常者或DNA检测阳性病例，均需进一步做阴道镜、子宫颈的活检，进行病理组织学诊断。

2 结果

2.1 DNA图像分析仪在筛查CIN2和CIN2以上病变的敏感性 用宫颈活检病理诊断结果作为依据，在992例中，CIN1 618例，CIN2 200例，CIN3/CIS 114例和侵润癌60例（表1）。若将常规细胞学LSIL或HSIL定为活检标准，常见细胞学筛查CIN2或CIN2以上病变（374例）的敏感性为39%，特异性为91%；筛出CIN3或CIN3以上病变（174例）的敏感性为52%，特异性为86%。DNA定量分析仪若以1个或超过1个>5c细胞为活检标准，筛查CIN2或CIN2以上病变的敏感性为77%；筛查CIN3或CIN3以上病例的敏感性为85%，特异性为61%。若将3个或3个以上>5c细胞作为活检标准，筛查CIN2或CIN2以上病变的敏感性为69%，特异性为84%；筛查CIN3或CIN3以上病例的敏感性为82%，特异性为74%。

DVA倍体分析系统为正常和异常，异常包括：①1～2个>5c；②3个或3个以上>5c，但无非整倍体细胞峰出现；③有非整倍体细胞峰.

2.2非整倍体细胞与宫颈上皮内瘤变分级的关系 CIN1、CIN2、CIN3/CIS和宫颈癌等不同级别的宫颈疾病中，在每100个被测细胞中出现>2.5c的细胞分别为4.4±0.27、7.1±0.15、11.4±1.14和15.6±2.3，除CIN3/CIS与宫颈癌之间并无差别，各组之间差异均有显著性（P<0.05）；出现>5C的细胞分别有0.6±0.04、1.21±0.16、2.47±0.38和3.12±0.78，除CIN3/CIS与宫颈癌之间并无差别，各组之间差异均有显著性。除了非整倍体细胞数目不同外，不同级别CIN和宫颈癌出现非整倍体细胞的频率也是不一致的。CIN1、CIN2、CIN3和宫颈癌分别有29%、59%、84%和87%病例中可出现非整倍体细胞。

3 讨论

本研究提示CIN1、CIN2、CIN3/CIS和宫颈癌出现的非整倍体细胞的频率分别为29%、59%、84%和87%，这与其他一些研究一致，即宫颈上皮癌前病变级别越高，DNA倍体异常细胞和非整倍体细胞峰出现的频率越大。Kashyap等调查了不同分化程度宫颈癌DNA非整倍体细胞出现的频率，发现在高分化的鳞状上皮癌为64%，中度分化鳞癌为71%，低分化鳞癌为83%。以上均说明非整倍体细胞的多少与宫颈癌的恶性程度相关，非整倍体细胞越多，病变越严重，预后越差。

宫颈上皮内瘤变是与宫颈浸润癌密切相关的一组癌前病变，而HPV感染是CIN发生、发展中最重要的危险因素。HPV将其DNA片段整合到宫颈细胞核内DNA上，可引起染色体数量的改变，形成非整倍体细胞，CIN宫颈细胞多有DNA非整倍体改变。

总之，结合诱发因素，根据DNA倍体分析方法可协助宫颈细胞学判断宫颈病变的发展和严重程度，对临床有很高的使用价值，特别是宫颈CIN1、CIN2、CIN3/CIS和宫颈癌的筛查和治疗[1-2]。

参考文献：

[1]李灵洁，王开秀，杨芳，等.细胞DNA定量分析进行宫颈癌筛查的临床研究[J].中国妇幼保健，2008，23（16）：2319-2320.

[2]黄宏梅，韦雪梅，方云光.细胞DNA定量分析用宫颈癌及癌前病变早期筛查的临床观察[J].当代医学，2010，16（15）：2-3.

编辑/王敏