不同产地白术多糖含量考察

张旭

摘要：目的 分析测定浙江、安徽、河北不同产地白术的多糖含量。方法 用乙醇除去干扰物质后采用水浸提法提取多糖，以苯酚-硫酸比色法测定多糖的含量。结果 多糖含量最高的为浙江白术，其次为安徽白术，再次为河北白术。结论 浙江、安徽、河北三产地白术原药材中多糖含量有存在明显的差异。

关键词：白术；多糖；苯酚-硫酸比色法

菊科植物白术有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎等功效，常用于治疗脾虚食少，腹胀泄泻，痰饮眩悸，水肿，自汗，胎动不安[1]。白术主要含挥发油、内酯类和多糖类成分[2]。由于多糖具有独特疗效的物质基础，白术多糖在抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力、降血糖等方面的均有作用[3～5]。白术多为人工栽培品，分布广泛，主产于浙江、安徽、湖南、湖北、江西、河北等地。其中，浙江的于潜、新昌、天台等地为传统的地道产区。已有研究表明，白术随生长期或者生长地不同，药材中活性成分的含量不同[6]。近年来，国内外对白术的需求量大增，传统产地的白术供不应求，因此不同地区的白术培植得到了大力发展。研究不同产地白术中的活性成分对于白术的研究与医用具有重要的意义。本文将采用硫酸-苯酚比色法测定产地为浙江、安徽和河北的白术多糖的含量，为评判不同产地白术品质及合理用药提供科学依据。

1 材料与方法

1.1仪器与试药 采用的主要仪器为双光束紫外-可见分光光度计IU-1901（日本岛津）。使用的药品试剂包括：80%乙醇、硫酸锌、氢氧化钡、硫酸、苯酚（均为分析纯）、浙江白术、安徽白术、河北白术（由天津中医药大学提供）、葡萄糖对照品（中国药品生物制品检定，批号：110833-200503）。

1.2方法

1.2.1供试品溶液的制备 称取浙江、安徽、河北三产地白术药材粉末各0.5g，置于平底烧瓶中，分别加入80%乙醇50ml，加热微沸，计时1h停止，放置室温时滤过，滤渣中加入80℃水10ml，浸提1h，取出，趁热滤过，所得滤渣与第一次滤渣合并，加80℃水10ml，继续浸提1h，取出趁热过滤，合并2次所得滤液。将所得滤液转移至100ml容量瓶中，加蒸馏水定容。

1.2.2对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥12h的无水葡萄糖对照品50mg，加蒸馏水使溶解，转移至100ml容量瓶中，定容，制成每1ml含无水葡萄糖0.5mg的溶液，作为对照品溶液。

1.3方法学考察

1.3.1线性关系考察 精密量取质量浓度为0.5mg/ml的对照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml，分别置于具塞试管中，加入蒸馏水于各试管补至2ml溶液，然后精密加入50g/L的苯酚溶液，摇匀，迅速精密加入5ml浓硫酸，振摇，待其反应10min，置水浴中保温20 min，取出冰浴5min，于489nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y=73.234X+0.0053，r2=0.998，表明对照品溶液在浓度范围为0～8μg/ml内呈现良好的线性关系，见图1。

1.3.2精密度试验 取河北产地白术药材提取多糖供试品溶液，按供试品溶液的制备方法处理并适当稀释，于489nm波长处测定吸光度。6次测量的相对标准偏差RSD值为3.1%，表明仪器精密度良好。

1.3.3重复性试验 取浙江产地白术药材提取多糖供试品溶液，按供试品溶液的制备方法处理并适当稀释，于489nm波长处测定吸光度。RSD为3.5%，表明实验的重复性良好，见图2。

1.3.4稳定性试验 取安徽产地白术药材提取多糖供试品溶液，按供试品溶液的制备方法处理并适当稀释，分别在溶液配好并放置0、5、10、20、40、60min后测定多糖的含量，结果见图2，RSD为1.3%，表明样品用硫酸-苯酚法显色后在1h内具有良好的稳定性。

1.3.5加样回收率 称取已知含量的安徽产地白术药材粉末6份，0.5000g/份，分别加入葡萄糖对照品适量，按供试品溶液制备方法制备，于489nm波长处测定吸光度。平均回收率为98.74%，RSD为0.68%。

2 结果

取浙江、安徽、河北三产地白术药材提取多糖供试品溶液，按供试品溶液的制备方法处理并适当稀释，于489nm波长处测定吸光度，计算出样品多糖的含量，见表1。

3 讨论

我国对白术的使用历史久远，不同地域对其称谓也有所不同。产于浙江省于潜地区的白术又称为于术，品质最佳为道地药材[7，8]。于术又名于潜术、于白术、烟术。浙白术泛指产于浙江地区的白术。种术则指产于安徽地区的白术。平术指产于湖南平江地区。徽术指产于安徽省歙县即旧时徽州，品质亦优。白术最早记录于《神农本草经》，被列为上品，但和苍术一直通用，延续至宋代才有所区分。我国古代大量医药巨著对不同产地白术的特点早有记载及区分。如《本草纲目拾遗》也有记载："于术亦野生，出于潜，产县治龙脉土上者……产他处，内或无点纯白，或有黄点，总不及龙脉上产者为商品。"由此可见，我国古代医者对于不同地域，不同品类白术属性的认知与区分十分重视。

多糖类成分在强酸作用下水解生成单糖，并迅速脱水生成糠醛，糠醛与酚性物质如苯酚缩合成稳定的有色化合物，并且有色物生成量与多糖浓度存在定量关系，这样用分光光度法在适当波长（489nm） 处可以得到总糖含量，结果准确，重现性好，简便易行，应注意控制硫酸、苯酚加入时的速度，速度不同，其显色的程度也不同[7]。本实验测定方法的原理是先用80%乙醇提取以除去单糖、低聚糖、苷类及生物碱等干扰性成分，再用水提取其中的多糖类成分。多糖类成分在硫酸作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后和苯酚缩合成有色化合物，用紫外-可见分光光度法于适当波长处测定其多糖含量。考察了不同产地白术药材多糖含量的差异性，为了更全面地认识和利用白术这一珍贵的植物资源， 同时也为探讨多糖结构与功能的关系，以期为白术多糖的进一步开发利用提供参考。由此实验可得出结论浙江、安徽、河北三产地白术原药材中多糖含量存在明显的差异，含量最高的为地道产区的浙江白术，符合"一脉相承"、"沿革变迁"的特点[9]。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中国药典-白术（一部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：95.

[2]段启，许冬谨，刘传祥，等.白术的研究进展[J].中草药，2008，39（5）：附4-6.

[3]季宇彬，高世勇.多糖的研究进展[J].中草药，2003，34（增刊）：45-53.

[4]汤新江.白术多糖对小鼠免疫功能的影响[J].中医研究，1998，11（2）：79.

[5]单俊杰，田庚元.白术多糖复合物AMPB的理化性质及降血糖活性研究[J].药学学报， 2003，6（6）：38.

[6]寿旦，戴诗文，章建民，等.白术微管液相色谱含量测定方法及在种质资源调查中的应用[J].中华中医药学刊，2009，27（1）：61-62.

[7]张锦文.紫外分光光度法测定枸杞中多糖含量[J].亚太传统医药，2008，4（1）：31.

[8]田兰，毕升顺，孙稳健，等.白术的化学模式识别[J].中国中药杂志，2003，28 （2）：143.

[9]张铁军.中药质量认识与评价[J].中草药，2011，42（1）：1-9.

编辑/成森