HPLC法测定依托度酸胶囊的含量

王增日

（鲁南制药集团股份有限公司，山东临沂276000）

HPLC法测定依托度酸胶囊的含量

王增日

（鲁南制药集团股份有限公司，山东临沂276000）

目的建立高效液相色谱法测定依托度酸胶囊中依托度酸含量的方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Diamonsil C18柱（4.6 mm×150 mm，5μm）；乙腈：水＋磷酸［520∶480（500＋0.25）］为流动相，流速1.5 mL·min－1，检测波长为274 nm。结果在选定的色谱条件下依托度酸胶囊中辅料对主药无干扰，依托度酸在24.98～199.8μg·m L－1浓度范围内峰面积与浓度线性关系良好，相关系数r＝0．999 9，平均回收率为99．6%，RSD为0．47%（n＝9）。结论本方法简便、准确，专属性强，可用于依托度酸胶囊中依托度酸的含量测定。

依托度酸；高效液相色谱法；含量测定；胶囊

1985年，依托度酸由Wyeth Pharms Inc（惠氏制药公司）首次在英国上市，随后在美国等国上市，其上市剂型为片、胶囊（200～500 mg），缓释片（400～500 mg）［1］。依托度酸为非甾体抗炎药，具有抗炎、解热和镇痛作用。其作用机理可能是通过阻断环氧合酶的活性，从而抑制了前列腺素（PG）的合成。本品为非类固醇抗炎药（NSAIDs），作为镇痛及消炎药，其疗效可与阿司匹林、其他镇痛药及许多目前最常用的处方用NSAIDs相比［2］。文献有报道［3～7］，用紫外分光光度法测定依托度酸片半成品的含量，依托度酸缓释片含量及其甲基衍生物的高效液相色谱（HPLC）法测定，HPLC法测定依托度酸双层片中主药的含量，HPLC法测定依托度酸及其在大鼠的药动学，HPLC法测定依托度酸缓释片中的有关物质，有关依托度酸血药浓度测定研究国外有报道［8～11］，作者未见有HPLC法测定依托度酸胶囊的文献。本试验采用HPLC法测定依托度酸胶囊含量，方法简便、专属性强，结果准确，制剂中的辅料对分离无影响。

1 仪器、试药及试剂

Agilent1100高效液相色谱仪；VWD检测器；Mettler Toledo AG285电子天平；JCX－600GZ超声波清洗机；依托度酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100667－200401，含量：100.0%）；依托度酸胶囊200 mg样品（山东新时代药业有限公司，批号：012110601、012110602、012110603）；乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，试验用水为二次蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 溶液配制

2.1.1 色谱条件 色谱柱为Diamonsil C18柱（4.6mm×150 mm，5μm）；乙腈：水＋磷酸［520∶480（500＋0.25）］为流动相，流速1.5 mL·min－1，检测波长为274 nm，进样量20μL。

2.1.2 溶液制备 对照品溶液的制备：精密称取依托度酸对照品25 mg，置100 mL量瓶中，加流动相适量，振摇使依托度酸溶解，加流动相稀释至刻度，摇匀，制成含依托度酸0.25 mg·mL－1的溶液，作为对照品储备溶液。精密量取储备液2 mL，置5 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得含依托度酸0.10 mg·mL－1的对照品溶液。

供试品溶液的制备：取依托度酸胶囊内容物，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于依托度酸10 mg），置100 mL量瓶中，加流动相适量，振摇使依托度酸溶解，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

空白溶液：按处方量取除主药成分的辅料，按供试品溶液制备方法制备，作为空白溶液。

2.2 系统适用性试验 精密量取“2.1.2”项下对照品溶液，理论塔板数不低于2 000，分离度均大于1.5。

2.3 空白试验 取供试品溶液、对照品溶液和空白溶液，按上述色谱条件进行测定，供试品溶液主峰的保留时间与对照品溶液主峰的保留时间一致，且空白辅料无干扰，见图1。

图1 HPLC色谱图A.对照品溶液；B.供试品溶液

2.4 线性关系 精密吸取对照品储备溶液0.5、1.0、2.0、3.0和4.0 mL，分别置5 mL量瓶中，再分别加流动相稀释至刻度，摇匀，分别进样。以依托度酸浓度（μg·mL－1）为横坐标，依托度酸峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程为：Y＝70．951X＋143．66，r＝0．999 9。其中，Y为依托度酸峰面积，X为依托度酸浓度（μg·mL－1）。结果指出在24.98～199.8μg·mL－1浓度范围内有良好的线性关系。

2.5 精密度试验 取同一对照品溶液，按上述试验条件，同日内测定6次，依托度酸的峰面积的RSD为0.43%。连续5 d（每天进样1次）进行测定，依托度酸的峰面积的RSD为0.77%。

2.6 稳定性试验 取同一供试品溶液，按上述试验条件于配制后0、2、4、6、8 h测定，依托度酸的峰面积的RSD为0.49%，表明供试品溶液在8 h内稳定。

2.7 重复性试验 对同一批号样品分别取样6份，按“2.1.2”项下方法配制6份供试品溶液，分别按上述试验条件测定，按外标法以依托度酸峰峰面积计算含量，含量结果的RSD为0.53%。

2.8 回收率试验 按处方量取高（120%）、中（100%）、低（80%）3种浓度的依托度酸对照品，每个浓度分别称3份均加入处方量辅料，制成供试样品，按“2.1.2”项下方法配制供试品溶液。分别精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μL注入液相色谱仪，按上述色谱条件，测得回收率为99.6%，RSD＝0．47%（n＝9）。

2.9 样品含量测定 取本品3批，按“2.1.2”项下制备供试品溶液并按上述试验条件测定，计算依托度酸胶囊中依托度酸的含量。结果见表1。

表1 样品结果测定结果

3 讨论

本文建立了HPLC法测定依托度酸胶囊含量的方法，依托度酸在225 nm、274 nm处有最大吸收，且在274 nm处辅料没有干扰，故检测波长定为274 nm，对测定没有影响，保证了方法的专属性。

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Determ ination of etodolac in Etodolac Capsules by HPLC

WANG Zeng-ri
（Lunan Pharmaceutical Group Limited Company，Linyi276000，China）

ObjectiveTo establish an HPLCmethod for the determination of etodolac in Etodolac Capsules.MethodsHPLCmethod was adopted with Diamonsil C18column（4.6 mm×150 mm，5μm）.A mixture of acetonitrile：water＋phosphoric acid［520∶480（500＋0.25）］was used as themobile phase.The flow rate was 1.5 mL·min－1with the detection wavelength at274 nm.ResultsAt the validatedmethod，the excipienthad no interference to the principalagent.A linear range of etodolac was 24.98～199.8μg·mL－1（r＝0.999 9）.The average recovery was 99.6%with RSD＝0．47%（n＝9）.ConclusionThismethod was simple，accurate，specific and could be used for the determination of etodolac in Etodolac Capsules.

Etodolac；HPLC；Determination；Capsule

R927.2

A

2095－5375（2015）08－0451－003

王增日，男，工程师，研究方向：药物研发与注册，E－mail：1157014084＠qq.com