甲状腺微小乳头状癌CK19 和CD56 的表达及与疾病进展的关系

郭 苗，张冠军

甲状腺微小癌是指直径≤1 cm 的甲状腺癌，最常见的是甲状腺微小乳头状癌(PMC)[1]。PMC 的病理组织学多呈滤泡样结构，缺乏边界，常无包膜。 但是由于其属于微小病变，常规的影像学诊断易出现漏诊。 甲状腺乳头状增生也常会表现为有乳头状结构，与PMC 的镜下特点有较多的相似之处，导致鉴别诊断困难[2]。 而在甲状腺手术时进行术中冰冻切片检查，虽然有助于减少漏诊率，但是术中冰冻切片的局限性限制了诊断的准确率[3]。 因此，寻找有效的分子标记物进行PMC 的诊断是当前研究的热点之一。 目前认为，CK19、CD56 的表达在恶性肿瘤诊断中起着重要的作用[4]，但是用于鉴别PMC 的报道还不多。 本研究通过免疫组化检测CK19、CD56的水平， 探讨其在PMC 的表达差异及与疾病进展的关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择2012 年1 月～2015 年1 月笔者医院收治的120 例PMC 患者作为观察组，纳入标准：≤1 cm 的甲状腺乳头状癌，病程＜3 年，未接受放、化疗，除外合并其他恶性肿瘤。 选择同期在两院诊治的120 例甲状腺乳头状增生患者作为对照组，纳入标准：通过临床、影像学、病理检查确诊，病程＜3 年， 除外合并其他恶性肿瘤。 两组的年龄、性别、体重指数、发病部位、病灶直径等基线资料对比差异无统计学意义(P ＞0.05，表1)。

1.2 免疫组化检测 CK19 和CD56 蛋白单克隆抗体工作液购自北京中杉生物工程有限公司，将手术中取得的患者病灶部位病理标本进行常规石蜡切片，实验步骤按试剂说明书进行。 免疫组化结果判定：CK19 蛋白着色部位在细胞浆，呈现棕黄色颗粒；CD56 蛋白着色部位在细胞膜，呈现棕黄色。 高倍镜(×200)下随机选取5 个视野，计数阳性细胞数，阳性细胞的百分比≥10.0%判定为阳性。

1.3 临床指标 通过病历收集患者的一般资料和临床病理特征，包括年龄、性别、体重指数、发病部位、病灶直径、肿瘤分期、组织学分化、淋巴结转移等，临床病理特征根据国际肿瘤组织的判定标准进行判定[4]。

1.4 统计学方法 选择SPSS14.00 软件进行数据分析，计数数据的比较以及在各种临床病理特征间的比较采用χ2检验，计量数据比较采用t 检验，以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病理特征对比 观察组：肿瘤呈实性，无明显包膜，呈结节状，镜下可见乳头状结构不明显，癌细胞核大淡染，呈毛玻璃样，有核内包涵体。 对照组：病灶多数无完整包膜，切面可见结节状、灰白色区域，镜下可见乳头状结构，有纤维血管轴心，细胞核圆形，未见砂粒体或钙化。

2.2 免疫组化结果对比 CK19 和CD56 在观察组中的阳性表达率分别为83.3%（100/120）和6.7%（8/120），在 对 照 组 分 别 为5.0%（6/120）和60.0%（72/120），两组间比较差异均有统计学意义(P ＜0.01)。

2.3 CK19 和CD56 在不同临床病理特征PMC 中表达 在观察组中，CK19 和CD56 在不同临床分期、分化程度与淋巴结转移组织中的阳性表达率有统计学差异(P ＜0.05，表2)。 临床分期越高、分化程度越低和有淋巴结转移者的CK19 的阳性表达率越高，CD56 的阳性表达率越低。

3 讨论

随着健康体检工作对甲状腺疾病的重视和甲状腺结节细针吸取细胞学技术的广泛开展，甲状腺微小癌的检出率逐渐增多[5]。 甲状腺微小癌的生长缓慢，可在甲状腺内局限数年至数十年，预后相对比较好， 但其中也有大约15.0%的患者存在侵袭表型，使得预后不佳[6]。 本研究结果证实，观察组肿瘤呈实性，无明显包膜，内镜下可见乳头状结构不明显，癌细胞核大淡染呈毛玻璃样。 对照组多数病灶无完整包膜，切面可见结节状区域，内镜下可见乳头状结构，细胞核圆形，未见砂粒体或钙化。 但是在临床上易把乳头状增生错误地诊断为PMC， 或把PMC 当作乳头状增生[7]。 这些误诊在甲状腺冰冻切片及细针穿刺细胞涂片时更容易发生，不利于进行手术指导与预后判断。 为此，建立可靠、可行的检测手段，对于PMC 患者的早期诊断和治疗具有重要的临床价值。

表1 两组基线资料对比(n=120)

表2 CK19和CD5在不同临床病理特征PMC中表达比较

研究表明，PMC 的发生、发展、转移是一个涉及多分子和多基因相互作用的复杂过程，其中肿瘤抑制基因的突变、原癌基因的过度表达等均与PMC 发生、发展相关[8]。 CK19 阳性表达是甲状腺癌的重要诊断标记物，CK19 在甲状腺乳头状癌中可以强烈而弥漫地表达，而在正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿、甲状腺乳头状增生、甲状腺腺瘤中不表达，认为CK19 是区分乳头状癌与甲状腺良性病变的一个有用标记物[9]。 CD56 抗原表达于神经元、星形细胞、NK 细胞、T 细胞， 其表达降低或缺失与肿瘤细胞的迁移能力、肿瘤的恶性程度及预后相关。 在正常甲状腺、 滤泡状腺瘤及髓样癌中CD56 都有不同程度的表达， 但在甲状腺乳头状癌中则大部分表达降低，这对诊断甲状腺良性病变与恶性病变有很大帮助。 本研究结果显示，CK19 和CD56 在观察组中的阳性表达率分别为83.3%和6.7%，在对照组中的阳性表达率分别为5.0%和60.0%，差异都有统计学意义(P ＜0.05)，也证实两者是鉴别增生性病变与乳头状癌较为理想的标记物。

PMC 尤其是呈滤泡状排列的PMC 需要与增生性病变相鉴别，除了病理特征外，在临床上还需要结合其他的分子标记物来诊断。 CK19 表达于单层上皮细胞， 在甲状腺肿瘤中主要表达于甲状腺癌；CD56 为神经细胞黏附分子， 在恶性肿瘤如甲状腺癌中多呈阴性表达，是诊断甲状腺癌重要的辅助标记物[10-11]。 本研究发现，在120 例PMC 患者中，临床分期越高、 分化程度越低和有淋巴结转移者的CK19 的阳性表达率越高，CD56 的阳性表达率越低(P ＜0.05)， 表明PMC 的临床病理特征与CK19 和CD56 的表达水平有一定的相关性， 有助于PMC 病情的判断。

总之， CK19 和CD56 的免疫组化检测能有效鉴别微小乳头状癌和乳头状增生，且CK19 和CD56的表达水平与PMC 的临床病理特征有一定的相关性。

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